关键词:
博落回
体细胞胚胎
血根碱
愈伤组织
代谢累积
摘要:
博落回是一种重要的药用植物,应用前景广阔,但其原料来源日渐成为博落回发展的主要制约因素。本论文以博落回叶片为材料,对博落回体细胞胚胎发生过程中外植体灭菌方法、蔗糖浓度、光照条件以及不同激素水平对博落回愈伤组织诱导的影响进行了研究,对愈伤组织形成与增殖过程中不同激素条件对博落回血根碱累积的影响进行了考察,并完成了博落回由体细胞胚胎途径进行植株再生的全过程,得到了成活的博落回组培再生个体。主要试验结论如下:
(1)博落回叶片以70%酒精处理15s,再用0.1%HgCl2处理4min的方法灭菌可以得到较好的灭菌效果和外植体成活率;以30g/L的蔗糖浓度进行培养时,外植体成活状态和愈伤诱导率均较好;黑暗条件比较适合博落回愈伤组织的培养。
(2)博落回愈伤组织的适宜培养条件是MS为基本培养基,添加0.5mg/L6-BA、0.75mg/L2,4-D和0.5mg/L NAA的植物激素,蔗糖浓度30g/L,琼脂7g/L, pH5.8,在黑暗条件下25℃恒温培养。
(3)博落回体细胞胚胎发生途径为间接发生,整个生长发育过程与合子胚的发育相似,博落回叶片在附加0.5mg/L6-BA和0.5mg/L2,4-D的MS培养基上能实现体细胞胚胎发生、发育和萌发,在泥炭土:木质泥炭土:椰糠粉:蛭石=1:1:1:1基质上可以完成植株再生。
(4)不同激素条件下的博落回愈伤组织中血根碱的累积水平有很大差异,在添加0.75mg/L6-BA和0.5mg/L NAA的培养基上愈伤组织的血根碱累积状况最好;NAA对血根碱的累积有利,2,4-D可能会抑制血根碱的累积。