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关键词： 鸭坦布苏病毒   卵巢   病毒分离鉴定   全基因组测序   致病性研究  

摘要： 鸭坦布苏病毒病是一种由鸭坦布苏病毒（Duck Tembusu virus,DTMUV）感染引起的鸭传染病,感染后可致雏鸭瘫痪,产蛋鸭产蛋量大幅下降。研究表明DTMUV为RNA病毒,具有高遗传多样性和快速进化等特点,且传播方式多样,常规防疫手段难以防治,该病仍然是危害鸭养殖业的主要传染病之一。目前关于鸭坦布苏病毒病的病原学研究众多,但对于鸭卵巢的损伤机制尚无深入研究,特别是病毒对卵巢卵泡的各种细胞是否存在直接影响也鲜有研究。近年来湖北省一些蛋鸭养殖场频发以产蛋下降为主的传染性疾病,初步诊断为鸭坦布苏病毒病。为了了解湖北地区DTMUV的遗传进化特点,阐明DTMUV对鸭卵巢的损伤特点及机制,开展了以下研究工作。本研究主要包括以下内容:1鸭坦布苏病毒的分离与鉴定自然感染病鸭来自于湖北省某发病鸭场,发病蛋鸭产蛋下降,伴有神经症状,剖检可见卵巢出血,卵泡变形,病鸭卵巢的组织病理学观察显示卵巢表面生殖上皮细胞增生,卵泡颗粒细胞凋亡、坏死或增生;卵泡周围出现大量的空泡状细胞;部分卵泡柄动脉增生,增生动脉的平滑肌细胞坏死并见炎性细胞浸润。自病鸭卵巢组织分离到1株DTMUV,病毒的全基因组测序结果显示该毒株与国内分离株Y和GL毒株在同一分支上,将其命名为鸭坦布苏病毒CD（DTMUV-CD）株。该毒株可在DEF细胞上生长,并于接种后24 h后产生细胞病变。2鸭坦布苏病毒对不同日龄鸭的致病性研究DTMUV-CD株感染育成鸭,感染后可见病鸭采食量下降,精神沉郁,跛行,组织病理学观察发现卵巢卵泡变形,卵泡颗粒细胞嗜酸性增强;脑组织可见非化脓性脑炎;坐骨神经束膜炎性细胞浸润,神经纤维肿胀坏死;腿部肌肉炎性细胞浸润。DTMUV-CD株感染产蛋鸭,临床症状可见病鸭产蛋量明显下降,剖检发现卵巢萎缩,无成熟卵泡,生长卵泡出血,有的卵泡外观呈灰白色胶冻状,质地较硬。组织病理学检查发现病鸭卵巢表面生殖上皮细胞和空泡状细胞增生;生长卵泡的颗粒细胞增生、空泡化或坏死,卵泡闭锁;坐骨神经束膜炎性细胞浸润;卵巢免疫组织化学染色发现病毒定位于生长卵泡的颗粒细胞胞质内。3鸭坦布苏病毒在不同细胞上的增殖研究将DTMUV-CD株接种于原代培养鸭卵巢颗粒细胞和卵泡膜细胞,DTMUV可在两种细胞上生长,分别在接种后24 h和36 h产生细胞病变,与对照组细胞相比较,感染组细胞变大变圆、折光度增强,颗粒细胞病变程度相较于卵泡膜细胞更严重。免疫荧光染色、荧光定量PCR和病毒TCID50检查结果均表明颗粒细胞的病毒载量高于卵泡膜细胞。上述研究结果表明,湖北地区有鸭坦布苏病毒病的流行,通过进化分析和同源性比对发现该毒株与国内鸭坦布苏病毒Y毒株同源性最高。DTMUV可感染育成鸭和产蛋鸭,且损伤主要表现在卵巢和神经系统。DTMUV感染产蛋鸭后定位于生长卵泡颗粒细胞内,引起颗粒细胞损伤,造成卵泡大量闭锁,从而引起产蛋下降。

关键词： 肺腺癌   磨玻璃结节   病理学   计算机断层扫描   实性成分   多因素分析   生存分析  

摘要： 目的:基于CT定量分析方法,建立肺部磨玻璃结节恶性程度以及生存情况的预测模型,从而为临床诊断及治疗提供更为准确的数据支撑。方法:通过对收集肺结节患者的临床及病理资料进行回顾性分析,纳入2014年12月至2019年10月期间于安徽医科大学附属省立医院胸外科接受肺切除手术的112例患者,并通过收集纳入患者的肺结节CT影像学资料,对其表征予以定量分析,由2位具有高年资的影像科医生及1位具有高年资的胸外科医生在未知患者临床资料的情况下统计所有患者结节影像学特征,包括最大径、肿瘤实性成分最大径、实性成分占肿瘤比率(CTR)等影像学特征。并根据CTR将患者进行分组:A组(CTR≤0.25),B组(0.25

关键词： 宫颈肿瘤   磁共振成像   肿瘤分期   宫颈肿瘤   磁共振成像   病理学   宫颈肿瘤   磁共振成像   复发   预测  

摘要： 癌症是人体内的不成熟细胞异常增殖并分化不良而形成的恶性肿瘤,常由其起始的器官或者细胞类型来命名。宫颈癌(Cervical Cancer,CC)起源于子宫颈部,是目前包括中国在内的发展中国家妇女癌症相关死亡的第二大原因,近年来,该病的发病率随着相关筛查技术的推广和普及而逐渐提高,且发病人群趋于年轻化。人类乳头状瘤病毒(Human Papilloma Virus,HPV)感染是宫颈癌的高危因素,尤其是16、18两个亚型,其他危险因素包括低收入、性生活混乱、免疫抑制及吸烟等。确诊时宫颈癌的临床分期和肿瘤的一些组织病理学特征(如分化程度、淋巴血管间隙浸润、嗜神经浸润、基质浸润深度和淋巴结状态等)均与其治疗和预后密切相关。目前,许多影像学手段已被用于宫颈癌的诊断和预后评估,相对于超声(ultrasound,US)、CT(computed tomography)等其他影像学检查而言,磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)技术在安全性、成像方式和软组织分辨率等诸多方面均具有独特优势,可以准确地显示病灶的形态、大小、边界、宫旁浸润及周围脏器侵犯,不仅为宫颈癌的早期诊断提供了丰富的信息,还为其后续治疗方案的制定及预后评估提供了重要的参考价值。目前,MRI检查已成为国际妇产科联合会(International Federation of Gynecology and Obstetrics,FIGO)推荐使用的宫颈癌分期和疗效监测的主要影像学评估手段。 MRI传统成像序列主要以形态学研究为主,具有一定局限性,而自90年代发展起来的功能成像技术,实现了从细胞或分子水平对生物组织信息进行定量或半定量分析。扩散加权成像(diffusion weighted imaging,DWI)是一种通过定量参数表观扩散系数(apparent diffusion coefficient,ADC)值的测量对组织内水分子的扩散运动状态进行量化分析的定量成像技术,目前该项技术已经在宫颈癌的相关研究中得到了广泛的应用。相比于传统DWI,长可变回波链分段读出扩散加权成像(readout segmentation of long variable echo trains—diffusion weighted imaging,RESOLVE—DWI)具有图像分辨率高、显示解剖细节好、伪影少和失真度小等优点,被广泛用于头颈部、体部肿瘤的研究。T1mapping和T2mapping成像技术是近几年发展起来的用于评价组织异常特征的定量磁共振技术。T1 mapping成像技术主要通过测量图像的纵向弛豫时间(T1值)来定量分析生物组织学特征,扫描序列包括增强前及增强后T1 mapping,具有操作简单、扫描时间短等优点,以往T1mapping成像多用于心肌病变(如心肌炎、心肌纤维化及心肌淀粉样病变等)的研究,也可用于肝纤维化、慢性胰腺炎等疾病的评估;而T2mapping成像技术则通过测量图像的横向弛豫时间(T2值)定量地反映组织的含水量,其稳定性高、可重复性好,早期该技术多用于评估关节软骨病变(如膝关节损伤、椎间盘退行性变等),然而近些年来T1 mapping、T2 mapping成像技术已逐渐应用于体部肿瘤的研究。 本课题主要采用T1mapping、T2mapping成像和RESOLVE—DWI扫描序列,首先,通过对宫颈癌初诊患者的血清学资料、MRI定量成像数据的收集,从以上三个技术层面对宫颈癌的临床特征(分期、血清学指标)进行相关分析;其次,通过收集患者的组织病理学资料,从不同技术层面对宫颈癌的病理学特征(如组织分型和分化、淋巴血管间隙浸润、嗜神经浸润、基质浸润深度及淋巴结状态)进行有效评估;最后,所有宫颈癌患者均接受为期6个月～3年的随访,以期分析T1 mapping、T2 mapping和RESOLVE—DWI定量成像技术对宫颈癌治疗后复发的预测价值。 通过本课题研究,我们希望能够发现MRI定量成像技术在宫颈癌诊断和治疗后复发预测中的应用价值,以期为临床制定合理化治疗方案和改善患者预后提供理论支持。 第一部分磁共振定量成像技术在宫预癌临床特征中的应用研究 背景和目的 1.比较T1 mapping、T2 mapping及RESOLVE—DWI定量成像技术对宫颈癌临床分期的诊断价值 2.探讨T1mapping、T2mapping及RESOLVE—DWI定量成像技术的相关定量参数与血清鳞癌相关抗原(squamous carcinoma-associated antigen,SCC-Ag)表达水平的相关性 材料与方法 1、宫颈癌患者的收集:收集2018年5月至2021年4月在郑州大学第一附属医院经手术病理或宫颈活检证实的宫颈癌患者共107例,其中低分期组(

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关键词： 脑胶质瘤   磁共振成像   T2加权成像   病理组织学   边界  

摘要： 目的:通过建立小鼠脑胶质瘤模型,研究肿瘤磁共振影像学边界与病理组织边界之间的差异性。 方法:选取5-6周龄体重范围为18g-20g的30只健康雌性C57BL/6小鼠,在相同饲养环境中饲养,于小鼠前囟前方1.0mm,右侧距中线1.0mm处钻孔,将GL261鼠源性胶质瘤细胞注射到所有小鼠颅内,建立GL261原位C57BL/6小鼠脑胶质瘤模型。待肿瘤细胞植入1周后,对所有小鼠均进行常规MRI检查,MRI扫描完成后立即处死小鼠,取出小鼠的整个脑组织制作病理组织石蜡切片并进行HE染色。利用Image J-Pro Plus软件对MRI影像学结果及肿瘤病理组织结果进行定量分析,并采用Graph Pad Prism 8统计学软件对测量所得数据进行配对t检验,计算两者之间的差异性。 结果:磁共振T2加权序列影像与病理组织切片图像在肿瘤面积、最长直径、最大宽径之间的差异均值分别为1.937±1.247mm2、0.4855±0.3914mm、0.3721±0.2708mm。磁共振成像T2加权序列上胶质瘤的面积大于病理组织切片图像上的肿瘤面积范围（P<0.05）;磁共振成像T2加权序列上胶质瘤的最长直径大于病理组织切片图像上的肿瘤最长直径（P<0.05）;磁共振成像T2加权序列上胶质瘤的最大宽径大于病理组织切片图像上的肿瘤最大宽径（P<0.05）。 结论:小鼠脑胶质瘤模型中磁共振成像显示的肿瘤范围与组织病理学范围之间存在一定的差异性。T2WI扫描获得的脑胶质瘤影像学结果中所示的肿瘤范围略大于病理切片识别的肿瘤边界。此结果可能与T2WI不能准确区分肿瘤周围脑水肿区的病理成分有关,后续有待于采用多模态多序列磁共振成像技术进一步研究。对在临床诊治中,在制定脑胶质瘤手术方案及放疗方案时,应考虑T2WI有扩大肿瘤范围的可能,尤其是在对功能区进行手术切除时。

关键词： 蛋鸡   肝破裂综合征   病因调查   病理学诊断   淀粉样变  

摘要： 鸡肝破裂综合征是一种以鸡肝脏肿大、质地变脆、出血或破裂为主要特征的疾病。该病主要感染产蛋鸡,导致产蛋量下降,死亡率可达15%,给养鸡业造成巨大经济损失。目前仅有少量文献报道该病,且至今该病的发病原因尚未完全清晰。为研究鸡肝破裂综合征的发病原因和病理学特征,本研究于2020年12月至2021年12月收集湖北地区30家蛋鸡养殖场送检的肝破裂综合征病例30例,通过临床剖检、细菌分离鉴定、PCR/RT-PCR检测、组织病理学检查等方法对病例进行病原学和病理学分析。研究内容及结果如下:1临床病例信息统计与病原学调查在收集的30例病例中检出的主要病原是鸡大肠杆菌(Escherichia coli,***)、葡萄球菌(Staphylococcus,Staph)、沙门氏菌(Salmonella,Salm)、J亚型禽白血病病毒(Subgroup J of Avian leukosis virus,ALV-J)和马立克氏病病毒(Marek's isease virus,MDV),且均为单独感染,未检测出禽戊型肝炎病毒(Avian hepatitis E virus,a HEV)、禽腺病毒(Fowl adenovirus,FAd V)和鸡传染性贫血病毒(Chicken infectious anemia virus,CIAV)。这5种病原的阳性率分别为10.0%(3/30)、3.3%(1/30)、3.3%(1/30)、3.3%(1/30)和3.3%(1/30)。病鸡品种占比为:罗曼粉蛋鸡占比40.0%(12/30)、罗曼灰蛋鸡占比26.7%(8/30)、罗曼褐蛋鸡占比13.3%(4/30)、黑鸡占比10.0%(3/30)、海兰灰占比6.7%(2/30)和大午金凤3.3%占比(1/30)。病鸡日龄占比为:小于40日龄3.3%(1/30);40日龄至60日龄6.7%(2/30);60日龄至80日龄13.3%(4/30);80日龄至100日龄13.3%(4/30);100日龄至120日龄20.0%(6/30);120日龄至140日龄16.7%(5/30);140日龄至160日龄16.7%(5/30);大于160日龄10.0%(3/30)。其中,罗曼灰蛋鸡集中在30-80日龄发病,罗曼褐蛋鸡集中在108-130日龄发病,罗曼粉蛋鸡集中在115-180日龄发病。2鸡肝破裂综合征的病理学分析收集30例病例的临床症状主要表现为精神沉郁、采食量下降、消瘦、腹泻、产蛋下降。大肠杆菌、沙门氏菌和葡萄球菌单独感染病例的临床剖检均表现为肝肿大,肝表面散在分布坏死灶和出血点/斑,严重者可见肝被膜下血肿。组织病理学主要表现为肝细胞变性坏死,肝门管区大量异嗜性粒细胞浸润,肝组织间隙淀粉样物质沉着;脾脏红白髓结构不清,淋巴细胞大量坏死、数量减少;肾脏有不同程度的淤血,肾小球肿胀,肾小管上皮细胞变性坏死。MDV单独感染病例的临床剖检病变主要表现为肝、脾肿大,肾表面有灰白色肿瘤结节。组织病理学主要表现为肝、脾、肾、肺组织内充满大小不一的多形态淋巴瘤细胞。ALV-J单独感染病例的临床剖检病变主要变现为肝脏显著肿大,脾脏轻度肿大。组织病理学主要表现为肝、脾、肾、肺组织内充满大量形态均一的髓细胞瘤。其他未检出病原的病例临床剖检变化主要表现为肝脏肿大,表面散在分布黄白色结节和出血斑,肝被膜下血肿,严重者肝破裂出血;脾脏轻度到高度肿大、苍白。肾黄染或呈暗红色。组织病理学主要表现为肝内弥漫性出血,肝细胞有不同程度的变性坏死,形成凝固性坏死灶和/或肉芽肿结节,肝组织间隙淀粉样物质沉着,肝门管区大量异嗜性粒细胞浸润;脾淤血明显,淋巴细胞大量坏死、数量减少;肾脏有不同程度的淤血、肾小球肿胀、肾小管上皮细胞变性坏死、肾间质炎性细胞浸润;部分病例可见肉芽肿性肌炎、心外膜炎、实质性心肌炎、间质性肺炎、出血性浆液性肺炎、化脓性肉芽肿性肺炎。综上所述,鸡肝破裂综合征在湖北地区广泛存在,且以罗曼蛋鸡发病为主。通过临床剖检、细菌分离鉴定、PCR/RT-PCR检测、组织病理学检查等方法证实了本研究所收集的鸡肝破裂综合征病例与a HEV、ALV、MDV、FAd V、CIAV、***、***、Salm、Staph和FLHS没有明显相关性。根据肝出血坏死、异嗜性粒细胞浸润和淀粉样变性病变可表明肝破裂的直接原因可能是由各种病因引起的急性坏死性肝炎和淀粉样变性。本研究结果为鸡肝破裂综合征的进一步研究提供了参考依据。

关键词： 阿尔茨海默病   外周免疫细胞   炎症   脑脊液   病理学  

摘要： 研究目的:阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)在当今社会已经成为最常见的痴呆症,也是本世纪全人类共同面对的关乎生命健康的挑战。炎症在AD的发生和发展中起着重要作用。外周免疫细胞是否参与β-淀粉样斑块和tau蛋白缠结等主要病理过程仍有争议。因此,我们的目的是研究外周血免疫细胞计数是否与认知完整的老年人AD病理的脑脊液生物标志物的早期变化相关。研究对象与方法:本研究前瞻性的纳入了738例来自于青岛大学附属青岛市立医院中国人阿尔茨海默病生物标记和生活方式研究(Chinese Alzheimer's Biomarker and Lifestyle study,CABLE)的认知正常老年人。采用脑脊液β-淀粉样蛋白(β-amyloid 42,Aβ42)、磷酸化tau蛋白(phosphorylated tau,p-tau)和总tau蛋白(total tau,t-tau)反映AD病理。脑脊液生物标志物阳性取人群1/3水平为界值,A+:Aβ42水平≤121.17 pg/m L,T+:p-tau水平≥39.02 pg/m L,N+:t-tau水平≥181.19 pg/m L。运用多因素协方差分析进行ATN生物标志物分组的差异分析。运用多元线性回归分析免疫细胞计数与AD病理标志物之间的相关性。通过多因素逻辑回归来检验免疫细胞计数与临床前AD事件的相关性。我们使用中介分析来检验AD病理是否中介外周免疫细胞与主观认知功能的关系。对于所有回归模型,我们使用方差膨胀因子(variance inflation factor,VIF)来探讨多重共线性。双侧p<0.05被认为有统计学意义。研究结果:Aβ的沉积与淋巴细胞和嗜酸性粒细胞有关。在ATN分组中,A+亚组(p=0.0093)和A+T+亚组(p=0.0022)的淋巴细胞百分率(lymphocyte percentage,LY%)明显低于A-和A-T-亚组。相比之下,A+T+亚组的嗜酸性粒细胞计数(eosinophil count,EO)和嗜酸性粒细胞百分率(eosinophil percentage,EO%)显著升高(EO,p=0.0045;EO%,p=0.0394)。此外,与A-亚组相比,A+亚组的EO显著增加(p=0.0294))。0期、1期和2期细胞计数比较显示LY%呈下降趋势(p=0.0122),EO和EO%呈上升趋势((EO,p=0.0118;EO%,p=0.0436)。LY%与脑脊液Aβ42(β=0.0990,p=0.0092)和脑脊液p-tau/Aβ42(β=-0.0805,p=0.0311)显著相关,与脑脊液Aβ42/40(β=-0.0805,p=0.0311)中度相关。EO与Aβ42(β=-0.0900,p=0.0186)、Aβ42/40(β=-0.0849,p=0.0253)呈负相关,与p-tau/Aβ42(β=0.0861,p=0.0223)、t-tau/Aβ42(β=0.0894,p=0.0164)呈正相关。EO%与p-tau/Aβ42(β=0.0766,p=0.0415)显著相关,与脑脊液Aβ42(β=-0.0718,p=0.0598)和t-tau/Aβ42(β=0.0691,p=0.0626)中度相关。随着嗜酸性粒细胞水平的升高和淋巴细胞水平的降低,临床前AD事件增加(LY%,OR=0.95;EO,OR=1.05)。用嗜酸性粒细胞与淋巴细胞的比值(eosinophil to lymphocyte ratio,ELR)来反应外周免疫细胞的整体作用,发现ELR与Aβ病理显著相关,并且ELR与主观认知功能障碍(Subjective cognitive decline,SCD)之间存在相关性(β=0.0377,p=0.0412)。中介分析表明,这种关联是由Aβ病理部分中介的。结论:总之,我们的研究表明,外周血淋巴细胞和嗜酸性粒细胞与Aβ病理和临床前AD的发生有关。Aβ病理部分中介了外周血免疫细胞与SCD的相关性。本研究结果提供了外周血免疫细胞在AD临床前期病理过程中发挥作用的证据。这项研究有助于我们了解AD的致病和调控途径,并制定治疗策略。

关键词： 绒山羊   巴氏杆菌病   病理学   革兰染色   巴氏杆菌  

摘要： 通过临床症状、尸体剖检、组织病理学和革兰氏染色法综合诊断1例隔离场进口绒山羊急性巴氏杆菌病。病死羊表现为尸体角弓反张,腹围膨大,可视黏膜发绀,有黏性分泌物。尸体剖检见全身淋巴结肿大,血液凝固不良;肺体积膨大呈红色,尖叶、心叶和膈叶前下缘呈局灶性暗红色;心脏横径增宽,心室壁变软,室间沟脂肪和心外膜散在暗红色出血点;脾肿大,切面隆起,呈黑红色。组织病理学表现浆液性出血性肺炎或浆液纤维素性肺炎、急性炎性脾肿、出血性淋巴结炎和出血性心外膜炎。腹水涂片经革兰染色可见单个散在或成簇的两极浓染的典型红染巴氏杆菌。综合表明,进口羊只在隔离场饲养期间发生了急性巴氏杆菌病,应加强进口羊只巴氏杆菌病的预防。

关键词： 胃癌   胃系膜   癌结节  

摘要： 胃癌的治疗很大程度上取决于肿瘤分期。癌结节(Tumor Deposits,TD)在分期中的作用还不明确。在本研究的目的是为了探究膜解剖指导下进展期胃癌胃系膜内转移的临床意义和预后影响,即膜解剖指导下进展期胃癌癌结节的临床意义和预后影响。 方法:本研究包括了494名在莆田市第一医院从2014年1月到2018年12月间接受膜解剖指导下腹腔镜R0胃切除和D2淋巴结清扫的患者。癌结节的定义为在胃周淋巴结引流区域内,与胃周脂肪组织相邻,独立存在的肿瘤结节,并且无可识别的神经、血管、淋巴结或淋巴管的结构。根据是否存在癌结节,将其分为两组。比较两组的临床病理学特征,分析两组间的统计学差异,Cox比例风险回归模型确定了独立的预后因素,并分析癌结节阳性和阴性在无病生存期(disease-freesurvival,DFS)和总生存期(overall survival,OS)方面的关系。使用Logistic回归用于识别癌结节及腹膜复发的独立风险因素。 结果:在494名的患者中有81例(16.4%)的患者从脂肪结缔组织中检测到癌结节。在肿瘤较大(直径5 cm或更大)、位置、浸润深度较深、组织学未分化型、Lauren分型、淋巴结转移较多、腹膜转移、神经侵犯或血管受累的患者中,癌结节的发生率显着较高。癌结节阳性患者在治愈性手术后的DFS、OS明显低于癌结节阴性的患者(p<0.001)。多变量分析确定浸润深度(p T)和淋巴结状态(p N)、腹膜复发是独立的危险因素,但未将癌结节为视为总生存期独立的危险因素。伴有浆膜或者邻近器官浸润(p T4a和p T4b)和16个以上转移性淋巴结(p N3b)的肿瘤与癌结节的存在显著相关。与未发生腹膜复发患者相比,腹膜复发患者的癌结节发生率更高。肿瘤浸润深度、淋巴结转移、肿瘤大小和癌结节是腹膜转移的独立危险因素。 结论:我们的研究表明,癌结节与胃癌的预后密切相关。癌结节的存在表明胃癌的侵袭性特征,例如神经浸润、脉管浸润、Lauren分型、浸润深度、淋巴结转移、更大的肿瘤直径和分化类型。这些结果表明,在D2切除术中脂肪结缔组织中的整体清除至关重要。癌结节应在TMN分期中应占据更重要的地位,这可以准确地提高分期可靠性和预后评估。应密切随访患有癌结节的胃癌患者,并采取辅助化疗或放疗进行进一步的治疗。

关键词： 病理学   教学改革   类比教学法   高职  

摘要： 病理学是一门重要的医学基础学科，概念抽象、专业术语多且难以区分理解，在教学中恰当应用类比教学法不仅可以使抽象的概念生活化、复杂的问题简单化，也可帮助学生理解记忆，增添学习的乐趣。