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关键词： 胃癌   EB病毒   流行病学   临床病理学   NDRG1基因   细胞增殖   细胞迁移  

摘要： EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)是第一个被报道的人类肿瘤病毒，于1964年从伯基特淋巴瘤细胞系中分离出来，并被发现与多种人类淋巴和上皮恶性肿瘤有关，如霍奇金淋巴瘤、鼻咽癌(NPC)和胃癌(GC)等。EBV相关胃癌(EBVaGC)是一种EBV潜伏感染胃上皮肿瘤细胞的单克隆增殖，是胃癌的一种独特亚型。EBVaGC的病毒基因表达模式是介于Ⅰ型和Ⅱ型潜伏期之间，表达EBV-encoded small RNAs(EBERs)、EBV核抗原1(EBNA1）和BART microRNAs,大约50％ 的EBVaGC表达潜伏膜蛋白2A(LMP2A)。中国南方的潮汕地区是NPC和GC的高发区之一，而NPC与EBV密切相关，因此，探究EBVaGC在中国南方NPC流行地区的发病率和临床病理特征具有重要意义。首先，我们利用EBV原位杂交(EBER-ISH)的方法对潮汕地区510份石蜡包埋的胃癌组织样本进行了检测。我们发现，共有50例为EBER阳性，其中以EBER阳性的肿瘤细胞为特征的EBVaGC仅有10例，占总病例数的2％,远低于世界平均水平(约10％)。通过新建立的EBER-ISH联合多标记免疫荧光检测方法，我们进一步发现，10例EBVaGC中几乎所有EBER阳性细胞均为细胞角蛋白(上皮细胞标记物)阳性，但也有极少部分EBER阳性细胞为CD8或CD20(淋巴细胞标记物)阳性。另外，我们还鉴定出40例以EBV阳性的肿瘤浸润淋巴细胞(EBV+TILs)为特征的EBV阴性胃癌(EBVnGC),占总病例数的7.8％(40/510),EBV+TILs均为CD8或CD20阳性。通过分析EBVaGC和EBVnGC的临床病理学特征，我们发现，与EBVnGC相比，EBVaGC以弥漫性胃癌为主，主要分布于胃体区，差异有统计学意义(P＜0.05)。与EBV-TILs EBVnGC相比，EBV+TILs EBVnGC主要分布在贲门区(P＜0.05)。进一步对年龄、性别、临床分期、淋巴结转移和糖尿病状况等方面进行比较分析，发现EBVaGC与EBVnGC之间无显著差异，EBVnGC中有无EBV+TILs之间也无显著差异。　　肿瘤微环境中免疫细胞的浸润程度是肿瘤预后的一个重要指标，研究免疫细胞在肿瘤微环境中的分布和数量将有助于胃癌的精准治疗。那么，胃癌组织中浸润的EBV+淋巴细胞是否与肿瘤微环境和病人转归相关呢？为此，我们分析了 EBVaGC、EBV+TILs EBVnGC 和 EBV-TILs EBVnGC 组织中 CD4+T 细胞、CD8+T 细胞、CD20+B 细胞和CD68+巨噬细胞的分布情况。结果显示，EBVaGC中CD4+T细胞、CD8+T细胞和CD20+B 细胞均显著高于 EBV+TILs EBVnGC(P＜0.001),但是，EBVaGC 中 CD68+巨噬细胞显著低于EBV+TILs EBVnGC（P＜0.001）。同时我们也分析了 EBV+TILs对EBVnGC肿瘤免疫微环境的影响，发现EBV+TILs的CD4+T细胞、CD20+B细胞和CD68+巨噬细胞的数量显著高于EBV-TILs EBVnGC。胃癌病人总生存率结果显示，与EBVnGC相比，EBVaGC呈现出总体生存时间更长的趋势。在EBVnGC组中，有无EBV阳性的肿瘤浸润的淋巴细胞对总生存率无显著影响。　　卡波济氏肉瘤相关疱疹病毒（Kaposi''s sarcoma-associated herpesvirus,KSHV）也属于γ疱疹病毒属。在卡波济氏肉瘤中，部分感染该病毒的细胞会发生裂解性复制并产生病毒，从而促进卡波济氏肉瘤的进展。那么，EBVaGC组织中是否也存在上皮细胞的裂解性感染呢？前期有研究报道，通过对临床EBVaGC样本进行RNA-seq测序，发现了大量EBV裂解期基因转录本的表达。然而，我们对10例EBVaGC进行IHC染色,检测EBV裂解期蛋白（EA-D和GP350）,没有得到令人信服的结果，于是想在EBV阳性的胃癌细胞中进行检测。目前，只有少数细胞模型可用于研究EBV在胃癌中的作用。比如，有研究者用嗜淋巴细胞的EBV Akata病毒株感染胃癌细胞系AGS和MKN7建立EBV阳性胃癌细胞系。在本研究中，我们分析了从中国香港鼻咽癌患者中分离的EBVM81株构建的两个EBV阳性胃癌细胞系（AGS-EBV和HGC27-EBV）中病毒基因的表达，并比较了其与AGS-Akata和直接来源于病人的EBV阳性胃癌株SNU719中病毒基因表达的差异。结果显示，与SNU719 一样，AGS-EBV和HGC27-EBV均能稳定维持其EBV基因组，表达EBERs 和 EBNA1。RNA-seq、RT-qPCR、Western-Blot、IHC 和 IFA 等结果显示，相比于HGC2

关键词： 肺结节   手术   胸部CT特征   预测模型   病理学  

摘要： 目的:1.探讨已切除肺结节胸部CT特征和良、恶性肺结节的相关性;2.构建列线图模型以预测恶性肺结节的患病风险。方法:本研究为回顾性研究,纳入2019年1月至2022年6月就诊于山西省人民医院胸外科并考虑肺结节恶性可能的患者,共纳入130例接受了肺结节切除术的肺结节患者,最终纳入80例肺结节患者。收集研究对象术前CT图像、术后病理诊断以及临床危险因素(年龄、性别、高血压、糖尿病和吸烟)。使用二元logistic回归分析肺结节良、恶性肺结节的独立风险因素。通过构建列线图模型来探讨已切除肺结节胸部CT特征和良、恶性肺结节的相关性,并预测恶性肺结节的发病风险。绘制ROC曲线和Calibration校准曲线以评价logistic回归模型的区分度和校准度。且采用随机森林来探讨恶性肺结节的危险因素。结果:1.在纳入的80例肺结节患者中,恶性结节为50例(62.5%),良性结节为30例(37.5%)。在良性结节组中,男女例数分别为9例、21例,平均年龄为57.97±7.45岁;而在恶性结节组中,男女例数分别为32例、18例,平均年龄为62.14±9.79岁,两组患者的性别构成比、年龄差异具有统计学意义(P<0.05)。两组患者良性肺结节和恶性结节的密度、大小差异具有统计学意义(P<0.05)。两组患者的高血压病、糖尿病、吸烟构成比差异具有统计学意义(P<0.05)。***回归分析显示,当大小、高血压、糖尿病不变时,密度每增加一个单位,恶性肺结节的患病风险增至0.99倍(P<0.05;OR:0.99;95%C I0.99～1.00)。当密度、高血压、糖尿病不变时,大小每增加一个单位,恶性肺结节的患病风险增至28.86倍(P<0.05;OR:28.86;95%CI 2.46～1570.60)。当密度、大小、高血压不变时,糖尿病患者的患病风险是非糖尿病患者患病风险的15.94倍(P<0.05;OR:15.94;95%CI 2.89～170.41)。当密度、大小、糖尿病不变时,高血压患者的患病风险是非高血压患者患病风险的18.26倍(P<0.05;OR:18.26;95%CI2.97～209.28)。表明这些因素是恶性肺结节的独立危险因素。3.以logistic回归模型诊断准确率绘制ROC曲线,AUC判定logistic回归拟合效果。结果显示,密度ROC曲线的AUC为0.705,大小ROC曲线的AUC为0.755,高血压ROC曲线的AUC为0.737,糖尿病ROC曲线的AUC为0.710。对于密度、大小、高血压、糖尿病因素,提示该预测模型的区分能力较好且模型拟合效果较好,表明该模型诊断良恶性肺结节具有较好的性能。4.将恶性肺结节相关的独立因素纳入列线图模型,预测恶性肺结节相关因素。列线图的应用如下:根据列线图,得出个体每个预测指标对应的分数(Points),得出各分数和的总分(Total Points)后,与总分相对应的预测概率为患者恶性肺结节的风险。我们采用校准曲线来评价模型的校准度,采用Bootstrap方法对数据集进行验证,设置重抽样次数为1000次,平均绝对误差0.053,表明列线图模型较好。5.随机森林模型性能较好,准确率、灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、Kappa、AUC分别多达0.917、1.000、0.778、0.882、1.000、0.814、0.941。肺结节大小、密度是诊断肺结节良恶性的重要预测因子(随机森林模型变量重要性排序分别位居第1、2),随机森林具有处理高维度的数据,并且不用做特征选择的优势;引入随机性,模型不容易过度拟合,准确度高有关。借助随机森林的机器学习算法,本研究发现肺结节大小、密度是诊断肺结节良恶性最重要的危险因素。结论:1.本研究发现密度、大小、高血压、糖尿病是恶性肺结节的危险因素,其中肺结节大小、密度是诊断肺结节良恶性最重要的危险因素。2.本文构建的恶性肺结节列线图模型有较好效能,简单易懂,值得在临床推广。3.随机森林具有较好的良、恶性肺结节识别性能,可成为辅助诊断良、恶性肺结节的一种辅助方法。

摘要： 摘要 目的 比较3D T1快速回波与压缩感知（CS-3D-T1TFE）和多层螺旋CT（MDCT）影像对下颌骨癌勾画的准确性，并将这2组影像与作为金标准的组织病理学结果进行比

关键词： 小鼠动式染尘模型   肺纤维化   富集分析   信号通路   单细胞RNA测序  

摘要： 尘肺病是一种在全球范围内较为常见的职业病,在发展中国家呈现较高发病率。患者由于在职业活动中长期吸入以SiO2为主的矿业性粉尘并在肺内长期潴留从而引起肺组织弥散性纤维化。尘肺病发病机制复杂,涉及免疫和创口修复等多种复杂反应,为明确其发病机制,本文采用PM2.5自然吸入式暴露系统构建小鼠动式染尘模型,通过组织形态学观察和生理生化指标检测等方法确保模型构建成功,富集分析筛选纤维化进程中发挥重要作用的差异表达基因和代谢通路,同时采用单细胞测序技术对组织纤维化样本进行测序和分析,探究肺纤维化进程中细胞异质性和细胞互作等问题,本文的实验研究结果如下: 1.采用PM 2.5自然吸入式暴露系统构建小鼠动式染尘的肺纤维化模型。小鼠正常饲养一周后随机分成空白对照组和二氧化硅（SiO2）染尘7 d、14 d、28 d和56 d组,每组6只。空白对照组小鼠安静饲养不做处理,染尘组小鼠进行二氧化硅（SiO2）胁迫至相应时间段处死,进行组织形态学观察和生理生化指标检测,结果表明:口鼻吸入二氧化硅（SiO2）粉尘颗粒会导致肺组织形态发生变化,出血现象明显,随染尘时间增加肺组织逐渐出现硬块和瘢痕现象。HE染色结果显示随染尘时间的增加肺部均匀有序的肺泡结构出现炎症细胞募集浸润并且逐渐过度为上皮细胞结构塌陷、肺泡组织间隔增宽现象,最后出现有肺纤维化结节等现象。Masson染色观察肺部蓝染面积逐渐增加。小鼠肺组织上清液三种炎症因子IL-6、TNF-α、TGF-β含量与空白对照组相比均显著升高（p<0.01）,炎症因子的变化趋势随染尘时间的增加而升高。三种氧化应激因子检测结果显示:与空白对照组相比,随染尘时间增加小鼠血清中MDA、ROS含量呈上升趋势;SOD含量呈下降趋势,氧化应激因子的变化趋势随染尘时间的增加升高或下降。与空白对照组相比,二氧化硅染尘组小鼠肺组织中的Collagen1α2、Fbn1、α-SMA基因的表达水平在7 d无显著变化,在14 d（Collagen1α2,p<0.05）、28 d和56 d时表达显著上调（p<0.01）。 *** pathway功能富集分析及关键基因的实验验证。分离各组小鼠肺组织进行转录组测序并对测序结果进行生物信息学分析,重点关注KEGG富集分析结果,选取p-adjust<0.05为筛选条件,富集到多条通路:细胞因子与细胞因子受体互作通路（Cytokine-cytokine receptor interaction pathway）,趋化因子信号通路（Chemokine signaling pathway）,TNF信号通路（TNF signaling pathway）,NF-κB信号通路（NF-kappa B signaling pathway）,吞噬因子（Phagosome）,ECM受体互作（ECM-receptor interaction）,MAPK信号通路（MAPK signaling pathway）,筛选到Spp1、IL-33、CCL17、CCL2、CCL9、CCL6、CCL8、Tnfrsf4、Tnfrsf9、CXCL10、TNF、CCL12、CXCL5、Socs3、Fos、CXCL1、CSF2、CXCL2、CXCL3、Sftpa1、Sftpd、C3、Marco、Ctss、Cd14、Fcgr3、Clec7a、CCL4、CCL19、CCL3、CCL22、CXCL9、CCr1、CCr5、CCL7、CXCL13、Nr4a1、Igf1、Ifitm1、Thbs1、IL-1β、Dusp1 42个关键基因进行验证,其中Nr4a1、Dusp1、Fos、IL-1β、Thbs1基因表达均下调显著（p<0.01）,其余基因均上调显著（p<0.01）,实验结果均与测序结果相一致。采用qRT-PCR法和Western Blot蛋白印迹法验证IL-33-ST2-amphiregulin-EGFR-OPN信号轴标志基因、TGF-β信号通路Smad3、P-Smad3等重要标志物蛋白与Spp1蛋白的变化和联系。同时通过文献调研,绘制肺纤维化进程中细胞通讯网络互作图。 3.单细胞转录组测序及分析。设置72 d、100d、128 d三个不同时间处理点用以比较选择,检测生理生化指标:HE染色显示粉尘胁迫128 d时视野出现明显且广泛纤维化效应,Masson染色观察128 d蓝染区域面积最大,同时羟脯氨酸含量最高,胶原物质生成量最多。四种炎症因子（IL-6、TGF-β、TNF-α、FGF）含量随染尘时间的延长而显著升高（p<0.01）。选取染尘128 d小鼠肺组织送测,对测序结果进行数据质控,筛选得到50476个细胞,聚类29个细胞类群和对应的Marker基因,注释了13类细胞类型、统计各细胞类型基因数以及上下调情况,绘制不同细胞类型受配体通讯热图和

关键词： 食管鳞状细胞癌   新辅助治疗   病理特征   预测标志物   治疗反应  

摘要： 目的:目前进展期食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)的治疗以新辅助治疗加手术治疗为主,包括新辅助同步放化疗(Neoadjuvant chemoradiotherapy,NCRT)、新辅助化疗(Neoadjuvant chemotherapy,NCT)及新辅助化疗联合免疫治疗(Neoadjuvant chemotherapy combined with immunotherapy,NCIT)等方案。虽然新辅助治疗改善了许多ESCC患者的预后,但仍有部分患者未能从中获益。因此筛选可预测新辅助治疗疗效的标志物有助于为患者提供个体化的治疗方案。新辅助治疗后术后病理治疗反应评价直接反映了新辅助治疗方案的治疗效果,可作为临床试验的替代终点。本研究探讨ESCC新辅助治疗前活检病理形态特征、PD-L1蛋白表达、血常规指标与病理治疗反应评价的相关性,筛选精准预测食管癌新辅助治疗疗效的标志物,为食管癌患者的精准治疗提供依据。方法:回顾性收集2011年2月-2021年12月在本院进行NCT、NCRT或NCIT治疗后行食管切除术且有本院治疗前内镜活检病理的ESCC病例共312例。查阅及收集患者临床资料,包括性别、年龄、血常规指标、治疗方案、治疗及手术时间及预后随访,收集病理切片并复阅判读,包括活检病理特征[分化程度、间质占比、间质成熟度(tumor stromal maturity,TSM)、肿瘤浸润淋巴细胞(tumor infiltrating lymphocytes,TILs)、中性粒细胞(neutrophil,NEUT)、嗜酸性粒细胞(eosinophil,EOS)]、术后病理特征[肿瘤治疗反应/肿瘤退缩分级(tumor regression grade,TRG)],对各种治疗方案的治疗前活检病理特征与术后病理治疗反应分别进行相关性分析。对其中69例治疗前活检标本进行PD-L1免疫组化染色。在不同判读方法及截断值下对程序性细胞死亡蛋白1(programmed cell death ligand 1,PD-L1)表达结果进行分组,分析PD-L1表达结果与术后病理治疗反应的相关性。对不同治疗方案的血常规指标分别进行ROC曲线分析,评价血常规指标预测术后病理治疗反应的效能。结果:312例接受新辅助治疗及手术治疗的ESCC患者中,女性的pCR率(44.2%)显著高于男性pCR率(25.7%)(P=0.012)。其中活检病理为低分化鳞癌的病例的mPR率(66.2%)及治疗反应好(Mandard TRG分级1-3)占比(84.5%)均高于高、中分化鳞癌的病例(mPR率49.4%,治疗反应好69.7%,P值均为0.013)。其他治疗前活检病理特征(间质占比、TSM、TILs、NEUT、EOS)与治疗反应均无显著相关性。NCIT组中,PD-L1 TPS≥1%患者的pCR率显著高于TPS<1%患者(P=0.013),CPS≥1患者对治疗反应好(Mandard TRG分级1-3)率显著高于CPS<患者(P=0.013)。在NCT组中未发现PD-L1表达与治疗反应存在相关性。对291例有治疗前及术前血常规的病例进行ROC曲线分析,发现治疗前及治疗后术前白细胞(white blood cell,WBC)、NEUT、淋巴细胞(lymphocyte,LYMPH)、单核细胞(monocyte,MONO)、中性粒细胞淋巴细胞百分比(neutrophil-to-lymphocyte ratio,NLR)、血小板淋巴细胞百分比(platelet-to-lymphocyte ratio,PLR)、淋巴细胞单核细胞百分比(lymphocyte-to-monocyte ratio,LMR)、系统免疫炎症指数(systemic immune-inflammation index,SII,血小板乘以NLR)具有一定的预测治疗效果的价值,其中治疗后术前PLR可作为较好的预测 pCR 的指标[AUC=0.720,95%置信区间(confidence interval,CI)0.607-0.833,P=0.002,敏感度0.714,特异性0.679],其余指标预测能力较低。结论:1、ESCC新辅助治疗后女性的pCR率显著高于男性,2、ESCC新辅助治疗前活检病理为低分化者治疗反应优于高、中分化者。3、ESCC中新辅助化疗联合免疫治疗后PD-L1 TPS≥1%与pCR相关,CPS≥1与治疗反应好(TRG 1-3级)相关。4、新辅助化疗治疗后术前PLR可作为较好的预测pCR的指标。

关键词： 甲状腺乳头状癌   BRAFV600E   端粒酶逆转录酶   受体酪氨酸激酶  

摘要： 甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)是最常见的甲状腺恶性肿瘤,占所有甲状腺癌的85%-90%。BRAF点突变(c.1799 T>A,p.V600E)是PTC中最为常见的基因变异。既往研究发现BRAF 与PTC的高侵袭性的生物学行为相关,是PTC的独立预后因素,可以作为I治疗分层系统的参考指标。但是近年来也有文献报道,BRAF突变与PTC的组织学亚型有关,与某些侵袭性的临床病理特征并不相关,不能作为独立预后因子。除BRAF外,PTC中也存在其他一些重要的基因变异,如RAS突变、RET、NTRK、ALK重排、TERT启动子突变等,这些变异基因同PTC的组织学分型以及预后存在一定相关性。迄今为止,有关BRAF野生型PTC的研究报道较少,对于这一部分病例的临床病理特征以及基因变异特点缺乏足够的认识。本研究以BRAF野生型PTC为研究对象,对其临床病理特征展开回顾性研究;通过Sanger测序检测RAS以及TERT启动子突变状态,通过荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization,FISH)检测RET和ALK重排,通过免疫组化检测pan-TRK、ALK、PD-L1以及错配修复蛋白的表达,通过二代测序(next generation sequencing,NGS)对部分病例中的变异基因进行检测,对NGS发现的变异基因采用Sanger测序扩大样本量进行检测。同时,本研究将分析具有某些基因变异的PTC的病理学特点,期望为今后相关PTC的诊断和治疗提供参考。第一部分BRAF野生型甲状腺乳头状癌的临床病理学特征目的分析BRAF野生型PTC的临床病理学特征以及预后特点。方法收集2016年11月至2021年11月期间青岛大学附属医院手术切除的1564例PTC病例(为保证能切取足够的组织,仅选取最大径≥1 cm者),免疫组化染色判定BRAF状态(阴性者判定为野生型,阳性者为突变型);分析BRAF野生型PTC的临床病理特点,包括性别、年龄、病灶数目、淋巴结转移、伴发病变以及组织学分型,采用卡方检验分析BRAF野生型和突变型PTC的临床病理特征差异。结果1564例PTC病例中,1261例为BRAF突变型(80.6%),303例为BRAF野生型PTC病例(19.4%)。在303例BRAF野生型PTC病例中,男性67例,女性236例(男女比例1:3.5),年龄11～70岁(平均年龄42岁,中位年龄?与后面一致),病灶大小1～7.5cm(平均大小1.8 cm),198例有被膜侵犯(或发生于被膜下)(65.3%),207例有区域淋巴结转移(68.3%),120例伴有桥本氏甲状腺炎(39.6%),80例为多发病灶(26.4%)。在1261例BRAF突变型PTC病例中,男性298例,女性963例(男女比例1:3.2),年龄17～77岁(平均年龄44岁,中位数年龄为43岁),病灶大小1～8 cm(平均1.6 cm),900例有被膜侵犯或位于被膜下(71.4%),717例有区域淋巴结转移(56.9%),221例伴有桥本氏甲状腺炎(17.5%),411例病灶多发(32.6%)。同BRAF突变型PTC相比,BRAF野生型PTC更常伴发桥本氏甲状腺炎,区域淋巴结转移率更高。结论本研究是目前国内以BRAF野生型PTC为研究对象的样本量最大的病例对照研究之一。BRAF野生型PTC同样具有较强的侵袭转移能力,一部分病例可能与桥本氏甲状腺炎密切相关;BRAF基因状态不能作为评价PTC侵袭转移的唯一指标。第二部分BRAF野生型甲状腺乳头状癌中变异基因的检测目的研究BRAF野生型PTC中存在的变异基因。方法选取118例BRAF野生型PTC病例同时进行免疫组化及ARMS-PCR检测为无BRAF突变的PTC病例进行详细分析。其中99例采用Sanger测序检测KRAS、NRAS、HRAS的2号外显子的12/13密码子以及3号外显子的61密码子、检测TERT启动子突变(c.-146 C>T和c.-124 C>T);采用FISH检测RET和ALK基因易位;采用免疫组化检测ALK(D5F3)、pan-TRK、PD-L1(22C3)、MLH1、PMS2、MSH2、MSH6等指标。对于某些特殊组织学类型,免疫组化pan-TRK和ALK阳性,或者提取的基因组DNA质量较好的PTC病例,进一步进行NGS检测(其中15例采用诺禾致源的ALL-IN-ONE cancer gene panel,9例采用北京元码的甲状腺癌18基因panel),对检测到的点突变再次采用Sanger测序在其他病例中进行检测。结果本组118例PTC中,经典型74例、浸润性滤泡型37例、弥漫硬化型4例,其他特殊类型3例;某些形态学特点提示可能为BRAF野生型PTC

关键词： 糖尿病   胰腺功能   β细胞   Roux-en-Y胃旁路术  

摘要： 目的：　　通过Roux-en-Y胃旁路术（Roux-en-Ygastricbypass，RYGB）后GK大鼠胰腺病理学及胰腺功能的变化，来探讨RYGB治疗糖尿病的可能机制，为临床上通过RYGB治疗糖尿病提供理论依据。　　材料和方法：　　24只雄性GK大鼠随机分为手术组（RYGB组，n=8）、假手术组（S-RYGB组，n=8）、空白对照组（C组，n=8）。比较GK大鼠术前（0周）及术后第8周的空腹血糖（FPG）、空腹胰岛素（FINS)、空腹C肽（FC）水平，并计算胰岛β细胞功能指数（HOMA-β)、胰岛素抵抗指数（HOMA-IR);术后取大鼠胰腺组织行HE染色，观察胰腺形态学变化;胰岛β细胞免疫组化染色分析，评估β细胞数量变化情况。　　结果：　　术前三组GK大鼠空腹血糖、空腹胰岛素、空腹C肽、胰岛素抵抗指数HOMA-IR、胰岛β细胞功能指数HOMA-β无差异（p＞0.05）。术后S-RYGB组和C组各项指标无明显差异（p＞0.05）。RYGB组大鼠术后8周空腹血糖（8.16±0.27，　　mmol/L）、空腹胰岛素（7.68±0.53，mU/L）、空腹C肽（0.80±0.04，ng/ml）、HOMA-IR（2.78±0.19）;与同时间S-RYGB组（17.21±0.17，17.04±0.88，1.87±0.13，13.06±0.76）和C组（16.76±0.21，16.72±0.58，1.92±0.12，13.06±0.76）相比显著降低，差异具有统计学有意义(p＜0.05)。术后RYGB组大鼠HOMA-β（34.63±2.45）较S-RYGB组（24.81±1.13）、C组（25.33±1.25）明显升高，差异具有统计学意义（p＜0.05）。术后8周RYGB组胰岛形态饱满，排列紧密，呈现增生性改变;免疫组化染色RYGB组胰岛阳性染色呈棕褐色团块，并且分布广泛，区域面积较大，而S-RYCB组和C组胰岛素阳性染色散在分布，面积较小。RYGB组术后胰岛β细胞的阳性表达水平（0.0167±0.0028）明显高于S-RYGB组（0.0006±0.0001）和C组（0.0007±0.0001）,差异具有统计学意义（p＜0.05）。　　结论：　　***术后GK大鼠空腹血糖、空腹胰岛素、空腹C肽降低，胰岛素抵抗得到改善，胰岛β细胞功能增强，证明该术对2型糖尿病的疗效确切。　　***术后GK大鼠胰腺组织增生，β细胞数量增加，这可能是RYGB术治疗糖尿病的机制之一。

关键词： 证候病机   方证病理学   肝硬化   下瘀血汤   肝星状细胞凋亡   肝窦毛细血管化   胶原纤维降解  

摘要： 基于肝炎后肝硬化气虚血瘀的核心病机，本课题组提出并论证了“血瘀为积之标，虚损为积之本”的肝硬化中医病机理论。采用不同功效中医古典方剂干预治疗肝硬化多种模型的研究表明，祛瘀的下瘀血汤干预肝硬化的作用特征是针对纤维结缔组织异常沉积、肝窦毛细血管化和肝血管异常新生。其作用机制包括下调金属蛋白酶组织抑制物表达，提高金属蛋白酶活性，促进病理性异常沉积胶原的降解，抑制肝星状细胞活化并诱导其凋亡，改善肝窦毛细血管化和抑制血管增生等，是下瘀血汤“治标”的作用特征。本文从“病-方（效）-证”相关的实验结果，解析了肝硬化血瘀病机的关键病理学基础主要为肝脏纤维结缔组织异常沉积和活化的星状细胞增殖，还包括胶原降解活性低下、肝窦内皮细胞开窗缺失、内皮下基底膜形成以及毛细血管化增加。以上为明确祛瘀方剂（如下瘀血汤）治疗现代疾病所针对的适应证（病理指征）提供了参考依据，并有助于促进临床转化应用。

关键词： 宫颈癌   TOLL样受体4   缺氧诱导因子-1α   炎症指标   放化疗敏感性   放化疗疗效  

摘要： 目的:探讨宫颈癌组织和外周血TLR4、HIF-1α表达水平与宫颈癌临床病理学因素及放化疗疗效间的相关性,以及宫颈癌外周血TLR4、HIF-1α及炎症指标动态变化与放化疗疗效间的相关性,从而为宫颈癌的放化疗疗效预测提供依据。方法:1.收集2019年1月-2023年1月间兰州大学第二医院经病理证实并行同步放化疗(CCRT)的局部中晚期宫颈癌患者的临床资料,其中获取治疗前病理学组织标本62例、外周血标本27例,采用免疫组织化学染色法(IHC)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测TLR4、HIF-1α表达水平,分析其与临床病理学因素及放化疗疗效间的相关性。2.收集CCRT前、中、后外周血标本,观察CCRT期间TLR4、HIF-1α及炎症指标(IL-6、IL-8,LMR、NAR、SIRI等)水平的动态(CCRT前-<1周;CCRT中期-第3周末;CCRT后-<1周)变化,进而分析其与宫颈癌放化疗敏感性间的相关性。结果:***前宫颈癌组织中TLR4、HIF-1α表达与局部晚期宫颈癌的FIGO分期显著相关(P<0.05),而宫颈癌组织TLR4和HIF-1α表达分别与年龄(P<0.05)和T分期(P<0.05)显著相关;CCRT前宫颈癌患者外周血TLR4、HIF-1α表达水平与FIGO分期和T分期显著相关(P<0.05),而宫颈癌组织、外周血TLR4、HIF-1α表达与宫颈癌淋巴转移、组织学类型及复发/转移间无相关性(P>0.05)。2.宫颈癌组织和外周血TLR4与HIF-1α表达水平均呈显著正相关(r=0.557,P<0.001;r=0.870,P<0.001),且外周血TLR4与鳞状上皮细胞癌抗原(SCC)间存在相关性(r=0.595,P=0.007)。***单因素分析提示FIGO分期、T分期、HIF-1α及SCC是影响宫颈癌CCRT疗效的关键因素,而多因素分析显示FIGO分期、HIF-1α是影响CCRT疗效的关键因素(P<0.05);完全缓解(CR)和部分缓解(PR)组间TLR4表达无显著性差异(P>0.05)。4.与CCRT前相比,CCRT中期外周血TLR4、HIF-1α及NLR、PLR、SII、FAR、SIRI水平显著升高(P<0.05),而APAR、LMR、NWR、NAR及PAR水平显著降低(P<0.05);CCRT后外周血NLR、PLR、SII及SIRI水平显著升高(P<0.05),而LMR、NWR、NAR及PAR显著降低(P<0.05)。5.基于CCRT后CR组与PR组间差异性外周血指标的ROC曲线,CCRT前HIF-1α、LMR、SIRI和NAR能够预测宫颈癌放化疗疗效,且HIF-1α<0.338ng/ml、LMR≥5.302、SIRI≤0.8及NAR≤0.093具有最佳的疗效预测效能;CCRT中期LMR下降至CCRT前的0.427倍以下、HIF-1α升高不超过CCRT前的2.38倍的患者放化疗更敏感;CCRT后LMR下降至CCRT前的0.489倍以下的患者放化疗疗效更好。结论:1.宫颈癌同步放化疗前肿瘤组织和外周血TLR4、HIF-1α表达与局部晚期宫颈癌的FIGO分期显著相关,且TLR4与HIF-1α表达呈正相关。2.宫颈癌同步放化疗前外周血HIF-1α、LMR、SIRI及NAR水平能够预测放化疗疗效。3.宫颈癌同步放化疗期间外周血LMR、HIF-1α的动态变化可以预测宫颈癌放化疗疗效。

关键词： 肺磨玻璃结节   肺癌   CT影像   腺体前驱病变   鉴别诊断  

摘要： 背景与目的　　肺癌仍是全球癌症相关死亡最主要的原因。随着低剂量计算机断层扫描(low-dosecomputedtomography,LDCT)筛查的开展和薄层高分辨电子计算机断层扫描(high-resolutioncomputedtomography,HRCT)的广泛应用，越来越多表现为肺结节的早期肺癌在体检中被发现。研究表明，腺体前驱病变CT影像主要表现为纯磨玻璃结节(pureground-glassnodule,pGGN),微浸润腺癌和浸润性腺癌表现为混合磨玻璃结节(mixedground-glassnodule,mGGN)或pGGN,且不同病理类型的肺结节10年生存率也各不相同，因此，准确鉴别磨玻璃结节病理学特征对判断患者预后具有重要意义。传统临床医师仅凭自己的诊断经验进行肺结节的诊断，鉴别过程困难重重。随着计算机人工智能辅助诊断软件的发展，计算机能精确提取肺结节的影像特征，为临床医师提供了更为准确的辅助诊断，对肺结节鉴别及随访策略提供了可靠依据。本研究拟借助计算机辅助诊断软件通过分析不同病理类型磨玻璃结节的影像参数，探究其与早期肺癌病理学特征的相关性，为磨玻璃结节的鉴别及临床干预时机提供依据。　　资料与方法　　收集并筛选2017年12月至2022年10月河南省人民医院收治的磨玻璃结节患者的资料，包括两次CT数据，性别、年龄、吸烟史、结节性质、随访间隔时间、结节所在肺叶位置、结节长径、短径、CT值、肿瘤增殖抗原(Ki-67)表达水平值，进一步计算肺结节的肿瘤实性成分占比(ConsolidationTumorRatio,CTR)、体积倍增时间(volumedoublingtime,VDT)、平均径与ΔCT值，按照病理类型分组，探究不同组别之间上述参数的差异是否有统计学意义;以肺结节Ki-67表达阳性或阴性为分组，比较影像参数在两组间的差异，并进一步探究影像参数与Ki-67表达水平的相关性。　　结果　　最终共纳入183个结节，其中男性78例(42.62％),女性105例(57.38％),平均年龄54.43±12.46岁。共有吸烟患者38例(20.77％),不吸烟患者145例(79.23％)。根据组织病理结果对结节进行分类，包括腺体前驱病变37例(20.22％)(其中不典型腺瘤样增生(Atypicaladenomatoushyperplasia,AAH)11例，占6.01％;原位腺癌(adenocarcinomasinsitu,AIS)有26例，占14.21％),微浸润腺癌(minimallyinvasiveadenocarcinoma,MIA)有63例(34.43％),浸润性腺癌(invasiveadenocarcinoma,IAC)有83例(45.36％)。根据位置对结节进行分类，其中62例(33.88％)位于右肺上叶，17例(9.29％)位于右肺中叶，25例(13.66％)位于右肺下叶，43例(23.50％)位于左肺上叶，26例(14.21％)位于左肺下叶;依据结节性质分类，有117例pGGN(63.93％),66例mGGN(36.07％)。　　根据组织病理结果对结节进行分类，包括腺体前驱病样变37例，MIA63例，IAC83例。依据病理将所有肺结节分为腺体前驱病变组、微浸润腺癌组及浸润性腺癌组，三组间在性别、吸烟史、随访时间上无明显统计学差异(P均＞0.05);三组患者的VDT、CTR、结节长径、结节短径、结节平均径、结节CT值、ΔCT值、年龄上仍存在差异，差异均有统计学意义(P均＜0.05)。　　以IAC为因变量，将上述组间有统计学差异的变量作为自变量纳入多因素Logistic回归分析，结果显示VDT,结节长径，CTR是预测IAC的独立危险因素(P均＜0.05)。根据Logistic多因素回归结果对VDT、结节长径、CTR进行ROC曲线分析，三者曲线下面积分别为0.774、0.863和0.761。三者联合后预测IAC的效能最佳，AUC达到0.909,灵敏度和特异性分别为89.2％以及75.0％。　　将97例测得Ki-67表达的肺结节以Ki-67表达阴性或阳性分为两组，统计结果显示两组在病理类型、结节长径、结节平均径、结节CT值及ΔCT值上存在显著差异（P均＜0.001）;两组在CTR、VDT、结节短径存在差异（P均＜0.05）。进一步使用了spearman相关性分析了影像参数与Ki-67表达水平的相关性。我们发现，VDT与Ki-67表达水平呈负相关，相关系数R为-0.35;CTR、结节长径、结节短径、结节平均径、CT值、ΔCT值与Ki-67表达水平呈正相关，相关系数R分别为0.39、0.36、0.35、0.37、0.35和0.35（P均＜0001）。　　结论　　一、肺磨玻璃结节的影像参数如结节长径、结节短径、CT值以