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关键词： 组织工程骨   人骨髓间充质干细胞   脱钙骨基质   骨缺损   体外实验   分离培养  

摘要： 随着医疗技术的进步，骨移植材料的应用越来越多，目前虽然自体骨仍然是骨移植的最好材料，自体骨移植的效果良好，但其数量有限，且术后并发症较多，其应用受到一定限制。因此在骨不连骨缺损的治疗中，人工骨越来越受到研究人员的关注，其中以组织工程骨的研究发展最为迅速。\n 目的：制备具有成骨活性的组织工程骨。\n 方法：本实验主要包括两个阶段，第一阶段为人骨髓间充质细胞的分离培养，第二阶段为构建具有成骨活性的组织工程骨。\n 本课题与志愿参加实验患者已进行充分协商与沟通，并始终坚持受试者的健康，安全高于一切的原则。\n 取21例骨缺损患者骨髓做体外分离培养得到骨髓间充质干细胞。\n 对已分离培养得到的骨髓间充质干细胞进行Giemsa染色，以镜下观察细胞形态。\n 以β-甘油磷酸钠，VitaminC，地塞米松为诱导剂，对骨髓间充质干细胞进行成骨诱导，观察骨髓间充质干细胞的形态变化。\n 应用茜素红染色，四环素染色，碱性磷酸酶染色，Ⅰ型胶原蛋白组化染色，以确定传代所得细胞为成骨细胞。\n 以脱钙骨基质(DBM)为支架材料，复合三代骨髓间充质干细胞构建成骨活性组织工程骨。\n 结果：按照组织工程相关实验操作方法与步骤，我们成功的在体外分离培养了骨髓间充质干细胞，通过诱导分化，骨髓间充质干细胞成功大量向具有成骨活性的成骨细胞分化，与脱钙骨基质复合所构建的组织工程骨内细胞基质大量分泌。\n 结论：组织工程骨具有良好的组织相容性，具有成骨潜能，临床应用前景大。

关键词： 膜分离技术   水环境处理   环境工程   应用  

摘要： 随着各种自然资源不断被开发利用,自然资源已经在渐渐减少。人们不得不从那些含量较为少的物质中去进行分离,以便获得其中有用的物质。传统的分离手段已经满足不了现在社会的要求,于是新的分离技术就诞生了,比如膜分离技术、反应分离联用技术等。而膜分离技术是其中最为完善,也是应用最广的一种新型分离技术,尤其适用于处理工业废水以及生活污水。此外,该技术不仅耐用可靠,分离效果也极好。本文主要探讨了膜分离技术的相应原理,还介绍了国内外几种膜分离技术的类型,并着重介绍了膜分离技术在水处理环境中的应用,从而造福于环境工程。

关键词： 三七   三七总皂苷   超声波提取   人参皂苷  

摘要： 三七为五加科人参属植物三七[Panax notoginseng (Burk.) F. H. Chen]的干燥根及根茎,性味甘,微苦,温,入肝、胃经,有散瘀止血,消肿止痛之功效。三七是我国重要的传统药物,也是历史悠久的药食两用天然资源。自上世纪80年代以来,随着三七有效成分和药理作用的不断阐明,三七产品开发日益急增,种植业和加工业日逾发展,已形成了一定的产业规模。三七总皂苷(Panax notoginsenosides, PNS)是三七主要的活性成分,约占三七主根重量的9-13%,以其为原料药开发的“血塞通”系列制剂已成为中成药治疗心脑血管疾病的一线药物。因此,对三七总皂苷提取分离关键技术进行工程化研究将有利于推动三七产业的发展壮大。 本论文在已有大孔吸附树脂柱层析分离技术的基础上,通过大量的小试、中试以及工艺验证,确定了超声波提取三七总皂苷的生产工艺：应用超声波提取技术进行高效率与低能耗提取、应用高分子絮凝沉淀技术对大分子杂质进行处理后,再采用大孔吸附树脂分离、脱色树脂纯化,最后通过喷雾干燥得到三七总皂苷。对超声频率、提取溶剂和原料粒度等进行了单因素考察,并采用正交实验对关键工艺参数进行了优化,确定了提取次数、提取时间和提取温度等关键影响因素。并对产品进行了含量测定、指纹图谱分析,树脂残留,溶剂残留,以及汞和砷分析方法的验证和检测。 以此工艺生产的三七总皂苷含量以人参皂苷Rg1,Rbl,Re,Rd,和三七皂苷R1的总量计达80%以上,高于国家现行药典标准要求,产品质量得到明显提高,总皂苷含量以五个主要皂苷计比乙醇回流提取提高了5%-10%,且提取物收率达到13%以上,比乙醇回流提取高了2%-4%,大大缩短了生产周期,更利于产品质量控制,达到了节能降耗的目的,这为云南三七资源的深加工与综合开发利用奠定了工程技术基础。 原人参二醇型皂苷和原人参三醇型皂苷不仅可以单独作为药品、保健品的原料,同时也是分离各种皂苷单体的关键步骤。本论文以三七总皂苷为原料,采用大孔吸附树脂分离手段实现分组皂苷自动化、规模化的生产,建立了适于工程化生产分组皂苷的分离纯化技术,对三七进行深度开发,提高三七附加值,延长三七产业链具有深远的意义。

关键词： 基因工程   丝氨酸蛋白酶   大豆分离蛋白   改性   分散性  

摘要： 由于大豆分离蛋白(Soy Protein Isolate, SPI)具有高蛋白含量和功能特性被广泛应用于食品诸多领域，为进一步挖掘其高附加值，使其能更好的被广泛应用，对于SPI结构改造以及提高功能性质的研究一直是国内外研究的热点。本课题通过采用基因工程技术构建高效表达耐热丝氨酸蛋白酶高产菌株，确定最佳的诱导表达条件，通过分离纯化得到纯净的耐热丝氨酸蛋白酶并对SPI进行酶解改性，系统的研究了改性过程中的影响因素对SPI分散性指标的影响，并在乳制品行业中奶粉产品的加工应用进行了深入探讨，主要研究内容及结论如下： (1)以枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的基因组DNA为模版，根据GenBank中报道的枯草芽孢杆菌耐热丝氨酸蛋白酶基因序列(HM154526)设计引物，克隆出蛋白酶基因的目的片段，成功构建重组质粒pET-28a-Sapr，将其转化为高产丝氨酸蛋白酶的基因构建菌株BL21/pET-Sapr。通过对融合蛋白的诱导表达：确定最佳时间为4h，最佳温度为25℃，通过对粗酶液的脱脂牛乳平板定性分析表明具有生物学活性。 (2)通过硫酸铵分级沉降及离子柱层析交换等步骤对粗酶液中丝氨酸蛋白酶进行纯化，纯化产物经SDS-PAGE电泳分析达到纯化要求，与纯化前的粗酶液相比，酶活力提高了15.1倍，达到322U/mg，但回收率仅为2.8%，同时确定丝氨酸蛋白酶的最适温度为70℃，最适pH为9.0。 (3)通过SPI分散性指标，确定单因素实验最适的反应条件：底物浓度为8%，酶解时间为1h，酶解温度为70℃，酶解pH为9.0，酶活浓度为4000U/g。以加酶量、底物浓度、温度、pH值为自变量，以分散度为指标，通过四元二次正交旋转组合及响应面的分析，确定最优酶解反应条件：加酶量为4070U/g、底物浓度6.0%、反应温度71℃、反应pH9.0，此条件下的分散度为12.78。 (4)通过单因素实验添加不同比例的改性SPI，利用配方奶粉的溶解性、润湿性、分散性和小白点数量的检测指标确定添加3%的改性大豆分离蛋白替代部分脱盐乳清粉，接近人体吸收的氨基酸模式，各项指标均符合检测要求。并通过添加改性SPI与添加未改性SPI的配方奶粉指标进行对比，改性后的SPI各项指标均明显高于添加未改性SPI的配方奶粉。

关键词： 转谷氨酰胺酶   大豆分离蛋白   改性   猪肉肠  

摘要： 大豆分离蛋白是大豆蛋白最为精致的形式，营养价值极高，拥有蛋白质的各种功能性质，作为食品添加剂应用到食品工业中，可提高食品的营养价值，还能改善食品的品质。对大豆分离蛋白进行改性，可以使其在特定的食品加工中发挥更好的作用。 本文利用基因工程技术，以茂原链霉菌总DNA为模板扩增TGase目的基因构建基因工程菌使其在大肠杆菌中得到表达，确定了最优表达时间和温度为25℃和5h，再通过发酵技术获得TGase。单因素实验分析得到的TGase改性SPI凝胶性的最佳工艺参数分别为酶浓度40%、pH9、时间3h、底物浓度12%、温度30℃，设计正交旋转组合实验和响应面分析得到的TGase改性SPI凝胶性的最佳工艺条件为酶浓度为48.40%、pH为8.46、底物浓度为9.95%，此时测得大豆分离蛋白凝胶性10.12。将不同浓度的凝胶型SPI添加到猪肉肠中研究其对猪肉肠品质的影响，经质构仪分析，凝胶型SPI对猪肉肠的硬度、咀嚼性、弹性和内聚性伴随添加SPI浓度的增加呈现先增大再减小的现象，添加6%的SPI浓度的猪肉肠质构特性最佳，对其得率测定，在SPI浓度为8%时，猪肉肠得率与添加淀粉的得率接近，且添加SPI浓度增加，猪肉肠得率增大，对添加不同浓度SPI的猪肉肠进行感官评定，在添加量为6%时感官评定效果最佳。

关键词： 生物分离工程   教学改革   工程实践能力   科研创新能力  

摘要： 生物分离工程是生物技术实现产业化的关键所在,是生物工程专业本科生的一门必修课程。依据生物工程专业学生培养目标,结合生物分离工程课程特点,探索出一种理论与实际应用密切结合、课堂走入生产现场的新型教学模式,并采用丰富的教学方法手段与有效的评价机制来实施教学过程,注重对学生综合素质与科研创新能力的培养,强化学生的工程实践能力。

关键词： 有限责任公司   股份不公开公司   饮料工业   食品工业   合肥   安徽   膜集成工艺   果蔬汁   膜过滤   陶瓷复合   膜分离技术   脱盐   腌制   专家  

摘要： 世杰是专业致力于膜分离技术研发和膜分离系统制作的高科技股份制公司,是中国膜工业协会理事单位。公司拥有先进的陶瓷微滤、陶瓷超滤、陶瓷复合(特种)、有机超滤、纳滤、反渗透以及工业化膜集成工艺技术,专业为客户提供全方位的膜技术咨询(膜技术服务与支持)、成套膜分离系统设计、制作、安装、调试、维护、操作培训以及膜分离单元的工艺设计、工艺创新、工艺整合等专业服务。世杰拥有雄厚的技术创新及膜集成工艺研发实力,成套膜分离系统成功应用领域涉及:食品工业、饮料工业、果蔬汁、果酒、多糖、功能性低聚糖、天

ISBN: (纸本)9787030365156

关键词： 环境工程   膜分离技术   应用  

摘要： 随着社会经济水平的不断提高,带动了膜分离技术的发展和进步.我国的膜分离技术经过多年的研究也取得了显著成效.现代膜分离技术与传统分离工艺相比,具有无化学变化、生产过程无污染、高效低能耗等优势,在环境工程中也有很好的应用前景.本文主要围绕膜分离技术在环境工程中的应用情况展开讨论.

关键词： 公铁路分离立交桥   桥台基础   施工方案   扩大基础  

摘要： 本文以乌海市海南区至乌达区一级公路工程第二合同段海公铁路分离立交桥工程为例,从桥台基础及下部构造的施工等方面阐述了有关桥台基础及下部构造工程的具体施工流程及要点,从而为类似工程提供了相应的施工指导。