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关键词： 网络教学平台   网站  

ISBN: (纸本)9787030232267

关键词： 超声   Bcl-2   凋亡   鼠胚胎  

摘要： 目的研究诊断超声照射大鼠早孕胚胎组织细胞Bcl-2表达的影响,探讨诊断超声诱导细胞凋亡的机制。方法采用频率为3.5MHz超声分别照射孕7d大鼠腹部子宫体表投影区,分为照射0min组、10min组、20min组、30min组,超声照射后24h取胚胎组织,SP免疫组织化学检测Bcl-2蛋白表达水平的变化。结果随着照射时间的延长,各组Bcl-2阳性表达率逐渐下降,与照射时间呈负相关。其中10min组与0min组相比差异无显著性(P>0.05),20min组、30min组与0min组相比差异有非常显著性(P<0.01)。结论诊断超声持续照射大鼠早孕胚胎超过20min使Bcl-2蛋白水平表达下调,提示诊断超声长时间照射能抑制抗凋亡因子Bcl-2的表达,从而诱导细胞凋亡。

关键词： β淀粉样前体蛋白   脑组织发育   生理功能   免疫组织化学染色  

摘要： 本实验研究了胚胎及生后不同发育时期昆明小鼠脑的组织学发生以及β淀粉样前体蛋白(β-amyloid precursor protein，β-APP)在其发育过程中的表达，试图探讨β-APP在脑发育过程中的正常生理功能。　　 方法：取胚胎7.5、9.5天小鼠全胚，胚胎11.5、13.5、15.5天胎鼠头部，胚胎17.5天、生后1天、生后7天、生后14天以及成熟昆明小鼠的脑组织进行石蜡包埋、连续冠状及矢状切片，并进行HE染色、尼氏染色以及Nestin，β-APP的免疫组织化学染色。　　 结果：(1)小鼠胚胎9.5天前神经管孔封闭，各脑泡结构分化开始明显，但尚未完全分化完成，胚胎11.5天已可分出明显五个脑泡，即端脑、间脑、中脑、后脑和末脑，之后各脑区按照不同的时空顺序发育成熟。(2)β-APP在胚胎7.5天即开始出现表达，但表达微弱;在胚胎11.5天脑泡壁可见明显点状表达;此后表达继续升高，胚胎13.5天在室管膜处表达很明显，胚胎17.5天在大脑皮质表达到高峰，海马和室管膜层也可见表达;生后β-APP表达普遍较低，直到成熟组较广泛表达。(3)Nestin在小鼠胚胎7.5天表达广泛，在胎盘和羊膜位置表达较强，神经板处表达较弱;在胚胎11.5～15.5天室管膜可见明显表达;至胚胎17.5天表达达到高峰，主要表达部位有室管膜，室管膜下层以及海马;出生后表达较弱;成熟组表达已接近阴性。　　 结论：(1)小鼠脑发育经历了复杂的变化过程，各脑区的发育呈不同时间空间变化，其发育过程大致可以分为四个阶段：①神经管形成阶段(E7.5～E9.5);②神经上皮.脑泡形成阶段(E9.5～E11.5);⑨神经元迁移分化阶段(E11.5～E17.5);④神经元成熟阶段(E17.5～成熟)。(2)β-APP在小鼠脑发育过程中有一定的生理作用，与神经元的增殖分化、神经元的迁移以及突触形成有关。

关键词： 护理专业   人体解剖与组织胚胎学   教学改革与实践  

摘要： 为适应护理专业特色,对我校高职人体解剖学的教学进行改革。教学内容进行整合和精选,丰富理论教学手段,采用以互动式教学和实验中心开放相结合的教学组织形式,提高了学生的学习积极性,取得了较好的教学效果。

ISBN: (纸本)9787030228741

关键词： 人体解剖学   基础医学   解剖学实验   四川解剖学杂志   解剖教学   组织胚胎学   组织学   目次  

关键词： 骨髓间充质干细胞   后肾   后肾间充质干细胞   输尿管芽   诱导   三维立体   微环境   大鼠  

摘要： 背景和目的: 慢性肾脏疾病(Chronic kidney disease,CKD)发病率不断增加,在成人中的发生率已达10%,其主要特征是细胞外基质(Extracellular matrix,ECM)过度沉积和纤维化,引起肾功能进行性下降,发展的最终结局是终末期肾衰(end stage renal disease,ESRD),目前只能依赖血透、腹透和肾移植来治疗。血透、腹透只能部分替代肾脏的滤过功能。肾移植供体短缺、抗排异药物副作用大,这些治疗方法均存在严重缺陷。寻找更完美的新治疗方法和途径是肾脏病工作者迫在眉睫的任务。 近来研究发现骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)具有高度可塑性(plasticity),在体的胚胎组织可诱导骨髓间充质干细胞向肾干细胞(renal stem cells)或肾脏固有细胞分化,异种胚胎组织也可诱导人骨髓间充质干细胞向肾干细胞或肾脏固有细胞分化,但在胚胎内诱导骨髓间充质干细胞向肾干细胞分化无临床应用前景,因为难以从胚胎组织中分离纯化由骨髓间充质干细胞分化而来的肾干细胞。如果能在体外诱导骨髓间充质干细胞分化为肾干细胞,则诱导的细胞可被轻而易举地分离和纯化,具有广阔的临床应用前景。 大量资料表明,干细胞的分化发育及其发育方向,取决于其所处的微环境(microenvironment)。在后肾发育过程中,后肾间充质细胞(metanephric mesenchyme cells,MMCs)即胚肾干细胞,具有自我更新及多向分化的能力,除了集合管起源于输尿管芽(ureteric bud,UB)外,后肾间充质细胞分化形成所有的肾单位和基质细胞,在离开胚肾组织仍能发育成肾固有细胞,这提示胚肾组织具有干细胞微环境特征。 鉴于以上科学研究背景,本课题拟在体外,用Transwell小室共培养体系,将骨髓间充质干细胞与后肾间充质细胞和输尿管芽分室共培养,利用胚肾组织按内在规律释放的可溶性因子,诱导骨髓间充质干细胞向肾干细胞分化,观察诱导后的干细胞在体外诱导输尿管芽分枝的能力,为以后探讨诱导骨髓间充质干细胞向肾干细胞分化所需的调控因子及建立单纯用诱导因子在体外诱导骨髓间充质干细胞向肾干细胞分化的方法提供实验依据,为肾脏组织工程研究以及将来采用肾干细胞在纤维化的肾组织形成有功能的新肾单位的实验研究提供充足的无免疫原性的肾脏种子细胞。 方法: 1.用密度梯度离心和贴壁培养相结合的方法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,倒置相差显微镜观察细胞形态及生长特点,四唑盐比色法(Methylthio tetrazole, MTT)观察细胞增殖及更新能力,透射电镜观察细胞内部结构,流式细胞仪检测细胞周期及细胞表面CD44、CD45、CD90分子的表达,免疫细胞技术检测细胞波形蛋白(Vimentin)、纤维连接蛋白(Fibronectin,FN)、角蛋白(Keratin)、E-钙粘蛋白(E-cadherins)、CD34等的表达,同时对培养细胞进行成脂、成骨诱导分化,采用油红(Oil red)O染色及骨钙素(osteocalcim,OCN)观察大鼠骨髓间充质干细胞诱导分化情况。细胞鉴定后,将其接种于细胞外基质胶中进行三维立体(three-dimensional,3D)培养,倒置相差显微镜观察细胞在细胞外基质胶中的形态变化,激光扫描共聚焦显微镜观察细胞外基质胶不同层面的细胞形态。 2.在解剖显微镜下分离孕13.5d(E13.5d)大鼠胚胎,获取胚胎后肾并去除输尿管芽,将胚胎后肾间充质细胞以组织块法进行原代培养,用倒置相差显微镜观察细胞形态演变,MTT法观察细胞增殖及更新能力,透射电镜和扫描电镜观察细胞内部结构和表面结构,流式细胞仪检测细胞周期及细胞表面CD44、CD45、CD90分子的表达,免疫细胞技术检测细胞Vimentin、Fibronectin、Keratin、E-cadherins及CD34的表达,同时进行细胞多向诱导分化(成脂肪细胞、成骨细胞)实验,分别采用油红O及OCN染色观察诱导分化情况。细胞鉴定后,将其接种于细胞外基质胶中进行三维立体培养,倒置相差显微镜观察细胞在细胞外基质胶中的形态变化,激光扫描共聚焦显微镜观察细胞外基质胶不同层面的细胞形态变化。 3.在解剖显微镜下分离孕13.5d(E13.5d)大鼠胚胎,获取胚胎后肾,消化法得到完整的输尿管芽,将其种植于Transwell小室上室中的细胞外基质胶中,后肾间充质细胞种植于Transwell小室下室中,二者进行分室共培养,倒置相差显微镜下观察输尿管芽的形态,免疫细胞技术对其进行鉴定,激光扫描共聚焦显微镜下观察输尿管芽的形态变化。 4.

关键词： 组织胚胎学   显微影像   放大倍数  

摘要： 为了准确计算出显微影像拍摄和观看时的放大倍数,文章在组织胚胎学等部分基础医学课程的教学和科研中,介绍了从传统胶片到现代数码拍摄的显微影像放大倍数的计算方法、从古老的纸质载体到时尚的电子版本显微影像放大倍数的计算方法。文章指出在教学和科研中要准确表示显微影像放大倍数时,事先要了解该显微影像拍摄时的各种信息、观看设备及仪器的各种信息,然后根据文章中所给出的公式进行计算即可。

关键词： Apostichopus japonicus   胚胎发育   幼体发育   体腔细胞   多克隆抗体   组织学   酶联免疫检测   间接荧光免疫检测  

摘要： 刺参养殖作为北方沿海水产养殖重要的新兴产业之一,已经取得了显著的经济和社会效益。在刺参人工育苗和增养殖技术日臻完善的今天,养殖技术对刺参养殖做出了骄人的贡献。但是2002年的刺参腐皮综合症的爆发,让人们意识到养殖技术似乎遇到了它难以逾越的瓶颈。刺参腐皮综合症的传染性和复杂性,让人们不但从养殖体系中寻找原因,更多的目光转移到了刺参本身的生物学特征上。随着刺参养殖技术的进步,人们对刺参的胚胎发育和生殖腺周期有比较详细的了解,但是仍缺少生动直观的参考资料。由于刺参独特的生物学构造和特殊生理活动,也使得刺参的生理机能及组织学和吐脏再生的分子生物学成为研究的热点。 本文在刺参人工育苗的环境下,观察并叙述刺参自然孵化的胚胎发育和幼体生长变化的过程,并拍照记录。在显微镜下测定刺参胚胎及幼体的直径、全长等形态学特征,并建立胚胎发育时序表,绘制了幼体生长曲线。 通过解剖学方法和石蜡切片、H&E染色,全面而系统的观察和描述了刺参各个主要系统的构造和组织结构,为进一步研究刺参的生理特征提供参考。以富集纯化刺参的体腔细胞作为抗原,免疫新西兰大白兔,初步探索了刺参体腔细胞抗体的制备的最佳条件,为利用免疫组化手段来寻找与体腔细胞具有同源性的内脏器官或组织做准备。 运用间接酶联免疫反应,检测刺参抗体效价大约是1:800,抗体的效价较低,与刺参的体腔细胞种类较多和环境中细菌及刺参内脏的干扰有关系。利用竞争性酶联免疫反应检测环境中干扰细菌灿烂弧菌和嗜水气单胞菌对体腔细胞抗原的竞争性较弱,而呼吸树匀浆组织对体腔细胞抗原有一定的竞争性,这说明在抗原制备时可能被呼吸树污染。 利用间接荧光免疫检测体腔细胞抗体和体腔细胞结合的特异性,在荧光显微镜下发现与多克隆抗体结合的刺参体腔细胞发出蓝绿光,而用阴性血清或不加荧光抗体检测观察荧光较弱或不发出荧光,刺参体腔细胞多克隆抗体和呼吸树结合发出淡蓝色的荧光,表明多克隆抗体和呼吸树有一定的结合性。 以上实验表明,进一步排除细菌及刺参内脏的干扰,开发生物技术手段分离纯化体腔细胞作为抗原,制备高效价、高特异性的体腔细胞多克隆抗体,可以用于研究刺参体腔细胞的发生。利用单克隆抗体技术,有望进一步研究不同种类体腔细胞之间的组织发生关系。