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关键词： 里西裸囊菌   活性物质   工程菌株   限制性内切酶介导转化  

摘要： 本文以重要的植物寄生性线虫（根结线虫）为靶标，利用系统筛选技术筛选出了具有高杀线虫活性的1株真菌za-130，并对该菌的分类地位、线虫的室内防效、菌株的发酵条件和安全性评价进行了初步研究，在此基础上分离鉴定了杀线虫的活性产物；此后通过限制性内切酶介导技术建立了该菌株的随机插入转化子库，并筛选到了具有更高杀线虫活性（原始菌株1.5倍以上活性）的转化子20株，同时分离到了菌株za-130中可能与杀线虫活性物质产生途径相关的候选基因序列片段。主要结果如下： 1．采用摇瓶发酵初筛，从全国618份土壤中分离的1319份真菌菌株中获得了具有杀南方根结线虫活性的真菌菌株127株，其中能够全部击倒根结线虫二齢幼虫的有29株。经不同浓缩倍数处理后多次重复试验筛选，从上述29株真菌中筛出杀线虫活性高、重复性好的菌株1株，编号为za-130。形态学鉴定za-130为里西裸囊菌（G. reesii）。温室盆栽防效试验显示：za-130发酵浓缩5×液在45d和80d对番茄根结线虫的防治效果均在80%以上；安全性评价试验表明za-130急性经口毒性和急性经口半数致死量（LD50）均属于“微毒”级，对动物和人类安全无毒。上述结果显示za-130对番茄根结线虫具有较好的防治效果，该菌株具有潜在的研究和开发前景。 ***-130发酵液经5倍无水乙醇沉淀，再经大孔吸附树脂、硅胶柱层析和Sephadex LH-20葡聚糖凝胶柱层析等分离，最后经过HPLC循环制备并经冷冻干燥，得到了纯度为98.296%的杀线虫活性物质纯品。za-130杀线虫活性物质纯品为浅黄色粉末状物质，分子量为326，紫外吸收峰在275nm；红外光谱图谱显示za-130纯品具有亚甲基、羟基、碳碳双键等基团，元素分析表明其含有C、H和O三种元素，核磁共振1H、13C、dept135、COSY、HMQC、HMBC图谱，可以初步推测上述纯品为5,5(oxybis（hydroxymethylene）)bis（4H-pyran-2-carboxylicacid）。该纯品具有良好的光、热、酸碱稳定性，同时其具有良好的光、热、酸碱稳定性。 3．菌株za-130发酵培养基以玉米淀粉为最佳碳源，以食品发酵鲜鱼蛋白胨为最佳氮源。发酵的最佳培养基配方为：2.0%玉米淀粉+0.4%食品发酵鲜鱼蛋白胨+0.1%K2HPO4+0.03%MgSO4+MnCl（20.1mmol/L）。最佳发酵条件为：225℃～28℃、pH6.5、液体种子培养48h、接种量10%、250mL三角瓶装20mL～50mL、摇床转速以150r·min-1～200r·min-1、发酵120h。 4．通过摸索Za-130原生质体制备过程中的细胞壁酶类型及浓度、摇培时间、裂解时间和再生培养基种类，建立了Za-130的原生质体制备方法和再生体系，并在此基础上，通过PEG介导的转化方法，将GFP标记载体转入Za-130，建立了G. reesii高效的遗传转化体系，同时成功获得了GFP荧光标记高效表达的菌株。 5．通过对限制性内切酶介导的转化（REMI）的方法的优化，建立了Za-130的高效REMI转化体系，并获得了含有1182个独立转化子的随机插入转化子库，通过生物测定筛选，初步获得了显著提高杀线虫活性的转化子20株，其中编号为Gr-M286的菌株比野生型菌株活性提高3倍以上。在此基础上，通过Southernblot确认了Gr-M286为单拷贝、单位点插入突变体，通过质粒拯救获得了插入位点的部分侧翼序列。

关键词： 分离工程   学术会议   过程强化   传质   天津大学   节能   创新   国家自然科学基金委员会   中国化工学会   同行评议  

摘要： 第四届全国传质与分离工程学术会议于2011年11月18—21日在天津大学召开,主题为"过程强化、节能与创新"。本次会议由中国化工学会化学工程专业委员会、国家自然科学基金委员会、天津市化工学会和天津大学共同主办,由天津大学承办。本次会议共采用投稿141篇,经同行评议筛选并经作者同意,将其中60篇论文收入《化工进展》2011年第30卷增刊(论文专刊)。

关键词： 公共物品供应   生产   “俘获”  

摘要： 在公共物品的"多中心"供给模式中,供给过程往往被划分为供应和生产两个环节,并且分别被赋予了不同的职能定位,这种分离试图为应对公共物品通常供给不足的问题提供解决方案。然而,从公共选择的视角来看,以效率为核心的生产对供应的反馈作用、对公共物品的产出有可能产生影响,表现为有关公共物品决策的政治过程中的"俘获"行为加深,导致供给产出量的扭曲。在我国地方公共物品的供给实践中,这种现象表现为"政绩工程"的产生,即作为公共物品供应者的地方政府受到作为生产者的营利性组织"俘获"行为的影响,导致某些公共效用低下的公共物品产出过剩。因此,实行供应与生产相分离必须以公众偏好更有效地表达为前提,确保更具有公共性的公共选择结果,同时加强对政府采购的监管。

关键词： 表柔红霉素   基因工程菌株   分离纯化  

摘要： 目的建立天蓝淡红链霉菌基因工程菌(SIPI-A0707)发酵液中表柔红霉素的分离纯化工艺。方法调节发酵液pH值为5,用甲醇抽提表柔红霉素;先采用大孔弱酸性阳离子交换树脂D152,吸附流速为2mL/min,0.05mol/L HCl-50%丙酮解吸;然后采用氯仿-水萃取体系,萃取pH为6.5,反萃取使用pH为1.5的蒸馏水,最后采用大孔吸附树脂Microsphere-1;吸附pH为7,吸附流速3mL/min,50%甲醇解吸分步收集,浓缩冻干。结果表柔红霉素HPLC纯度达到98.1%,总收率为40%以上。结论此工艺在生产上可行性较高,适合工业大量制备。

关键词： Methanolysis   Glycerol separation   Immobilized lipase   Packed-bed reactor   Biodiesel plant  

摘要： A process model for efficient glycerol separation during methanolysis in an enzymatic packed-bed reactor (PBR) was developed. A theoretical glycerol removal efficiency from the reaction mixture containing over 30% methyl esters was achieved at a high flow rate of 540 ml/h. To facilitate a stable operation of the PBR system, a batch reaction prior to continuous methanolysis was conducted using oils with different acid values and immobilized lipases pretreated with methyl esters. The reaction system successfully attained the methyl ester content of over 30% along with reduced viscosity and water content. Furthermore, to obtain a high methyl ester content above 96% continuously, long-term lipase stability was confirmed by operating a bench-scale PBR system for 550 h, in which the intermediates containing methyl esters and residual glycerides were fed into the enzyme-packed columns connected in series. Therefore, the developed process model is considered useful for industrial biodiesel production. (C) 2011 Elsevier Ltd. All rights reserved.

关键词： 视图分离   多视图   视图毗邻关系  

摘要： 对工程图的多视图分离和视图关系的确定是基于工程图的三维重建和检索领域中一个重要的预处理。针对传统的基于坐标轴投影的视图分离方法,提出一种改进的方法实现多视图的分离,并在视图关系的确定过程中,采取分类策略,分别确定基本视图之间及辅助视图的毗邻关系图,然后进行合并成整个工程图的视图毗邻关系图并确定视图关系。最后,以一个工程图实例,对该方法进行了验证。

关键词： 大鼠主动脉   内皮细胞   酶消化法   组织贴块法   血管组织工程  

摘要： 建立一种简单高效的血管组织工程内皮细胞分离培养方法.无菌分离大鼠主动脉,剪成约5mm×2mm的组织块,内膜朝下平铺于含Ⅰ型胶原酶的细胞培养皿中消化30min,收集内皮细胞;其后,取出组织块继续内膜朝下置于另一培养皿中贴壁培养,直至细胞爬出并融合成单层.观察细胞形态,并分别对两种方式获得的传至第5代的细胞进行Ⅷ因子免疫组化鉴定.酶消化获得的细胞数目约为4.8×103个,组织块继续贴壁培养5d后细胞数目可达5×105mL-1.细胞多呈三角形或多角形,融合后以"铺路石"状排列.两种方式所获得的细胞均表现出内皮细胞特征,纯度达100%.酶消化结合组织贴块法为血管组织工程提供了获取大量高纯度内皮细胞的新方法.

关键词： 价值工程   汽油池   叔烷基醚   乙醇   ETBE   耦合  

摘要： 根据高清洁汽油的发展趋势及其要求,结合中国汽油池催化裂化汽油高达70%以上的特点,在生物基醇醚燃料制备价值工程研究的基础上,提出了通过多重耦合制备醇醚燃料来破解汽油升级与乙醇汽油困局的发展思路,分别针对叔烷基醚及ETBE制备提出了复合精馏-萃取和精馏-萃取耦合分离纯化工艺,并以ETBE为例进行了过程模拟与实验研究,结果表明,两种工艺可分别使醇醚分离能耗降低约25%和52%以上,尤其是以ETBE/乙醇的耦合分离纯化技术为杠杆,联产制备ETBE和脱水乙醇,甚至还可包括联合制备TAEE/THEE,可对醇醚燃料发展及炼油、汽油池价值提升产生积极的杠杆效应。

关键词： 分离工程   教学改革   教学实践  

摘要： 分析了进行化工分离工程教学改革的必要性;从课堂教学、作业形式和实践性教学环节入手,对如何改革进行了探讨;结合教学实践进行了初步尝试,以培养学生的工程实践能力。

关键词： 制药工程   制药分离工程   教学方法  

摘要： 制药分离工程是制药工程专业的一门专业主干课程。为了培养合格的制药工程专业人才,结合制药工程专业的特点,依据社会需求,通过对该课程建设的实践,从教学内容、教学方法和实践教学等方面探索了制药分离工程教学的新思路。