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关键词： 齐口裂腹鱼   MHCⅡA   克隆   组织分布   胚胎   仔鱼  

摘要： 本文以齐口裂腹鱼为研究对象,克隆其MHCIIA基因,初步探究该基因的分子多态性、组织表达的特异性以及在胚胎和仔鱼中的差异性表达模式,以期为齐口裂腹鱼的抗病育种研究提供一定的理论基础。主要组织相容性复合体(Major Histocompatibility Complex, MHC)的Ⅱ类分子是脊椎动物中一种编码细胞表面糖蛋白,具有高度多态性的基因,且部分基因型与机体抗病力存在较强的相关性。本研究首先利用同源克隆和RACE技术获得齐口裂腹鱼MHCⅡA基因的cDNA全序列,其次借助测序法分析了该基因的开放阅读框(ORF区)的多态性,最后运用实时荧光定量PCR检测其组织分布以及在同一亲本的胚胎和仔鱼中表达情况。主要研究结果如下：(1)齐口裂腹鱼MHCⅡA基因的cDNA序列全长为909bp (Genebank登陆号：KM670437),其中5'-UTR为64bp, ORF区为711bp,3’-UTR为135bp,并含有典型聚腺苷酸化信号(AATAAA)和27个Poly(A)。编码蛋白含有236个氨基酸,其推测的蛋白质分子量为25.94Kda,理论等电点为pI=4.60。其预测的二级结构同其它物种具有典型的MHCⅡA的结构特征,包含1个信号肽、2个胞外结构域(α-1和α-2)、1个跨膜区和1个胞质区。编码蛋白的氨基酸序列存在4个保守的半胱氨酸残基、经典的氨基酸框架结构GXXXGXXGXXXG以及丰富的磷酸化位点,且与建鲤(Cyprinus carpiovar Jian)同源性最高,相似度为83.03%。(2)从8尾健康成鱼中得到17条不同的MHCⅡA基因的cDNA序列,其中最多1尾获得4条不同序列。分析表明该基因至少编码15条不同的氨基酸序列,至少含有2个基因座。其中1条氨基酸序列与其它14条的同源性为89.6%～94.2%,序列间的差异介于5.8%～10.4%之间。同时在编码的氨基酸残基中共发现50个变异位点,其中35个变异位点主要集中于α-1区,占变异位点总数的70%,表明该基因具有高度的多态性。(3) MHCⅡA基因在所检测成鱼的19个不同脏器组织中均有分布,但表达量差异显著,体现出表达的组织特异性。中肾、头肾、中肠、前肠、后肠、脾脏、红肌和心脏中的表达量较高,脑、卵巢、肝胰脏、鳍条、白肌中的表达量次之。该基因在中肾中检测到最高的表达水平,其是血液的15.869倍(P<0.05)。血液、眼睛、精巢、皮肤、鳃和鳔的表达量较低,其中表达量最低的鳔只占血液的38.5%(P<0.05)。分析表明该基因的表达水平与免疫相关的器官或组织紧密关联。(4)通过检测28个时期的胚胎发现,未受精卵、受精到原肠期的胚胎中均检测到MHCⅡA基因表达。但受精1h到8细胞期的胚胎表达量都低于未受精卵,表明该基因在齐口裂腹鱼早期胚胎中的表达水平主要受到母源因子mRNA控制。并且该基因在16细胞期胚胎中表达量达到峰值,是未受精卵的2.259倍(P<0.05),表明其表达水平主要受到合子基因的控制。而胚胎进入囊胚期后,该基因表达量显著性的降低,仅为未受精卵的8.6%(P<0.05),尤其是器官形成阶段的胚胎中几乎检测不到该基因的表达,表明此发育阶段的胚胎自身合成的MHCⅡA基因显著性减少或没有表达,可能是MHCⅡB基因表达量增加所致。(5)通过检测9个时期的仔鱼发现,MHCⅡA基因在不同时期的仔鱼中表达水平差异显著。在刚出膜仔鱼中的表达量只有未受精卵的2%(P<0.05)。但在进入眼球色素出现期和循环期的仔鱼中,该基因的表达量显著性的增加,分别是未受精卵的7.296和24.794倍(P<0.05)。并且在消化道贯通到卵黄囊消失期的仔鱼中,该基因的表达量显著性的高于之前时期,并在背鳍形成期达到峰值,是未受精卵的968.412倍(P<0.05)。这种差异性的表达模式可能与仔鱼免疫器官或组织的逐渐出现和完善,以及从内源性营养转换到外源性营养有关。

关键词： 胚胎停止发育现象   正常早孕   绒毛组织   印迹基因   基因表达  

摘要： 目的：　　对哺乳动物而言，印记基因指的是只表达亲本一方的遗传信息，而另一方处于关闭状态的一类基因。基因印记对哺乳动物至关重要，在其生长，发育以及细胞分化等过程中都发挥重要作用。大多数的印记基因都与胚胎发育密切相关，可以调节胚胎的生长，发育，甚至可以影响新生儿的生长。有报道指出印记功能的紊乱可以导致多种发育异常，有时也会造成死胎。虽然印记基因的意义重大，但是它的形成，特异性识别以及印记基因的表达缺陷等机制尚不清楚。人类的PEG3基因位于19q13.4，已经被证明是父系表达的基因。PEG3在卵巢，睾丸，胎盘中均有大量表达。　　胚胎停止发育包括生理性胚胎发育暂时停止和病理性胚胎发育停止致胚胎死亡。胚胎停止发育的原因多数不是很明确。　　本研究对正常早孕绒毛组织与胚胎停止发育绒毛组织中印记基因PEG3的表达进行了分析。进一步探讨PEG3在孕早期对胚胎发育的作用及其机制。　　方法：　　一、PEG3在正常早孕绒毛组织与胚胎停止发育绒毛组织的表达　　1、Western Blot方法检测PEG3蛋白在正常早孕与胚胎停止发育的绒毛组织（各45例）中的表达。　　2、RT-PCR方法检测PEG3的RNA水平在正常早孕与胚胎停止发育的绒毛组织（各45例）中的表达。　　3、免疫组化方法检测PEG3蛋白在正常早孕与胚胎停止发育的绒毛组织（各45例）中的表达。　　二、过表达PEG3对HTR8-SVneo细胞增殖的影响　　1、MTT技术检测转染不同浓度的PEG3对HTR8-SVneo细胞增殖的影响。　　2、流式分析技术检测转染不同浓度的PEG3对HTR8-SVneo细胞周期的影响。　　2、Western Blot方法检测转染不同浓度的PEG3对p21和Cyclin D1蛋白的表达影响。　　3、RT-PCR方法检测转染不同浓度的PEG3对p21和Cyclin D1的mRNA水平的影响。　　三、过表达PEG3对HTR8-SVNEO细胞凋亡的影响　　1、ANNEXIN-Ⅴ-FITC试剂盒检测转染不同浓度的PEG3对HTR8-SVNEO细胞凋亡水平的影响。　　2、Western Blot方法检测转染不同浓度的PEG3对Caspase3蛋白的表达影响。　　3、RT-PCR方法检测转染不同浓度的PEG3对Caspase3的mRNA水平的影响。　　结果：　　一、PEG3在正常发育的绒毛中表达高于胚停发育的绒毛组织　　1、PEG3的蛋白水平在正常发育的绒毛中表达高于胚停发育的绒毛组织。　　2、PEG3的mRNA水平在在正常发育的绒毛中表达高于胚停发育的绒毛组织。　　二、过表达PEG3促进HTR8-SVNEO细胞的增殖　　1、过表达PEG3可以促进HTR8-SVNEO细胞增殖。　　1、过表达PEG3可以促进HTR8-SVNEO细胞G1到S期的转化。　　2、过表达PEG3可以增高Cyclin D1的蛋白水平及mRNA水平的表达同时降低p21蛋白水平及mRNA水平的表达。　　三、过表达PEG3抑制HTR8-SVNEO细胞的凋亡　　1、过表达PEG3可以抑制HTR8-SVNEO细胞的凋亡水平。　　2、过表达PEG3可以降低Caspase3蛋白水平及mRNA水平的表达。　　结论：　　1、PEG3的表达在正常发育的绒毛中表达高于胚停发育的绒毛组织。　　2、PEG3通过影响CyclinD1和p21的表达，促进HTR8-SVNEO细胞G1/S期的转化，从而促进HTR8-SVNEO细胞增殖。　　3、PEG3通过抑制Caspase3的表达，抑制HTR8-SVNEO细胞的凋亡。

关键词： 组织学   形态学   实验教学  

摘要： 组织胚胎学是一门形态学科,内容抽象、难懂,实验教学尤其重要,为了提高实验教学效率和质量,我们在实验教学条件不断改善的情况下,积极探索和研究各种实验教学方法的改革。

关键词： 组织胚胎学   实验教学   课程体系改革  

摘要： 组织胚胎学是医学生必修的基础课程，在医学课程体系中有着重要的奠基作用。实验教学与理论教学同等重要。实验教学的传统模式是验证性实验。为适应新时代教育模式的需要，结合我校实验课程体系改革，适当增加综合性试验。在理论课讲解组织学实验技术方法的前提下，将理论知识融合到实验过程中，把验证性、演示性的实验内容转变为操作性、动态性的实验内容，激发学生的学习兴趣，锻炼学生的动手能力，使理论与实践紧密结合起来，有利于培养学生综合能力。我们拟采用"学导式"教学法，先学后导，以学为主，以导利学。课前学生预习，教师提出需要解决的问题；课中以学生为主体，充分发挥学生的主观能动性，教师为辅，适当引导；课后学生讨论，教师总结，及时评价。

关键词： 视频教学   人体解剖学   组织胚胎学   课程教学  

摘要： 目的:探究在人体解剖学与组织胚胎学课程教学中应用视频教学的效果。方法 :选取我校医学专业100名学生作为研究对象,以随机数字表法为分组依据将学生分为对照组和观察组,每组50名学生,对照组学生的教学方法选用传统的方法,观察组的教学方法选用视频教学,比较两组的教学结果。结果:观察组的及格率(94.44%)明显好于对照组的(68.89%),具有统计学意义(p<0.05)。结论 :视频教学法在人体解剖学与组织胚胎学的教学中应用取得了较好的教学效果,提高了学生的学习兴趣,利于学生成绩的提高,值得广泛应用。

关键词： 组织学与胚胎学   医学细胞生物学   教育部   教育行政组织   广西  

摘要： 谢小薰,无党派人士,毕业于德国Saarland大学医学院,获医学博士学位;现为广西医科大学组织学与胚胎学二级教授,博士生导师;教育部组织学与胚胎学精品资源共享课负责人、教育部组织学与胚胎学双语教学示范课负责人、教育部组织学与胚胎学教学团队负责人、教育部组织学与胚胎学精品课程负责人;荣获广西高校八桂学者、自治

关键词： 基础医学  

ISBN: (纸本)9787030454393

摘要： 全书分二篇，第一篇为人体解剖学，第二篇为组织胚胎学，各分15章。作为案例版教材，在每章中都精选了案例及问题讨论，同时附有案例提示，针对学生能力水平引导学生学习，提高学生学习兴趣，培养学生分析问题和解决问题的能力。在每章后，用精炼的语句总结出的主线做本章小结，最后还有目标检测来巩固每章内容。便于预习和自学是本书突出特点。在正文中插入与临床、日常生活常识及局部解剖、断层解剖等有关内容的“链接”，以扩宽学生的知识面，也是本教材的特点之一。本教材在保证思想性、科学性、启发性、先进性和实用性的前提下，贴近考试，教学

关键词： 独立学院   组织学与胚胎学   病理学   课程整合  

摘要： 目的:探讨整合组织胚胎学与病理学课程在独立学院教学中的实施效果和存在问题。方法:对62名医学影像学专业学生采取课程整合教学,对59名该专业学生实施传统教学。教学结束后对两组学生进行综合考核和问卷调查,结果进行t检验。结果:实验组(整合组)学生学习成绩提高(P<0.01);学生对整合后的课程比较满意。结论:课程整合教学得到较多学生认可并取得了良好效果,值得推广。

关键词： 转化生长因子β1   E-钙黏蛋白   胚胎停止发育   绒毛组织   差异表达   发病机制  

摘要： 背景与目的：　　胚胎停止发育（early embryonic death）是指孕早期因某种因素或多种因素共同作用引起胚胎发育停止导致胚胎死亡,最终导致流产,是流产前的病理过程。彩超检查提示妊娠囊内胎芽或胎儿形态不整，无胎心搏动，或表现为枯萎卵。胚胎停育是一种常见的早期病理妊娠，其结局常为稽留流产或不全流产，危害育龄期妇女生殖健康，妊娠年龄推迟，给患者及家属带来了一定的经济负担和心理负担，再次妊娠胚胎停育的风险增加可能导致恶性循环。胚胎停育在育龄期妇女妊娠中发病率为15-30％，且近年来有增加趋势。目前认为胚胎停育的常见致病因素为染色体、感染、有毒物质接触、年龄、内分泌、免疫等，但据国内外文献报道约40-50%的胚胎停育原因不明。近年来研究发现胚胎在着床过程中绒毛滋养细胞对子宫内膜的侵袭深度及绒毛内血管的生成与妊娠早期胚胎早期停育、流产等病理妊娠的发生密切相关。　　早期妊娠过程中滋养细胞对子宫肌层的适度浸润是妊娠成功的关键，而转化生长因子-β1（Transforming growth factor-β1，TGF-β1）和E-钙黏蛋白（E-cadherin，E-cad）在其过程中发挥重要作用。现有文献认为，TGF-β1可能通过调节妊娠期体内Th1/Th2型细胞因子的平衡、下调TIMP-1和MMP9产生抑制滋养细胞过度侵袭以及免疫抑制作用来维持母胎界面的免疫耐受状态参与胚胎停止发育;E-cad是一种广泛表达于上皮细胞膜表面钙依赖的粘附分子，介导的粘附系统是已被公认的“侵润抑制系统”，其在绒毛各部位的表达逐渐下降，有利于滋养细胞的侵入子宫肌层完成着床。国内外文献表明，在体内TGF-β1可以利用smad依赖和非smad依赖的信号通道使E-Cad的表达下降，从而破坏细胞间的粘附屏障。综上所述，有理由设想，在胚胎绒毛组织中，某种原因导致的TGF的下调，进而TGF通过各种途径上调了 E-cad，二者共同参与了胚胎停育的发生发展。本课题拟采用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）及免疫组化，检测妊娠早期胚胎停育绒毛组织和妊娠早期正常胚胎绒毛组织中TGF-β1和E-Cad表达情况，分析两组之间TGF-β1和E-Cad表达的差异，探讨TGF-β1和E-Cad在早期妊娠胚胎停止发育机制中的作用，为孕早期胚胎停育的发病机制研究提供一种新的思路和一定的理论依据。　　方法：　　对在我院随机收集的30例妊娠早期胚胎停育绒毛组织和30例妊娠早期正常胚胎绒毛组织。　　1.采用 Real-time PCR技术，检测两组绒毛组织中TGF-β1mRNA和E-Cad mRNA表达情况。　　2.采用免疫组织化学技术（免疫过氧化物酶法）检测两组绒毛组织中TGF-β1和E-Cad蛋白的细胞定位及表达情况。　　3.采用 SPSS17.0统计软件对实验数据进行分析，定量资料采用 t检验，定性资料的比较采用卡方检验，两定量资料的相关性分析采用pearson检验，以α=0.05为检验水准。　　结果　　1.30例妊娠早期胚胎停育组和30例妊娠早期正常胚胎组患者的年龄、孕次、孕囊大小、停经天数（P＞0.05）;***-β1mRNA在两组绒毛组织中均有表达，胚胎停育组TGF-β1mRNA表达量显著低于正常对照组（t=2.8592, p＜0.05）;3.E-CadmRNA在两组绒毛组织中均有表达，胚胎停育组E-CadmRNA表达量明显高于正常对照组（t=6.024, p＜0.05）;***-β1蛋白在两组绒毛组织中滋养层细胞均有不同程度的阳性表达，主要定位于滋养细胞细胞质，TGF-β1蛋白在胚胎停育组中的阳性表达率（33.3%）显著低于正常对照组(70%)（χ2=8.076,P＜0.05）;5.E-Cad在两组绒毛组织中滋养层细胞均有不同程度的阳性表达，主要定位于滋养细胞细胞膜，E-Cad蛋白在胚胎停育组中的阳性表达率（50%）显著高于正常对照组(30%)（χ2=5.934,P＜0.05）;6.在正常对照组绒毛组织中均有TGF-β1蛋白和E-Cad蛋白表达，正常早孕期绒毛组织中 TGF-β1蛋白和 E-Cad蛋白表达呈负相关，关联系数 r=0.215，（χ2=8.231，P＜0.05）;7.在胚胎停育绒毛组织中均有TGF-β1蛋白和E-Cad蛋白表达，早孕期胚胎停育绒毛组织中 TGF-β1蛋白和 E-Cad蛋白二者表达呈负相关，关联系数 r=0.470，（χ2=8.523，P＜0.05）。　　结论　　1.胚胎停育患者绒毛组织中TGF-β1的表达量下降，E-Cad的表达量升高，二者可能参与了胚胎停育的发病过程。　　***-β1的下调可能通过上调E-Cad的表达水平，参与了胚胎停止发育的发生机制。

关键词： 组织胚胎学   教学改革  

摘要： 医学专科学校护理专业的组织胚胎学面临教学内容多、课时少的困境,如何在有限的教学时数中使学生掌握更多的组织学知识?只有进行有效的教学改革,提高教学质量,才能实现这一教学目标。