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关键词： 四倍体鲫鲤   细胞培养   染色体   肾脏组织   泥鳅   囊胚   胚胎细胞   冷冻保存   成活率   种质保存   解冻  

摘要： 与哺乳类动物不同，在超低温下(-196℃)长期保存鱼类早期胚胎至今尚未成功。目前实现鱼类优良品种和珍稀物种的种质保存主要有以下三种途径：一是对鱼类精子超低温冷冻保存。多年来，国内外学者对各种鱼类精液的冷冻保存进行了大量的系统研究，目前这项技术已达到实用水平，并日益发挥作用；二是对鱼类培养的组织细胞冷冻保存，通过鱼类细胞的培养、超低温冻存、解冻后再培养过程，结合细胞工程技术(如核移植、电融合等)进行体细胞育种；大量的研究结果表明鱼类体细胞核具有发育的全能性，随着细胞培养技术、细胞工程技术日益发展成熟，完全具备实现鱼类物种种质长期保存的理论基础和技术条件。三是通过ES途径。鱼类胚胎干细胞具有发育的全能性，利用鱼类胚胎细胞育种比体细胞更具有优越性，但耐超低温性不强，只有少数学者对鱼类胚胎细胞进行冻存及发育潜能的研究，还没有对鱼类胚胎细胞进行冻存培养的系统研究。本文主要从鱼类种质保存的目的出发，一方面以四倍体鲫鲤鱼为材料，对四倍体鲫鲤鱼肾脏组织进行初步培养，为建立相应细胞库及下一步培养冻存的鱼类胚胎细胞奠定基础；另一方面，以鱼类组织细胞培养技术为基础，泥鳅胚胎细胞为材料，对鱼类胚胎细胞冻存培养方法进行初步研究，并应用该技术方法对草鱼早期胚胎细胞进行冻存培养实验。报告如下： 本文用组织贴壁法对四倍体鲫鲤鱼肾组织进行原代、传代培养。对肾组织原代培养细胞、传代培养细胞的生长状况及形态特征进行了初步观察。研究初步表明：在M199培养基加入20％小牛血清(常规量双抗)，pH在7.2-7.4之间，28℃的培养条件，四倍体鲫鲤鱼肾组织原代培养三周左右即可形成致密单层，传代细胞为5-6天左右传一次。培养细胞以成纤维样细胞为主，有少数上皮样细胞。对第5代的传代细胞进行了遗传学分析，传代4次之后，其染色体形态 正常，4n为187一200之间，未发现明显的异倍化现象。 另一个方面 的有关原理技术 ，本文主要以泥鳅胚胎细胞为材料，根据细胞冻存 ，进行泥鳅胚胎细胞制备、冷冻保存、解冻、原代 培养研究。研究初步表明 :以细胞培养液M199(含2既的小牛血清， 常规量双抗)为冻存稀释液 对泥鳅胚胎细胞冷冻保存宜采取先慢 后快的方式(例如，从0℃一 一6℃，冻存速度为一0.05℃/min，再 以一0.5℃/min的速度从一6℃一一40℃); DMSO的保护效应浓度为 12.506左右;小牛血清的浓度对泥鳅胚胎细胞的成活率影响不明显; 囊胚晚期细胞抗冻性比中早期强 ;通过对不同批次的冻存细胞解冻 培养，解冻后成活率为 30%以上细胞培养数天后 均有少数细胞贴 壁，但只发现两瓶培养细胞有明显增殖现象 产生许多未分化的小 细胞。以细胞培养液M199(含20%的小牛血清)为稀释液，DMso的 浓度为11%;与泥鳅胚胎细胞冷冻保存方法一样，采取先慢后快的 方式，冷冻保存两组草鱼囊胚晚期细胞于一1%℃的液氮中。第一组 冷冻保存6天后解冻，成活率为72%，第二组冷冻保存13天后解冻， 成活率为520/0。解冻后冻存细胞培养8一10天观察到明显增殖现象， 与泥鳅胚胎细胞一样，产生许多未分化的小细胞。

关键词： 超声   细胞凋亡   超微结构   鼠胚胎  

摘要： 目的 :检测诊断剂量彩色多普勒超声不同时间照射后对早孕小鼠胚胎组织细胞凋亡及超微结构的影响。方法 :应用 3.5 MHz探头固定持续照射孕鼠腹部 ,2 4小时后取出标本 ,琼脂糖凝胶电泳观察不同照射时间的 DNA片段情况及细胞超微结构的变化。结果 :琼脂糖凝胶电泳显示 ,除对照组外 ,其余 3组均出现凋亡梯形 ,且随时间的延长 ,梯形越明显。电镜结果显示 ,除对照组外 ,其余各组均可见不同程度的凋亡特征改变 :细胞核变形 ,染色质稀疏 ;线粒体变形、肿胀、嵴模糊、消失、部分空泡化 ;内质网网腔扩张 ,核糖体部分脱落 ;凋亡小体形成。结论 :诊断超声持续照射小鼠胚胎可引起胚胎组织细胞凋亡及超微结构的变化 ,且这种影响有时间依赖性

关键词： 解剖学   组织胚胎学   组织学   研讨会   华东六省  

ISBN: (纸本)7030101952

关键词： 神经干细胞   缺氧复氧   细胞化学   教研室   豚鼠   银屑病样   荷兰猪   组织学   组织胚胎学   解剖学报   神经细胞  

摘要： ~~

关键词： 心肌细胞凋亡   组织化学   生物化学   解剖学报   免疫组化法   缺血再灌   细胞化学   组织学   组织胚胎学   大鼠心肌  

摘要： ~~

关键词： 组织胚胎学   表皮细胞   增殖活性   组织学   骨髓基质细胞   基质(细胞)   免疫组化法   加压素神经元   定向分化   大鼠海马   间充质干细胞   原代培养  

摘要： ~~

关键词： 组织型纤溶酶原激活剂   角质形成细胞   细胞分化   人胚胎  

摘要： 目的探讨组织型纤溶酶原激活剂(tPA)参与人表皮角质形成细胞(KC)分化调控的作用。方法采用免疫细胞化学(ICC)及原位杂交(ISH)技术定性、定量检测早、中、晚期人胚胎表皮KC中tPA蛋白及mRNA的表达。结果(1)tPA在人胚胎期表皮KC中表达量明显高于出生后期,胚胎期的表达高峰在胚胎中期,胚胎晚期其蛋白水平开始降低,而tPAmRNA表达则维持在相对较高水平。(2)tPA在人胚胎期主要存在于分化程度高的表皮浅层KC内。(3)tPA聚集于KC胞膜下方。结论tPA参与表皮KC分化的调控。

关键词： 胚胎移植   组织实施   技术程序   山羊   绵羊  

摘要： 从生产实际出发 ,系统论述了羊生产性胚胎移植的组织及技术程序。主要包括 :胚胎移植条件的准备 ;生产场技术助手的培训 ;选择适宜的供、受体羊 ,并加强饲养管理 ;在适宜的季节 ,用宁波激素厂促卵泡素 (FSH) 2 50～ 30 0IU(绵羊 )和 30 0～350IU(山羊 ) ,或用中科院动物所FSH 7.5mg(绵羊 )和 9～ 1 2mg(山羊 ) ,以减量法进行供体超排 ;供、受体比例为 1 :8～ 1 2 ;用炔诺酮阴道栓配合促性腺激素 ,或用氯前列烯醇 (PG)进行受体同期发情处理 ;从供体子宫角手术回收的桑椹胚～早期囊胚 ,移植于受体羊子宫角 ;

关键词： 胚胎干细胞   neo基因   嵌合体小鼠   组织分布  

摘要： 为探讨小鼠胚胎干细胞参与早期胚胎发育的潜能 ,以neo基因作为目的基因进行了胚胎干细胞的转染 ,经G41 8的筛选 ,获得表达neo基因的单克隆细胞 ,挑取部分克隆扩大 ,进行小鼠囊胚腔注射 ,再重新植入小鼠子宫 ,共注射了 60个囊胚 ,分别回输到 5只假孕小鼠 ,在子代中得到了携带有neo基因的嵌合体小鼠。通过对嵌合体小鼠各组织PCR分析发现 ,neo基因可以在皮肤、肝脏。