医用生物化学-文献订阅-三峡大学图书馆

摘要： 牛蛙(Lithobates catesbeianus)是重要的经济养殖两栖动物，也是常用的实验模式动物;扬子鳄(Alligator sinensis)属我国特有的濒危淡水鳄类，是爬行动物的典型代表。两栖爬行动物有着相似的生活史和密切的进化关系，是生态系统的重要组成部分。然而，目前人们对两栖类和爬行类动物的血液学和血清生物化学认识，相对于哺乳类动物而言还远远不足,尤其在血液细胞化学方面的研究更是匮乏。　　本研究共采集冬眠期（1月中旬）和活动期（5月下旬）的牛蛙血液样本140份（雌雄各70份），分别进行了8项红细胞形态学参数(红细胞的长轴、短轴、表面积、体积，红细胞核的长轴、短轴、表面积、体积)、13项血液学参数（红细胞计数、白细胞计数、血红蛋白浓度、血细胞比容、红细胞平均容积、红细胞平均血红蛋白含量、红细胞平均血红蛋白浓度、中性粒细胞百分率、嗜酸性粒细胞百分率、嗜碱性粒细胞百分率、淋巴细胞百分率、单核细胞百分率、中性粒细胞与淋巴细胞比值）和23项血清生物化学参数（肌酸激酶、淀粉酶、乳酸脱氢酶、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、谷氨酰转肽酶、碱性磷酸酶、总蛋白、白蛋白、球蛋白、白球比值、总胆红素、尿素氮、肌酐、尿酸、血糖、甘油三酯、总胆固醇、钾离子、钠离子、氯离子、钙离子、血铅）检测和分析。性别显著性差异方面（p﹤0.05），雄蛙乳酸脱氢酶活性水平显著较高，而其肌酐、钠和钙的浓度则显著低于雌蛙。不同时期的显著性差异方面（p﹤0.05），我们发现活动期牛蛙的红细胞表面积和体积、红细胞核的表面积和体积、红细胞压积、平均红细胞体积值以及血红蛋白、谷丙转氨酶、球蛋白、尿素氮、钠和氯的血清浓度值显著低于冬眠期牛蛙，而其白细胞计数值和血清肌酐浓度值则显著高于冬眠期牛蛙。　　同样地，本研究共采集了冬眠期（1月中旬）和活动期（五月下旬）的扬子鳄血液样本74份（雄性30份，雌性44份），进行了15项血液学参数（红细胞计数、白细胞计数、血栓细胞计数、血红蛋白浓度、血细胞比容、红细胞平均容积、红细胞平均血红蛋白含量、红细胞平均血红蛋白浓度、中性粒细胞百分率、嗜酸性粒细胞百分率、嗜碱性粒细胞百分率、淋巴细胞百分率、单核细胞百分率、中性粒细胞与淋巴细胞比值、血沉）、23项血清生物化学参数（与牛蛙血清生化项目相同）检测和分析。性别显著性差异方面（p﹤0.05），我们发现雄性鳄碱性磷酸酶活性显著较高，而其血清球蛋白浓度水平显著低于雌鳄。不同时期的显著性差异方面（p﹤0.05），我们发现活动期鳄的平均红细胞体积、平均红细胞血红蛋白含量、总胆红素浓度和肌酸激酶活性显著较低，而其红细胞和白细胞计数、单核细胞百分率、谷草转氨酶和淀粉酶活性、血清尿素氮、肌酐、甘油三酯和胆固醇浓度显著高于冬眠期。　　血细胞化学研究方面，我们采集了12月份的牛蛙血样8份、扬子鳄血样6份，进行了瑞氏染色和细胞化学染色，细胞化学染色包括糖原染色（PAS）、苏丹黑染色(SBB)、酸性磷酸酶染色(ACP)、碱性磷酸酶染色(ALP)、过氧化物酶染色(POX)、特异性酯酶染色(AS-DCE)和非特异性酯酶染色(α-NAE)。PAS染色阳性的有：牛蛙的红细胞、中性粒细胞、单核细胞和淋巴细胞，扬子鳄的红细胞、粒细胞和单核细胞;SBB染色阳性的有：牛蛙的中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞和单核细胞，扬子鳄的粒细胞和单核细胞;POX染色阳性的有：牛蛙的中性粒细胞、单核细胞和淋巴细胞，扬子鳄的粒细胞、单核细胞和淋巴细胞;ACP染色阳性的有：牛蛙的中性粒细胞、单核细胞和淋巴细胞，扬子鳄的粒细胞、单核细胞和淋巴细胞;ALP染色阳性的有：牛蛙的中性粒细胞和血栓细胞，扬子鳄的中性粒细胞;α-NAE染色阳性的有：牛蛙的单核细胞和血栓细胞，扬子鳄的单核细胞;AS-DCE染色阳性的有：牛蛙的中性粒细胞和嗜碱性粒细胞，扬子鳄的粒细胞。　　本研究首次分活动期和冬眠期对牛蛙和扬子鳄的血液学及血清生物化学参数做了较为全面的系统的检测，并建立了健康群体的参考范围值，同时首次对牛蛙和扬子鳄的血细胞形态学及血细胞化学进行了比较研究。这些研究拓展了我们对牛蛙、扬子鳄等两栖爬行动物血液学和血清生物化学变化规律的认识，丰富了血液学和比较血液学的知识，为牛蛙和扬子鳄人工养殖中的健康评价和疾病诊断提供了基础数据。

如何在生化实验教学中应用任务驱动教学法激发学生学习兴趣

李崇奇

海南医学院生物化学与分子生物学教研室

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