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关键词： 人胚胎干细胞   组织蛋白酶K   心肌细胞分化   细胞代谢  

摘要： 背景:胚胎干细胞(Embryonic stem cells,ESCs)具有发育分化的全能性,能够在体外特定培养环境下诱导分化出用于修复组织损伤的神经细胞,心肌细胞和肝脏细胞等细胞再生源。组织蛋白酶K(Cathepsin K,CTSK)是一类分布在溶酶体中的半胱氨酸胶原蛋白水解酶,在不同类型的细胞中有所表达同时也是多种疾病治疗的潜在性药物靶点。研究发现Cathepsin K在干细胞分化过程中具有一定的干预调控作用,然而关于Cathepsin K在心肌细胞体外分化再生的研究目前还知之甚少需要必要的关注。因此本研究旨在探究Cathepsin K对H9ESCs诱导心肌细胞分化的影响及作用机制,为日后干细胞多能性与分化发育之间的相互联系提供理论依据,具有一定的参考意义。 方法:本研究采用H9人胚胎干细胞(Human embryonic stem cells,H9ESCs)为诱导对象,配制CDM3培养基模拟体外生化环境并连续诱导培养,分别在心肌细胞分化第2天,第5天和第8天添加1μM组织蛋白酶K抑制剂(Cathepsin K Inhibitor II),48 h后收集样品;整个分化期间利用显微摄影和录像对细胞形态进行持续镜检观察,同时对分化后期心肌细胞自发收缩团录像记录,在每个诱导阶段检测H9ESCs多能性和心肌细胞标志性基因的表达情况,最后通过糖脂分解代谢表达变化、线粒体融合分裂、细胞凋亡和溶酶体自噬变化来检测Cathepsin K Inhibitor II对于人胚胎干细胞诱导的心肌细胞(H9ESC-CMs)分化的具体影响。 结果:(1)利用CDM3培养基能够定向诱导H9ESC-CMs分化,并生成具有自发收缩性的心肌团。(2)Cathepsin K Inhibitor II在分化阶段中能够抑制H9ESCs多能性表达并促进更多数量H9ESC-CMs的生成。(3)在整个诱导分化过程中,Cathepsin K Inhibitor II在分化早中期降低糖酵解和脂肪酸分解代谢变化调控H9ESCs向中胚层和心脏前体细胞方向生成分化,随后通过提高脂肪酸释放氧化磷酸化而促进心肌细胞的发育分化;分化过程中线粒体生物融合发生在早期和中期因细胞形态分化方向能量缺失合成受损,后期则是通过氧化获能加快代谢促进线粒体数量的融合分裂和胞内产能,该过程与细胞凋亡因子的降低有关,同时利用Wnt通路诱导H9ESC-CMs分化生信筛选发现主要以糖代谢通路为主并发挥显著性作用。(4)Cathepsin K Inhibitor II介导的H9ESC-CMs分化与溶酶体自噬没有直接的关联影响。 结论:(1)CDM3培养基能够低成本定向诱导H9ESC-CMs分化。(2)Cathepsin K Inhibitor II能够通过降低细胞凋亡促进H9ESC-CMs生成和维持线粒体双层膜结构完整性。(3)H9ESCs-CMs分化过程中Cathepsin K Inhibitor II主要通过改变糖酵解和脂肪酸分解代谢基因的表达来促进心肌细胞的分化发育和能量获得。(4)H9ESCs-CMs分化与溶酶体自噬没有直接联系。

关键词： 在线教育   人体解剖学与组织胚胎学   课程设计   课程开发  

摘要： 本研究旨在设计与开发基于在线教育平台的人体解剖学与组织胚胎学精品课程。首先，对在线教育平台进行了概述，介绍了其在教育领域的应用和优势。然后，针对人体解剖学与组织胚胎学课程进行了设计，包括课程目标与教学目标、课程内容与教学方法以及课程评价与考核方式。详细探讨了在线教育平台上的课程开发，包括课程教材的选取与编写、课程视频的拍摄与制作、课程互动与讨论的设计，以及课程作业与考试的设计。提出了课程的实施与效果评估方法，包括课程实施过程的管理与监控、学生学习效果的评估与反馈，以及课程改进与优化的措施。

关键词： 藏鸡   转录组测序   腿肌   lncRNA   ceRNA  

摘要： 藏鸡是我国特有的地方性品种,以往的研究主要集中在家禽骨骼肌出生后阶段的生长发育规律与调控及其生长性状上,对胚胎发育阶段骨骼肌发育的研究相对较少。然而胚胎期是鸡骨骼肌生长发育的关键阶段。circRNA、lncRNA和miRNA是骨骼肌生长发育过程中至关重要的调节因子。因此,本研究随机选取已孵化10、14、18天的藏鸡胚胎为试验材料。每日龄选取3只作为生物学重复,并采集腿肌组织进行组织形态学观察和转录组测序,在此基础上,筛选出E10、E14、E18三个不同胚胎发育时期差异表达的mRNA、miRNA、circRNA以及lncRNA,并对差异表达基因进行GO和KEGG富集分析。同时本研究预测了可以靶向同一miRNA的circRNA、lncRNA和mRNA,并筛选出与肌肉发育相关的mRNA构建了ceRNA调控网络。最后,对测序结果进行了RT-qPCR验证,并对ceRNA网络中与肌肉发育相关的长链非编码RNA lnc21490.5进行cDNA末端快速扩增,获得了其全长。主要结果如下: 1.藏鸡胚胎期10、14、18d腿肌组织的转录组测序 9组藏鸡胚胎期腿肌样本测序所得原始数据经质控过滤后共获得14.10亿条高质量质控数据,有91.24%-94.68%的高质量质控数据可以比对到鸡参考基因组(GRCg6a)。在藏鸡胚胎E10期和E14期共筛选出2184个差异表达的mRNAs,E14期和E18期共筛选出3263个差异表达的mRNAs,E10期和E18期共筛选出6627个差异表达的mRNAs,共有745个mRNAs在三个时期均差异表达。对三个时期均差异表达的基因进行GO以及KEGG富集分析,GO富集分析结果显示,显著富集的前20个条目大部分与骨骼肌发育有关,筛选出与肌肉发育相关的基因如ACTA1、MYL4、MYH1C、TNNI2等88个;KEGG通路富集分析结果显示,显著富集到PI3K-Akt等10个信号通路。在藏鸡胚胎E10期和E14期共筛选出980个差异表达的circRNAs,E14期和E18期共筛选出937个差异表达的circRNAs,E10期和E18期共筛选出1906个差异表达的circRNAs,共有59个circRNAs在三个时期均差异表达。在藏鸡胚胎E10期和E14期共筛选出220个差异表达的lncRNAs,E14和E18期共筛选出302个差异表达的lncRNAs,E10期和E18期共筛选出663个差异表达的lncRNAs,共有31个lncRNAs在三个时期均差异表达。对差异表达的31个lncRNAs进行靶基因预测,共获得451个靶基因,对其进行KEGG富集分析,共有171个出现在差异表达基因显著富集的KEGG通路上。随机选取的3个差异表达mRNA、circRNA、lncRNA的表达情况与测序结果均显示一致,通过RT-qPCR验证。 2.藏鸡胚胎期10、14、18d腿肌组织的small RNA测序 9组藏鸡胚胎期腿肌样本测序所得原始数据经质控过滤后,共获得0.97亿条高质量质控数据clean reads,将clean reads经过筛选获得长度为18-32 nt的useful reads,有96.32%-99.81%的useful reads可以比对到鸡参考基因组。在藏鸡胚胎E10期和E14期共筛选出51个差异表达的miRNAs,E14期和E18期共筛选出41个差异表达的miRNAs,E10期和E18期共筛选出130个差异表达的miRNAs,共有11个miRNAs在差异表达。对E10、E14、E18三个时期均差异表达的miRNAs进行靶基因预测,共获得55个靶基因并对其进行KEGG通路富集分析,共有23个靶基因出现在差异表达基因显著富集的KEGG通路上。随机选取的3个差异表达miRNA的表达情况与测序结果均显示一致,通过RT-qPCR验证。 3.非编码RNA lnc21490.5的克隆 根据转录组测序所得到的原始序列设计cDNA末端快速扩增的5'端、3'端特异性引物,将扩增产物进行测序并拼接,获得lnc21490.5长度为522 bp,对其进行编码潜能预测分析可知其编码潜能仅有2.7%,利用blastn未发现与其全长相似的同源序列,利用blastp未发现与其编码氨基酸相似的同源序列。lnc Loactor2.0预测其位于细胞核内。预测lnc21490.5靶基因共66个并对其进行GO、KEGG富集分析,GO富集分析结果显示显著富集条目大部分与骨骼肌发育有关,KEGG通路富集分析结果显示显著富集通路大部分与心肌疾病有关。RT-qPCR结果显示,lnc21490.5在三个时期的表达量呈显著下降趋势(P<0.05),同RNA-seq趋势一致,在42日龄藏鸡肾中表达量最高,显著高于其他组织(P<0.05)。 综上所述,本研究筛选出藏鸡胚胎腿肌发

关键词： 课程思政   组织学与胚胎学   国家级一流课程   多途径全方位  

摘要： 为贯彻党的十九大关于“课程思政”的理念，在组织学与胚胎学国家级混合式一流课程建设过程中，本课程教学团队在教学过程中围绕培养仁心仁术、德才兼备的医学人才的核心，线上线下、课前课中课后结合的方式多途径全方位开展思政融合，着力培养“具有坚定理想信念、崇高职业道德、强烈社会责任、深厚人民情怀、高素质德才兼备”的医学人才。

关键词： 课程思政   建设路径   动物组织胚胎学  

摘要： 探索了动物组织胚胎学课程教学中课程思政的建设路径,检验了课程思政的实施效果。结果表明:在教学中开展课程思政活动有助于学生提高道德修养、培养人文素养及树立正确的“三观”,有助于提高教师的道德水准和教学水平。

关键词： 新农科   组织胚胎学   实验教学  

摘要： 新农科建设倡导推进教学方法改革,实施探究式和讨论式等多种教学方法,促进学生的批判性思维和创新意识的培养。《水产动物组织胚胎学实验》主要是验证理论课所学知识,巩固和加强理论知识,加深学生理解和记忆;同时,培养学生的动手能力和创新能力。本专业实验教学存在设施设备损坏、教学方法单一和考核方式简单等问题。本研究从改善实验条件、丰富教学内容和手段以及构建新考核机制等方面全方位改善教学效果,为提升新农科人才培养质量提供支持。

关键词： 应用型本科   鱼类组织胚胎学   实践教学  

摘要： 鱼类组织胚胎学是水产养殖学专业的核心基础课程,也是连接理论知识和生产实践的桥梁课程。课程实践教学的有效开展有助于学生理解鱼类组织胚胎学涉及的微观结构与功能。本文基于应用型本科院校课程要求,分析当前鱼类组织胚胎学的实践教学模式,在实践教学中选择合适的教学项目,借助显微数码互动系统、翻转课堂等教学方式,并对实践课程的考核体系进行改革,激发学生实操热情,切实提高鱼类组织胚胎学的实践教学质量。

关键词： 组织学与胚胎学   思政教育   探讨  

摘要： 课程思政是我国高校思想政治教育的新模式、新理念.组织学与胚胎学是医学生专业必修课之一.本文论述了思政教育融入该课程的意义,并从在专业知识点中融入思政教育、从社会热点中发掘思政元素及创新思政教学手段等角度探讨将思政教育融入到该课程的途径.

关键词： 课程思政   高等医学院校   立德树人   专业课程教学   组织学与胚胎学   医护工作者   家国情怀   医学人才  

摘要： 高等医学院校是培养医护工作者的摇篮,优秀的医学人才不仅需要拥有精湛的医疗技术,更应怀揣“医者仁心”和“家国情怀”。作为工作在高等医学院校一线的基础医学专业课程教师,更多关注的是在“大变局”的关键时期,如何围绕“立德树人”开展专业课程教学,培养出更多优秀的医学人才。2017年以来,“课程思政”[2]进入了教师的视野,并开始尝试将其融入本专业课程教学。

关键词： 科学技术协会   组织胚胎学   人体解剖学   个案报告   研究论著   神经生物学   医学影像   细胞生物学  

摘要： 《四川解剖学杂志》(季刊)创刊于1980年,由四川省科学技术协会主管,四川省解剖学会主办,全国公开发行。本刊登载人体解剖学、组织胚胎学、人类学、神经生物学、细胞生物学、分子生物学、医学影像以及与基础医学相关的临床医学各学科的研究论著,并辟有“教学研究”“技术与方法”“综述”“解剖变异”“个案报告”等栏目。欢迎全国各地基础医学和临床医学工作者踊跃投稿。