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关键词： 视网膜母细胞瘤   CIZ1   增殖   凋亡   MEK-ERK1-2信号通路  

摘要： 目的探讨锌指蛋白(CIZ)1基因影响视网膜母细胞瘤(RB)细胞增殖和凋亡的机制。方法RB组织芯片购自西安艾丽娜生物科技有限公司,人神经母细胞瘤细胞系Y79购自美国ATCC公司。应用免疫组化方法检测CIZ1基因在RB肿瘤组织和正常视网膜组织中的表达情况;应用荧光定量聚合酶链式反应(PCR)和Western blot方法检测CIZ1基因在RB细胞中信使核糖核酸(mRNA)和蛋白的表达水平。选取RB细胞系Y79细胞,采用数字表法随机分为对照组、干扰CIZ1基因组(shCIZ1)-1及shCIZ1-2等3组。采用不同的慢病毒分别感染阴性对照组和两组shCIZ1基因组细胞。应用荧光定量PCR及Western blot方法检测敲低效率;应用细胞增殖测量试剂盒(CCK8)方法检测细胞的生长、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)3-7的活性和细胞凋亡相关蛋白表达的情况;通过Western blot方法检测丝裂原活化蛋白激酶激酶(MEK)-细胞外调节蛋白激酶(ERK)1-2信号通路相关蛋白的表达变化。CIZ1的基因表达量、蛋白表达水平、RB细胞的增殖倍数、Caspase3-7、MEK、p-MEK、ERK及p-ERK蛋白的表达水平,采用单样本K-S拟合优度法进行正态性检验,符合正态分布者以均数±标准差进行描述。多组样本间不同组间均数的比较采用重复测量资料的方差分析,采用LSD检验进行两两比较。结果与正常视网膜组织相比,CIZ1基因在RB肿瘤组织中的表达水平显著上调;在RB细胞中,CIZ1基因mRNA水平及蛋白水平均显著高于正常人视网膜色素上皮细胞(ARPE),Y79细胞、人神经母细胞瘤细胞系(WERI-Rb)-1细胞中mRNA相对表达量分别为(0.061±0.001)、(0.041±0.001),与ARPE19细胞中mRNA相对表达量(0.025±0.001)相比,差异均具有统计学意义(t=41.58,18.68;P<0.05);慢病毒干扰CIZ1基因的表达可以显著降低CIZ1的mRNA与蛋白表达水平,shCIZ1-1组和shCIZ1-2 CIZ1组mRNA的相对表达量分别为(0.015±0.008)和(0.008±0.003),与对照组mRNA的相对表达量(0.032±0.003)相比,差异均具有统计学意义(t=3.72,5.357;P<0.05);敲低CIZ1基因可以显著抑制RB细胞的增殖,也可以抑制增殖相关基因即细胞周期蛋白(Cyclin)D1蛋白的表达,与对照组相比差异有统计学意义(t=21.18,21.80;P<0.05);同时还可以抑制增殖相关基因Cyclin E1蛋白的表达,与对照组相比差异有统计学意义(t=17.26,16.41;P<0.05)。敲低CIZ1可以显著增强细胞凋亡相关蛋白Caspase3-7的活性,上调Caspase-3和Caspase-7蛋白的表达。Western blot检测敲低CIZ1基因对MEK-ERK1-2信号通路影响的结果显示,CIZ1下调可以显著抑制磷酸化的MEK的表达水平,与对照组相比差异具有统计学意义(t=3.925,8.461;P<0.05);CIZ1下调可抑制ERK1-2蛋白的磷酸化水平,与对照组相比差异具有统计学意义(t=14.12,28.36;P<0.05)。结论敲低CIZ1基因可以通过抑制MEK-ERK1-2信号通路抑制RB的生长。

关键词： 良性前列腺增生   经尿道柱状水囊前列腺扩开术   临床经验  

摘要： 目的总结经尿道柱状水囊前列腺扩开术(TUCBDP)治疗良性前列腺增生(BPH)的临床应用经验。方法回顾性分析2015年6月至2018年6月湖北省中医院收治的379例BPH患者的临床资料。年龄(71.3±14.5)岁。病程1个月至36年。前列腺体积(47.4±2.1)ml。术前最大尿流率(Qmax)(9±4)ml/s,残余尿量(PVR)(123.1±72.4)ml,国际前列腺症状评分(IPSS)(21±6)分,生活质量评分(QOL)(5±1)分。32例术前有性生活者国际勃起功能指数问卷表(IIEF-5)评分(15±4)分。379例均行TUCBDP,以2016年6月导管结构改进定型时间为界,将患者分为早期阶段(2015年6月至2016年5月)121例和近期阶段(2016年6月至2018年6月)258例。早期阶段手术原则是扩裂导管内囊扩张膜部尿道,外囊扩张前列腺部尿道和膀胱颈,术毕分次放水减压。主要手术步骤包括插入扩裂导管,于阴囊根部皮肤触及水囊定位突,内外囊注水,内外囊首次放水减压,扩裂导管接水持续冲洗,内外囊再次分次放水减压,拔出扩裂导管并更换普通尿管持续冲洗。近期阶段手术原则是导管内囊仅起定位固定作用,外囊全程扩张膜部尿道、前列腺部尿道和膀胱颈,术毕内、外囊一次性放水减压,术前、术毕常规应用电切镜检查。主要手术步骤包括先行电切镜检查膀胱及尿道,术者示指经直肠引导扩裂导管进入膀胱,于前列腺尖部扪及定位突后,内囊注水定位,内囊补水及外囊注水,内外囊一次性放水减压,拔出扩裂导管行排尿试验,电切镜观察腺体扩开情况,更换普通导尿管持续冲洗等。观察患者术后1、3、6、12、24个月的Qmax、PVR、IPSS、QOL变化情况;比较两阶段患者并发症以及国际尿失禁咨询委员会尿失禁问卷表简表(ICI-Q-SF)评分差异。对于术前有性生活者,记录IIEF-5评分变化情况。结果本组379例术中及术后均无死亡。手术时间(18.5±6.7)min。术后1、3、6、12、24个月随访例数分别为326、253、201、194、181例。术后1、3、6、12、24个月Qmax分别为(17±9)ml/s、(15±2)ml/s、(12±4)ml/s、(13±6)ml/s、(13±4)ml/s;PVR分别为(17.4±11.6)ml、(20.6±9.8)ml、(25.4±13.1)ml、(31.5±11.5)ml、(29.1±12.4)ml;IPSS分别为(7±5)分、(4±4)分、(4±4)分、(6±5)分、(4±4)分;QOL均为(2±1)分;与术前比较差异均有统计学意义(P<0.05)。32例术前有性生活者,术后IIEF-5评分(17±6)分,与术前比较差异无统计学意义(P>0.05);2例出现短暂性逆行射精,术后6个月内自行缓解。近期阶段组发生假性尿失禁4例(1.5%),较早期阶段组[6例(4.9%)]差异无统计学意义(P>0.05);近期阶段组发生大出血1例(0.4%),较早期阶段组[6例(4.9%)]差异有统计学意义(P<0.05);近期阶段组术后发生急性尿潴留2例(0.7%),较早期阶段组[15例(12.4%)]差异有统计学意义(P<0.05)。结论TUCBDP治疗BPH整体疗效肯定、安全性较高。近期阶段并发症除假性尿失禁外,均明显低于早期阶段,与导管结构改进、临床经验积累等有关。

关键词： 靶向治疗   眼内恶性肿瘤   葡萄膜恶性黑色素瘤   视网膜母细胞瘤   原发性玻璃体视网膜淋巴瘤  

摘要： 随着精准医学的发展,靶向治疗作为一种新型生物治疗手段,越来越成为研究的热点。本文就葡萄膜恶性黑色素瘤(uveal malignant melanoma,UM)、视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,RB)和原发性玻璃体视网膜淋巴瘤(primary vitreoretinal lymphoma,PVRL)基因靶向治疗的研究进展进行综述。针对UM患者,GNAQ/GNA11基因的突变率超过90%,GαQ和Gα11蛋白抑制剂FR900359或其衍生物可能是一种潜在的治疗选择。蛋白激酶C和ERK激酶抑制剂联合治疗可能改善转移性UM患者的治疗反应。针对Yes相关蛋白的靶向治疗策略可能是未来治疗UM的有效手段。Nutlin-3a是MDM2-p53相互作用的小分子抑制剂,它在高浓度时可杀死视网膜母细胞株。SYK抑制剂是开发中的RB治疗潜在靶点。沉默CKS1B基因可以抑制RB细胞的生长和侵袭。伊布替尼可能预防或延迟CD79B阳性PVRL患者中枢神经系统受累。

关键词： 冠状病毒   肺损伤   生物信息学   药物重定位  

摘要： 目的分析严重急性呼吸综合征冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus,SARS-CoV)感染所致急性肺损伤的机制及潜在干预药物,为治疗新型冠状病毒肺炎(COVID-19)提供参考。方法使用基因表达数据库(Gene Expression Ominibus,GEO)筛选SARS-CoV转录组数据,使用R语言包对数据进行差异表达分析及京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)和基因本体学(Gene Ontology,GO)富集分析。使用STRING在线分析网站进行蛋白质互作网络分析,筛选出关键基因。再应用表观精准治疗预测平台(Epigenomic Precision Medicine Prediction Platform,EpiMed)对关键基因进行多组学关联分析和潜在治疗药物预测。结果选择SARS-CoV全基因组表达谱数据,共筛选出差异基因3606个,其中上调2148个,下调1458个。GO富集主要与病毒感染、白细胞迁移与粘附、急性炎症反应和胶原蛋白分泌等有关。KEGG富集主要与信号转导、急性炎症、免疫反应等有关。蛋白互作网络分析筛选得到PTPRC、TIMP1、ICAM1和IL1B等10个肺损伤相关的关键基因。EpiMed平台预测出白头翁、虎杖、TNF-α抑制剂、泛昔洛韦、氟伐他汀等药物具有潜在治疗作用。结论SARS-CoV感染可通过激活一系列炎症相关分子引发肺损伤,可能有效的治疗药物包括白头翁、虎杖、TNF-α抑制剂、泛昔洛韦和氟伐他汀。

关键词： 环状RNA   CircAKT3   视网膜母细胞瘤细胞   细胞增殖   细胞凋亡   SO-Rb50  

摘要： 目的:探讨CircAKT3对视网膜母细胞瘤细胞SO-Rb50增殖和凋亡的作用及生物学行为的影响。方法:采用qRT-PCR检测视网膜母细胞瘤细胞系SO-Rb50和视网膜上皮细胞细胞系ARPE-19中CircAKT3的表达水平。后续将SO-Rb50细胞分为两组,实验组细胞转染CircAKT3 SiRNA,而对照组转染SiRNA对照序列。采用qRT-PCR检测细胞的转染效率,采用CCK-8实验检测两组细胞的增殖能力,采用流式细胞仪检测两组细胞的凋亡率。结果:相较于ARPE-19细胞,SO-Rb50细胞内CircAKT3的表达水平明显增高(P<0.01)。实验组在转染CircAKT3 SiRNA 24 h后,细胞内CircAKT3的表达水平较对照组明显降低(P<0.05)。CCK-8实验结果显示,实验组在24、48 h的OD值和对照组无统计学差异,而在72、96 h的OD值明显低于对照组(P<0.05)。流式细胞仪结果显示,实验组和对照组的凋亡率分别为(7.71±0.396)%和(3.51±0.478)%,实验组凋亡率明显高于对照组(P<0.001)。结论:CircAKT3可促进SO-Rb50细胞的增殖和抑制细胞凋亡。

关键词： 冠状病毒   严重急性呼吸综合征   新型冠状病毒肺炎  

摘要： 21世纪以来全球曾暴发多种流行性疾病,给世界多个国家的人力、物力、财力造成巨大的损失。本文通过分析国内外文献,对新型冠状病毒肺炎(COVID-19)与严重急性呼吸综合征(SARS)在流行病学、临床症状和影像学特征方面进行系统分析比较,总结两者在临床表现的异同,为全球医务人员科学做好疫情防控提供参考。

关键词： CT值   肝癌   肝细胞   肝脏   局灶性结节增生  

摘要： 目的探索CT增强扫描动脉期、门脉期及延迟期病灶的CT值与平扫病灶CT值的比值(CVR)对鉴别小肝细胞肝癌(SHCC)和肝局灶性结节增生(SFNH)的意义。方法收集2015年1月至2017年11月浙江大学医学院附属杭州市第一人民医院SHCC患者108例共111枚病灶、SFNH 33例患者共36枚病灶。所有患者均行平扫、动脉期、门脉期及延迟期CT增强扫描,SHCC和SFNH为病理和(或)临床证实。分别测量平扫(LCV)、动脉期(LCVA)、门脉期(LCVP)及延迟期(LCVD)病灶CT值,并计算各期CT值比值(CVR=LCVA/LCV、LCVP/LCV、LCVD/LCV)。通过Wilcoxon秩和检验及ROC曲线对各期CVR进行分析。结果在33例36枚SFNH和108例111枚SHCC病灶中,两组的中位年龄及男女性别比差异有统计学意义,病灶大小无统计学意义。动脉期、门脉期及延迟期的CVR分别为5.21(4.53~6.01)比4.46(3.92~5.11)(Z=-3.410,P=0.001),4.46(4.03~5.01)比3.93(3.44~4.53)(Z=-2.892,P=0.004),3.87(3.43~4.35)比3.42(3.05~3.82)(Z=-3.270,P=0.001)。当三期CVR分别为4.79、4.20和3.71时获得最大约登指数,分别为0.379、0.389和0.406,相应的灵敏度及特异度分别为0.694和0.685、0.722和0.667、0.694和0.712。结论中老年男性患者,当动脉期CVR≤4.79、门脉期CVR≤4.20、延迟期CVR≤3.71时对诊断SHCC有提示意义。

关键词： 严重急性呼吸综合征(SARS)   中东呼吸综合征(MERS)   证据  

摘要： 为控制2019冠状病毒病(COVID-19)流行提供可借鉴的证据,对PubMed、Embase、Cochrane图书馆、中国期刊全文数据库、中国生物医学文献数据库和万方医学数据库进行了检索,得到发表于2003-01/2019-12的20篇防治严重急性呼吸综合征(SARS)和中东呼吸综合征(MERS)的系统评价、Meta分析及相关综述。对此类证据的分析表明,已有了一些防治SARS和MERS的科学证据,包括病原体诊断(实时PCR检测)、医务人员个体防护(防护设备及操作程序指南)、临床治疗方法(恢复期血浆治疗)及治疗重点群体(慢性疾病患者),但疫苗及药物方面的证据还很少。现有证据提示,今后对COVID-19研究的重点可包括疫苗开发、降低病理性免疫反应、抗病毒药物效果及安全性研究、中和病毒的血清抗体研究。

关键词： 乳腺良性肿瘤   合并糖尿病   延续性护理   应用价值  

摘要： 分析探讨给予乳腺良性肿瘤并糖尿病患者临床护理中行延续性护理干预措施,对其临床疗效的影响及应用价值。方法:选取的106例临床资料为本院2019年的7月至2020年6月期间收诊乳腺良性肿瘤并糖尿病患者,将其均分为参照护理组(n=53)与延续护理组(n=53)。参照护理组患者仅在院内接受优质护理组干预,而出院后则不再接受护理干预,而延续护理组患者不仅在院内接受优质护理组干预,而且出院后仍接受延续性护理干预措施。结果:经回顾分析,两组患者就血糖控制率、生活治疗评分、知识掌握率等指标对比,参照护理组均明显差于延续护理组,组间各指标对比P<0.05,存在有统计学差异。结论:给予乳腺良性肿瘤并糖尿病患者临床护理中行延续性护理干预措施,获得良好的临床疗效,该护理更利于有效控制患者血糖水平,提高患者自我护理能力,确保患者出院后治疗效果,临床可以有效应用与积极推广。

关键词： 瑞巴派特   三联疗法   胃十二指肠溃疡急性穿孔   幽门螺杆菌  

摘要： 目的:探讨瑞巴派特联合三联疗法在幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)阳性胃十二指肠溃疡急性穿孔保守治疗中的应用。方法:选取2015年10月至2019年12月德阳市人民医院收治住院的Hp阳性胃十二指肠溃疡急性穿孔患者105例,采用随机数字表法将患者分为研究组(n=55)和对照组(n=50)。两组患者均进行保守治疗,对照组患者在此基础上采用三联疗法,研究组患者在对照组的基础上给予瑞巴派特治疗。观察两组患者的临床疗效、住院情况、Hp根除情况及溃疡愈合情况,治疗前后血清炎症因子[肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)]和胃肠激素[胃泌素(Gas)、胃蛋白酶原Ⅰ(PGⅠ)和胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)]水平,记录并比较研究期间两组患者不良反应发生情况的差异。结果:研究组患者的总有效率为94.55%(52/55),明显高于对照组的82.00%(41/50),差异有统计学意义(P<0.05)。研究组患者临床症状缓解时间、胃肠减压时间和住院时间明显短于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。研究组患者的Hp根除率为90.91%(50/55),明显高于对照组的76.00%(38/50);研究组患者溃疡愈合率为87.27%(48/55),明显高于对照组的68.00%(34/50),差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组患者血清TNF-α和IL-6水平明显低于治疗前,且研究组患者明显低于对照组;治疗后,两组患者Gas、PGⅠ和PGⅡ水平明显高于治疗前,且研究组患者明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。研究组、对照组患者不良反应发生率分别为9.09%(5/55)、12.00%(6/50),差异无统计学意义(P>0.05)。结论:瑞巴派特联合三联疗法可有效减轻进行保守治疗的Hp阳性胃十二指肠溃疡急性穿孔患者的炎症反应,改善胃肠功能,促进溃疡面愈合,提高Hp根除率,缩短临床症状缓解时间、胃肠减压时间和住院时间,疗效确切,具有一定的临床应用价值。