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关键词： 老年良性前列腺增生   等离子电切手术   治疗效果   影响因素  

摘要： 目的 评价老年良性前列腺增生患者等离子电切治疗效果的影响因素.方法 选取2018年4月至2019年2月在本院接受治疗的前列腺增生患者,从中选取50例老年良性前列腺增生患者作为基础研究数据,将参与实验患者按照盲选法进行分析,组别为均数相同的两个研究小组(对照组TURP组,观察组等离子电切组),每组各25例.对照组给予患者经尿道前列腺电切术治疗,观察组给予患者等离子电切手术治疗,对比指标选择:手术质量、并发症率.结果 观察组患者采用等离子电切手术术中的各项指标均更加理想,观察组患者采用等离子手术后并发症的发生率更低,后期恢复效果理想,P＜0.05具有统计学意义.结论 老年良性前列腺增生患者使用等离子电切手术治疗,手术时间更加理想,患者术后的并发症率较低,最大限度的保留患者的各项功能,可满足患者术后的生活质量.

关键词： 良性前列腺增生   经尿道前列腺等离子电切术   安全性分析  

摘要： 目的:研究经尿道前列腺等离子电切术治疗高龄良性前列腺增生患者的疗效和安全性。方法:2017年2月-2018年10月收治高龄良性前列腺增生患者78例,随机分为两组,各39例。治疗组采用经尿道前列腺等离子电切术治疗,对照组采用经尿道前列腺电切术治疗。比较两组手术指标水平和症状改善评分情况。结果:两组手术时间、住院恢复时间以及尿管留置时间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗组平均术中出血量低于对照组、平均膀胱冲洗时间短于对照组、症状评分显著低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:经尿道前列腺等离子电切术对改善高龄良性前列腺增生患者症状效果显著,术中出血量更低,安全性佳。

关键词： 文冠果花提取物   多糖   总黄酮   急性毒理   良性前列腺增生,药效   机制  

摘要： 目的:建立文冠果花水提取物（WE）及乙醇提取物（EE）化学成分定量分析方法;确立半数致死量(LD50)和最大给药剂量;采用丙酸睾酮（TP）诱导的良性前列腺增生（BPH）模型评价WE及EE抑制前列增生的药效,并对其分子机制进行初探,从整体评价WE及EE抑制前列腺增生的作用。方法:1.化学成分定量分析:制备文冠果花提取物,分别用蒸馏水和乙醇2种溶剂提取,利用紫外可见光光度计（UV-Vis）测定WE及EE所含多糖与总黄酮。2.急性毒理试验:采用通用的急性毒理试验方法评价WE及EE的毒性情况,按不同梯度设计给药剂量预测LD50;并结合LD50数据推断测试出最大给药量。3.文冠果花水提取物及醇提取物对BPH动物模型的药效与初步分子机制研究:将66只12周龄雄性Wistar大鼠,采用皮下注射丙酸睾酮（TP）诱导大鼠BPH模型,连续4周应用前列腺指数及血清DHT评价模型。将造模成功的大鼠随机分为模型组（M）、阳性对照组（P,10mg/kg）、文冠果花水提物高剂量组（WEH,480mg/kg）、文冠果花水提物低剂量组（WEL,120mg/kg）、文冠果花乙醇提物高剂量组（EEH,550mg/kg）、文冠果花乙醇提物高剂量组（EEL,140mg/kg）,以正常大鼠为正常对照组（N）,每组8只。在1周造模后预防性给药,每天1次灌胃给药,连续28天。第29天注射水合氯醛麻醉各组老鼠,取血清和前列腺组织。检测指标如下:（1）给药期间记录体重变化趋势;（2）视觉对比各组前列腺组织,观察前列腺指数（PI）变化;（3）HE染色观察各组前列腺组织上皮和间质;（4）酶联免疫法（ELISA）测定血清及前列腺匀浆液DHT含量;（5）ELISA法测定前列腺匀浆液IL-6、IL-8、TNF-α等炎症因子;（6）ELISA法测定前列腺特异抗原（PSA）含量;（7）免疫组织化学（IHC）分析前列腺组织中VEGF-A及b FGF分布,并半定量预测其在各组中含量;（8）蛋白质免疫印迹法（WB）检测各组前列腺组织中增殖细胞核抗原（PCNA）的表达量。结果:1.紫外可见光光度计分析结果:WE及EE所含多糖在24.24～121.2μg之间有良好的线性关系（R2=0.9983）,所含总黄酮在14.54～87.24μg之间有良好的线性关系（R2=0.9996）;WE多糖含量为9.12%,总黄酮含量为4.30%;EE多糖含量为4.68%,总黄酮含量为5.67%。2.急性毒理试验结果显示:在最大浓度给药后未出现死亡现象,故无法给出LD50,通过最大耐受量测试发现最大给药量大于30g/kg,认为该剂量下WE和EE无明显毒性。***及EE对BHP大鼠的药效与分子机制初探结果如下:（1）体重随给药周期延长总体呈上升趋势,与N组相比,M组体重呈上升趋势,但体重变化无统计学意义（P>0.05）;与M组相比,各组也呈上升趋势,但第4周时P组、WEH组、WEL组和EEL组有下降趋势,其中EEL组有统计学意义（P<0.05）,其余各组无统计学意义（P>0.05）。（2）与N组相比TP可以显著升高M组大鼠前列腺指数,有显著性差异（P<0.01）,表明造模成功;与M组相比文冠果花各提取物组抑制了前列腺指数的升高且有显著性差异（P<0.01,P<0.05）。（3）与N组相比M组间质成分显著增多,腺泡体积增大,腺上皮细胞排序紊乱,结蹄组织增生明显;与M组相比,WEH和EEH组间质成分有所减小,腺上皮细胞排序紊乱的现象在不同程度上较为缓解,有少部分的腺泡排序密集现象。（4）与N组相比,M组血清和前列腺组织中的DHT均升高且有统计学意义（P<0.01）,此结果表明造模成功;与M组相比各提取物DHT含量降低且有统计学意义（P<0.01,P<0.05）。（5）与N组相比,M组IL-6、IL-8和TNF-α含量均有所升高且有统计学意义（P<0.01）;与M组相比,P组、EEH组和EEL组IL-6含量有下降趋势且有统计学意义（P<0.05）,其余各组无统计学意义（P>0.05）;与M组相比,WEL组、EEH组和EEL组IL-8含量明显下降,有统计学意义（P<0.01）,其余各组无统计学意义（P>0.05）;与M组相比,P组、WEH组和EEH组TNF-α含量下降趋势且有统计学意义（P<0.05）,其余各组无统计学意义（P>0.05）。（6）与N组相比,M组PSA含量高于N组,且有统计学意义（P<0.05）;与M组相比其余各组PSA有下降趋势,但无统计学意义（P>0.05）。（7）与N组相比,M组VEGF-A蛋白阳性表达量明显增加且差异具有统计学意义（P<0.01）;与M组相比,P组、WEH组、WEL组、EEH组和EEL组VEGF-A蛋白阳性表达量明显下降,均有统计学意义（P<0.05）。与N组相比,M组b FGF蛋白阳性表达

关键词： 良性前列腺增生   钬激光前列腺剜除术   经尿道前列腺等离子双极电切术  

摘要： 目的观察钬激光前列腺剜除术(HoLEP)与经尿道前列腺等离子双极电切术(TUPKP)治疗不同体积良性前列腺增生(BPH)患者的疗效及安全性。方法回顾性分析2017年1月至2019年1月重庆医科大学附属第一医院泌尿外科收治的239例BPH患者,其中147例行HoLEP(HoLEP组),92例行TUPKP(TUPKP组)。根据前列腺体积大小分别将以上两组患者再分别分为3个亚组(Group 1:<30 mL;Group 2:30～80mL;Group 3:>80 mL)。分别比较HoLEP组与TUPKP组相对应亚组之间的基本资料、围手术期资料及术后随访指标。结果HoLEP各亚组切除标本质量、组织剜除(切除)率明显高于TUPKP组(P<0.05),血红蛋白下降值、膀胱冲洗时间、导尿管留置时间、术后住院时间明显小于TUPKP组(P<0.05),HoLEP与TUPKP各亚组手术时间无明显差异(P>0.05);HoLEP组术后尿失禁发生率明显高于TUPKP组(P<0.05),两组输血率、尿道狭窄率、膀胱颈挛缩率无明显差异(P>0.05);术后随访国际前列腺症状评分(IPSS)、生活质量评分(QoL评分)、最大尿流率(Qmax)、排尿量、排尿时间、残余尿(PVR)各亚组间无统计学差异(P>0.05),术后随访6个月各亚组IPSS及QoL评分较术前明显降低(P<0.01)。结论HoLEP和TUPKP治疗各种体积大小的前列腺增生均安全有效,HoLEP较TUPKP出血更少、组织剜除更彻底、更利于患者快速康复。

关键词： 经尿道双极等离子前列腺剜除术   良性前列腺增生症   尿道功能   性功能  

摘要： 目的:讨论经尿道双极等离子前列腺剜除术对良性前列腺增生症患者尿道功能与性功能的影响.方法:现随机选取2017年8月-2018年3月就诊于我院的良性前列腺增生症患者64例作为研究对象,按照患者的入院时间将其分为实验组和对照组,每组样本数均为32例,实验组采取的治疗方法为经尿道前列腺电切术,对照组采取的治疗方法为经尿道双极等离子前列腺剜除术,对两组患者术后尿道功能与性功能情况进行对比和观察.结果:实验组患者的尿道功能与性功能恢复情况明显要优于对照组,且组间数据差异比较明显,存在统计学意义(P<0.05).结论:对于良性前列腺增生症患者来讲,应用经尿道双极等离子前列腺剜除术可有效提升患者的尿道功能与性功能,临床应用效果较好,值得推广和应用.

关键词： 整体护理   尿道前列腺电切术   老年良性前列腺增生   围术期  

摘要： 目的探讨分析整体护理在经尿道前列腺电切术治疗老年良性前列腺增生围术期的临床应用价值。方法从2018年2月～2019年3月于我院收治的老年良性前列腺增生患者病例中,选取90例作为研究对象,结合随机数字表法,分为实验组(45例)和对照组(45例),两组患者分别实施常规护理联合整体护理、常规护理,对两组患者的术中出血量和护理满意度等进行对比和分析。结果实验组患者的术中出血量明显低于对照组,对比差异显著(P<0.05);实验组的护理满意度为97.78%,对照组为86.67%,实验组的护理满意度明显高于对照组,对比差异显著(P<0.05)。结论通过整体护理的实施,对于经尿道前列腺电切术治疗老年良性前列腺增生患者具有很大的帮助,可以对患者的手术时间和住院时间进行控制,将术中出血量保持在可控范围内,并将患者护理满意度提升上来,其临床推广和应用价值显著。

关键词： 乳腺旋切微创术   乳腺良性肿瘤   瘢痕  

摘要： 目的观察乳腺旋切微创手术治疗乳腺良性肿瘤临床应用效果。方法选取2018年9月～2019年10月在我院诊治的48例乳腺良性肿瘤患者为研究对象,采用随机数字表法分为对照组和观察组,各24例。对照组采用常规开放手术治疗,观察组采用乳腺旋切微创手术治疗,比较两组临床治疗优良率、手术指标(手术时间、手术失血量、切口大小、愈合时间、住院费用)、手术瘢痕美观满意度、临床不良反应(切口感染、局部复发、血肿、乳腺畸形)发生情况。结果观察组优良率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组手术时间、手术失血量、切口大小、愈合时间均小于对照组,住院费用高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组手术瘢痕美观满意度为100.00%,高于对照组的83.33%,差异有统计学意义(P<0.05);观察组不良反应发生率为4.16%,低于对照组的16.67%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论乳腺旋切微创手术治疗乳腺良性肿瘤效果良好,手术时间短,对患者创伤小,术后恢复快,瘢痕美观满意度高,且临床不良反应少。

关键词： 聚合物胶束   雷公藤红素   小干扰RNA   HIF-1α   视网膜母细胞瘤  

摘要： 背景视网膜母细胞瘤（Retinoblastoma,RB）是婴幼儿常见的眼内恶性肿瘤,占所有儿童恶性肿瘤的3%,具有家族遗传倾向,可单眼、双眼或者同时发病。其临床表现复杂,可表现为瞳孔散大、白瞳症、斜视等。同时,视网膜母细胞瘤可造成眼底的改变,严重时向远处转移,危及生命。视网膜母细胞瘤的治疗方法包括:局部治疗（放疗、玻璃体内注射治疗、眼动脉介入治疗、冷冻、激光光凝等）、化学治疗、手术治疗和基因治疗等。在发达国家,早期诊断和综合治疗方法已经可能完全治愈视网膜母细胞瘤,但是仍对视力造成了严重的损害。而在发展中国家其治愈率依旧极低。目前治疗中常用的化疗药物存在着靶点单一、全身毒副作用大等缺点。基因药物中最常用的是小干扰RNA,然而小干扰RNA存在着易降解、不易被细胞内化吸收等缺点。由于上述治疗中存在的问题导致视网膜母细胞瘤的治疗效果欠佳,因此迫切需要寻找新的治疗策略。近年来,聚合物胶束作为一种新型的纳米载体被广泛用于肿瘤的治疗中。聚合物纳米载体可以用来负载化疗药物和基因药物,以提高药物在肿瘤部位的富集程度,达到实现肿瘤靶向治疗的效果,并降低对正常组织或细胞的毒副作用。目的探讨聚合物纳米胶束联合传输化疗药物和基因药物作用视网膜母细胞瘤细胞,观察药物对视网膜母细胞瘤细胞的协同抑制作用,研究药物对肿瘤血管生成的作用机制。方法先前研究中我们已经合成了一种新型的阳离子三嵌段共聚物,聚（乙二醇）-聚（ε-己内酯）-g-聚乙烯亚胺（PEG-PCL-g-PEI,缩写为PCI）,制备负载雷公藤红素和siRNA的聚合物,Nano-ZSE电位及粒度测定仪检测电位和粒径变化;琼脂糖电泳凝胶试验检测聚合物对核酸的复合能力;采用细胞摄取实验检测聚合物高效的生物利用度;CCK8法检测人Y79细胞和人***926细胞增殖;采用划痕实验、侵袭实验检测***926细胞迁移和侵袭能力;并通过蛋白免疫印迹法Western blot检测HIF-1α及HIF-1α/VEGF/VEGFR通路相关分子表达的变化。结果本研究中通过使用聚合物纳米胶束联合传输雷公藤红素和HIF-1αsiRNA调控HIF-1α/VEGF抑制人视网膜母细胞瘤细胞血管生成,达到协同抑制肿瘤细胞的效果。先前的研究中已证实制备的正离子纳米胶束呈球形,大小均一、平均粒径为24 nm,表面电位为+8.5 m V,药物释放实验检测发现雷公藤红素早期的释放呈暴释,后期呈缓慢释放,并且随着p H降低释放速率加快。琼脂糖电泳凝胶结果表明该胶束可以有效负载带负电的siRNA,同时发现随着二者氮磷比的增加,聚合物胶束能完全包裹siRNA;细胞摄取结果表明负载雷公藤红素的聚合物胶束可以高效地进入到人视网膜母细胞瘤细胞（Y79细胞）并且从胞浆中快速释放出雷公藤红素达到抗肿瘤的效果;CCK8细胞增殖实验检测人Y79细胞和人***926细胞增殖,结果表明负载雷公藤红素的聚合物胶束降低了Y79细胞的活力,抑制了Y79细胞的增殖,而空白胶束则对Y79细胞的增殖没有影响,表明聚合物胶束本身是对细胞无毒性作用的;而在人Y79细胞和人***926细胞共培养体系中,结果显示现用雷公藤红素预处理Y79细胞后,Y79细胞对***926细胞有抑制作用,能抑制血管内皮细胞的增殖;Western blot检测通过联合传输雷公藤红素和HIF-1αsiRNA作用Y79细胞,结果显示Y79细胞中HIF-1α、VEGFA的表达都降低,尤其二者协同作用HIF-1α表达下调更显著;划痕实验、侵袭实验结果显示,共培养Y79细胞和***926细胞,发现Y79细胞对血管内皮细胞有抑制作用,能抑制血管内皮细胞的迁移、侵袭;同时Western blot结果表明,雷公藤红素预处理Y79细胞,肿瘤细胞能下调血管内皮细胞生长因子受体（VEGFR1和VEGFR2）的表达;同时发现雷公藤红素也能下调VEGFR1和VEGFR2受体的表达。结论1、聚合物胶束载体可将雷公藤红素和HIF-1αsiRNA共同传输至肿瘤细胞,并能有效抑制Y79细胞HIF-1α和VEGFA表达。2、雷公藤红素不仅直接抑制肿瘤细胞增殖,同时还可以通过调节肿瘤细胞抑制血管内皮细胞的增殖、迁移和侵袭。3、雷公藤红素不仅可以直接下调血管内皮细胞生长因子受体的表达,还可以通过作用肿瘤细胞下调血管内皮细胞生长因子受体的表达。4、雷公藤红素对肿瘤血管生成的抑制作用可能是通过HIF-1α/VEGF/VEGFR通道发挥作用的。5、本研究为化疗药物和基因药物联合治疗视网膜母细胞瘤提供了依据。

关键词： 良性前列腺增生症   动物模型   凋亡   α1肾上腺素受体   B淋巴瘤Mo-mLV插入区1同源  

摘要： 研究背景:良性前列腺增生症(benign prostatic hyperplasia,BPH)是一种常见的男性泌尿性疾病,多发生于中老年人,其发病率随年龄的增长而增加,50至80岁发病率高达80%,80岁以后几乎达到90%以上。病情严重时,甚至会出现一系列的下尿路症状(lower urinary tract symptoms,LUTS),这些症状可以进一步分类为阻塞性排尿或膀胱储存障碍症状,阻塞性排尿症状包括尿犹豫、早期排尿延迟、间歇性、排尿不自主中断、尿流微弱、排尿乏力、排空不完全、终尿。储存障碍症状包括尿频、夜尿、尿急、尿失禁、膀胱疼痛或排尿困难,给患者的生活质量带来严重的影响。药物治疗为BPH的第一线疗法,临床资料显示许多患者都是终身依靠药物缓解症状。国内外用于治疗良性前列腺增生的药物主要有α1受体拮抗剂、5α-还原酶抑制剂、植物制剂3种。其中,α1-肾上腺素受体(α1-AR)阻断剂是目前治疗前列腺增生症的一线用药。它通过阻断分布在前列腺和膀胱颈平滑肌表面的α1受体,消除动力学因素所致的平滑肌收缩与紧张,解除膀胱出口梗阻和缓解下尿路刺激症状,疗效好、作用快。α1受体包含α1A、α1B、α1D三种亚型。研究表明,单纯使用α1A亚型拮抗剂如哌唑嗪、特拉唑嗪、阿夫唑嗪,不能有效改善下尿路症状(LUTS),而拮抗α1D亚型对逼尿肌功能失调的刺激性和灌注性排泄症状有改善作用进而缓解BPH症状,正好弥补了 α1A亚型拮抗剂药物具有高选择性的不足。此外,α1受体拮抗剂不仅对泌尿系统产生作用,缓解BPH症状,还会作用于心血管和中枢神经系统(CNS和CVS)中的α1B受体亚型,产生体位性低血压、疲惫、困倦及性功能障碍等心血管副作用。因此,开发具有高尿路选择性的α1A/1D亚型选择性拮抗剂,已成为研发高效低副作用BPH药物的研究热点。研究目的:萘哌地尔(NAF)是临床上唯一的α1A/1D选择性的受体拮抗剂,主要阻断α1D亚型,广泛用于治疗BPH及其引起的下尿路症状。在前期工作中,本人所在课题组以上市药物萘哌地尔(NAF)为先导物,设计、合成了 100余个芳基哌嗪类衍生物,通过体外组织活性实验,筛选出两个对α1A、α1D有较高阻断活性及亚型选择性的新型酰胺类化合物HJZ-3及HJZ-12:对α1A的pA2分别为8.10±0.14和8.13±0.01,对α1D的pA2分别为8.28±0.09和8.56±0.06,而对α1B的pA2分别为6.29±0.03和6.85±0.01;这两个化合物对α1D、α1A亚型的选择性分别提高到了 97.7和64.6倍,47.9和19.1倍,但尚未进行体内实验研究。另外,在预实验中我们发现,HJZ-12对人前列腺上皮增生细胞(BPH-1)有显著的细胞毒活性,可以诱导细胞凋亡,但对细胞周期并没有影响;而HJZ-3对细胞无作用,这可能与它们自身的化学结构不同有关联。因此本论文中,首先通过激素联用法诱导大鼠良性前列腺增生模型,对HJZ-3和HJZ-12的体内抗BPH作用进行研究;其次对HJZ-12在体外模型中对人前列腺上皮增生细胞(BPH-1)促凋亡作用机制进行探讨,并初步分析了HJZ-12对BPH-1细胞的影响与α1-AR之间的关联性。本论文通过对这两种化合物抑制BPH的体内外实验研究,希望能够初步明确其作用机制,寻找出新的作用靶标,为进一步针对性的合理设计、合成药物分子以及深入了解BPH疾病提供科学依据。内容和方法***-3和HJZ-12与BPH病理模型前列腺湿重指数、体积指数以及组织病理形态变化的相关性研究。(1)建立应用激素联合诱导SD大鼠良性前列腺增生的模型,设立假手术组和模型组灌予生理盐水作对照,通过该模型考察α1受体拮抗剂HJZ-3和HJZ-12的体内作用,连续灌胃给予阳性对照药物萘哌地尔(NAF)(10 mg/kg),HJZ-3(1 mg/kg、3 mg/kg、10 mg/kg)和 HJZ-12(1 mg/kg、3 mg/kg、10 mg/kg)。4周后,处死动物,称量各组大鼠前列腺组织湿重、测量体积以及计算指数。(2)各组大鼠的前列腺腹侧叶取一半制成病理切片,进行HE染色以观察组织形态变化、进行免疫组化定量以考察α-平滑肌动蛋白(α-SMA)阳性细胞层厚度的变化,采用Image Pro Plus 6.0图像分析系统进行组织形态计量分析。余下各叶储存于-80℃,Western blot检测各实验组对组织增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白、凋亡蛋白以及α1A、α1D受体等的表达变化。2.研究HJZ-12对体外模型人前列腺上皮增生细胞(BPH-1)促凋亡作用的机制,初步探讨HJZ-12对BPH-1细胞的影响与α1-AR之间的相关性.(1)细胞活力检测:采用CCK8法检测HJZ-12对BPH-1细胞活力的影响;

关键词： 视网膜母细胞瘤   miR-4516   凋亡   PTEN   AKT通路  

摘要： 研究背景视网膜母细胞瘤（retinoblastoma,RB）是儿童眼内最常见的恶性肿瘤,好发于5岁以下婴幼儿,新生儿发病率为1∶16 000～18 000。在我国,每年约有1100名新发病儿童。RB患儿最常见的临床症状是白瞳、斜视,早期常无自觉症状而就诊延迟,我国大多数患儿就诊时肿瘤已发展到D期、E期甚至眼外期,错过了最佳治疗时机,给患儿及其家庭造成了巨大的伤害,对社会产生了巨大的经济负担。目前认为视网膜母细胞瘤的发生与Rb1等位基因的二次突变有关,但研究发现Rb1基因的失活只是导致视网膜母细胞瘤发生发展的冰山一角,越来越多的证据表明其他基因（如MYCN癌基因突变）以及表观遗传学的改变----非编码RNA,为RB的发生发展所必需。MicroRNAs（miRNAs）是一组内源性、非编码短链RNA,通过与靶基因mRNA的3’UTR相互作用,抑制靶基因的翻译,在人类肿瘤的发生发展中发挥类似原癌基因或抑癌基因的作用。已经发现miRNA在多种肿瘤诊断中具有较高的敏感性和特异性,在研究视网膜母细胞瘤分子机制中具有重要意义。我们采用基因芯片筛选技术动态观察RB患者在静脉VEC方案化疗前、化疗1个疗程及化疗3个疗程后血清中miRNA的变化情况,发现miR-4516在治疗后表达下调,提示miR-4516可能与RB的发生发展有关。研究发现miR-4516在甲状腺乳头状癌、小细胞肺癌、肝癌、前列腺癌和急性髓系白血病中表达异常,在恶性胶质瘤患者中miR-4516代表负向预后因子,通过调控PTPN14/Hippo通路起类似致癌基因的作用,miR-4516可能成为恶性胶质瘤治疗的一个新的潜在治疗靶点。研究表明miR-4516与肿瘤的发生发展存在密切联系,但目前关于miR-4516在RB中的作用尚未见报道。研究目的:本研究拟通过肿瘤组织及细胞进行相关的基础实验,探讨miR-4516对视网膜母细胞瘤生长的影响及作用机制。基础实验第一部分研究miR-4516在视网膜母细胞瘤组织及Y79细胞中的表达,观察miR-4516对Y79细胞增殖及凋亡的影响;第二部分通过生物信息学软件预测miR-4516的靶基因,并验证其与靶基因的结合情况;第三部分重点探讨miR-4516对靶基因的调控作用,以及对其下游信号通路的影响。研究方法:1、qRT-PCR检测miR-4516在RB肿瘤组织和RB细胞（Y79）中的表达。2、CCK-8细胞增殖实验、流式细胞术、Hoechst细胞染色实验检测miR-4516对Y79细胞生长活性及凋亡的影响,Western blot检测miR-4516对Y79细胞中凋亡相关蛋白P53及Bcl2表达的影响。3、Targetscan、miRWalk、miRanda生物信息学方法预测miR-4516的下游潜在靶基因,并用双荧光素酶报告基因实验验证miR-4516与下游靶基因的结合情况。4、qRT-PCR及Western blot检测miR-4516对Y79细胞PTEN基因mRNA及蛋白表达的影响。5、CCK-8细胞增殖实验、流式细胞术及Hoechst细胞染色检测miR-4516通过靶基因PTEN对Y79细胞增殖及凋亡的影响。6、Western blot检测Y79细胞中miR-4516对PTEN/AKT信号通路中关键蛋白表达的影响:PTEN、AKT、pAKT、MDM2、P53、Bcl2。结果:1、miR-4516在RB肿瘤组织中的表达水平高于正常视网膜组织（P＜0.05）;miR-4516在Y79细胞中表达水平高于正常对照（P＜0.01）。2、抑制miR-4516,Y79细胞生长受抑制,细胞凋亡增加,P53蛋白表达增加,Bcl2蛋白表达减少;过表达miR-4516促进Y79细胞的生长,细胞凋亡减少,P53蛋白表达减少,Bcl2蛋白表达增加。3、生物信息学预测PTEN是miR-4516潜在下游靶基因,双荧光素酶报告基因实验证实miR-4516与PTEN mRNA的3’UTR（第908到915碱基）互补配对结合。4、miR-4516 mimics转染Y79细胞后,PTEN基因mRNA及蛋白的表达受抑制。5、miR-4516 inhibitor+si-PTEN共转染可以逆转miR-4516 inhibitor对Y79细胞增殖的抑制作用,miR-4516 mimics+pcDNA-PTEN共转染可以逆转miR-4516 mimics对Y79细胞增殖的促进作用。6、miR-4516 inhibitor+si-PTEN共转染可以逆转miR-4516 inhibitor对Y79细胞凋亡的促进作用,miR-4516 mimics+pcDNA-PTEN共转染可以逆转miR-4516 mimics对Y79细胞凋亡的抑制作用。7、转染miR-4516 mimics后,Y79细胞PT