教学课程资源库 更多>>

关键词： 前列腺癌   集成MRI   良性前列腺增生   Gleason评分   表观扩散系数  

摘要： 目的探讨集成磁共振成像(MRI)弛豫时间定量技术结合扩散加权成像在前列腺癌诊断及侵袭性评估中的应用价值。方法回顾性搜集2020年3月至2021年3月宁夏医科大学总医院行前列腺MRI常规序列和磁共振图像编译(MAGi C)序列扫描的前列腺疾病患者119例[共122个感兴趣区(ROI)],依据病理结果分为前列腺癌组(58例,61个ROI)和非癌组(61例,61个ROI)。前列腺癌组年龄48～85(69.84±5.90)岁,依据发生部位分为外周带癌组(43例,45个ROI)和中央腺体癌组(15例,16个ROI)。非癌组为良性前列腺增生或合并慢性前列腺炎患者,年龄41～81(68.62±7.00)岁,依据发生部位分为外周带非癌组(45例,45个ROI)和中央腺体良性前列腺增生组(16例,16个ROI)。前列腺癌病灶分为低危(GS≤6分)和中/高危(GS≥7分)。前列腺癌组和非癌组MAGi C图像经过后处理后得到T1、T2、质子密度(PD)值,同时用相关软件进行后处理生成表观扩散系数(ADC)值,并采用独立样本t检验或Mann–Whitney U检验分析两组间数据的比较,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析各定量参数诊断前列腺癌和鉴别低危、中高危前列腺癌的诊断效能,采用Spearman相关分析评估各定量参数与Gleason评分的相关性。结果外周带癌组的T1值、T2值和ADC值均低于外周带非癌组[1201.33(1103.50,1298.20)ms比2274.00(1620.92,2776.50)ms;78.00(74.00,83.75)ms比(160.58±54.90)ms;0.79(0.69,0.86)×10mm/s比(1.67±0.37)×10mm/s](均P<0.001),两组PD值差异无统计学意义(P>0.05)。中央腺体癌组的T1值、T2值和ADC值均低于中央腺体良性前列腺增生组[1073.25(1003.92,1164.94)ms比1340.75(1208.50,1502.75)ms;76.88(74.81,82.83)ms比95.13(82.75,103.44)ms;0.91(0.79,0.96)×10mm/s比1.33(1.22,1.47)×10mm/s](均P<0.001),两组PD值差异无统计学意义(P>0.05)。区分外周带癌组与外周带非癌组时,T2值显示出与ADC值相似的曲线下面积(AUC)(0.963比0.991,P>0.05),而区分中央腺体癌组与中央腺体良性前列腺增生组时,T2值、T1值与ADC值的AUC均相似(0.867、0.930比0.938,两两之间均P>0.05)。ADC值、T2值均与Gleason评分呈负相关(r=-0.747、r=-0.453,均P<0.001)。中高危前列腺癌的T2值和ADC值均低于低危前列腺癌[77.20(73.50,80.80)ms比84.00(78.33,89.36)ms;0.79(0.70,0.86)×10mm/s比0.97(0.94,1.01)×10mm/s](均P<0.001),T2值和ADC值在区分低危和中高危前列腺癌时的诊断效能相当,差异无统计学意义(AUC:0.787比0.943,P>0.05)。结论集成MRI获得的定量T1和T2值能够鉴别前列腺癌和其他良性病变,T2值与ADC值诊断效能相当。集成MRI具有较高的临床应用价值,T2值能够区分低危与中高危前列腺癌。

关键词： 乳晕缘切口   乳腺   良性肿瘤  

摘要： 目的：探究乳晕缘切口治疗乳腺良性肿瘤的效果。方法：选择2020年9月～2021年9月在本院接受治疗的70例患者为研究对象，按照不同的治疗方式划分。对照组运用放射性切口切除术治疗，观察组以乳晕缘切口进行治疗。对比两组患者的手术指标、切口愈合等级、乳房美观程度、并发症发生率。结果：在各项手术指标对比中，观察组明显优于对照组。观察组切口愈合甲级占比高于对照组。在切口疤痕等乳房美观度对比中，均为观察组更高。观察组不良反应发生率低，与对照组存在明显差异。结论：对于乳腺良性肿瘤患者，通过乳晕缘切口治疗能够产生良好治疗效果，也具有美观性，安全性高，值得推广。

关键词： 良性前列腺增生   下尿路症状   排尿姿势   尿流率   排尿后残余尿量  

摘要： 研究背景及目的:良性前列腺增生（Benign Prostatic Hyperplasia,BPH）是目前全球范围内中老年男性最常见的泌尿系统疾病,其引起的包括尿频、尿急、排尿困难等在内的下尿路症状（Lower Urinary Tract Symptoms,LUTS）严重影响了中老年患者的生活质量。尿流率检查及排尿后膀胱残余尿量（Bladder Post Void Residual Volume,PVR）测定是目前BPH患者最常用的检查方式。本次研究的主要目的在于分析不同排尿姿势对BPH患者尿流率及PVR结果的影响,并判断BPH患者能从哪一种排尿姿势中获益。研究方法:本次研究为前瞻性研究,纳入符合标准的2021.02—2021.12期间于我院泌尿外科住院的主诉为尿频、尿急等明显下尿路症状的BPH患者,收集患者个人资料及基线数据、PSA及尿常规等实验室检查、泌尿系彩超或腹部CT等影像学检查临床资料。试验以“生成随机数”的方式安排排尿姿势检查顺序,使每位BPH患者采用站立位、坐位及蹲位三种排尿姿势进行尿流率检查,每次尿流率检查后使用下腹部经腹B超检查计算PVR,应用统计学软件SPSS 22.0,采用重复测量方差分析和非参数检验Friedman Test的统计学方法比较不同姿势下患者排尿的最大尿流率(Maximum Flow Rate,Qmax)、平均尿流率(Average Flow Rate,Qave)、排尿后膀胱残余尿量（Bladder Post Void Residual Volume,PVR）、排尿时间（Void Time,VT）、排尿量（Void Volume,VV）等指标的差异性。随后根据患者年龄、是否患有基础疾病及既往或当前是否接受BPH药物治疗进一步将患者分组,对不同排尿姿势下的尿流率检查结果及PVR值进行亚组分析,评估不同排尿姿势对于BPH患者尿流率及PVR结果的影响。研究结果:本次研究纳入符合标准的BPH患者共35名,年龄为71[67,76]岁,比较BPH患者在站立位、坐位、蹲位三种排尿姿势下的尿流率及PVR数据结果如下:***分别为（7.16±1.67）ml/s、（8.33±1.70）ml/s、（7.93±1.94）ml/s,“站立位”与“坐位”组间差异显著（P=0.019<0.05）;***分别为（4.17±1.09）ml/s、（5.01±1.35）ml/s、（4.75±1.23）ml/s,“站立位”与“坐位”组间差异显著（P=0.019<0.05）;***分别为（81.76±18.60）ml、（66.95±15.72）ml、（72.34±18.81）ml,“站立位”与“坐位”（P=0.007<0.05）及“坐位”与“蹲位”（P=0.009<0.05）的组间差异显著;***分别为75.2[62.4,88.3]s、74.4[65.3,88.2]s、79.2[68.4,85.6]s,组间无显著差异;***分别为179.2[165.4,202.3]ml、175.4[159.7,193.7]ml、174.8[160.7,185.3]ml,组间无显著差异。6.亚组分析结果:1)基础疾病:有基础疾病的BPH患者坐位排尿时Qmax及Qave值明显高于站立位,PVR则显著低于站立位和蹲位。蹲位排尿时Qave高于站立位,PVR同样显著低于站立位。无基础疾病的BPH患者,坐位排尿的Qmax和Qave显著高于站立位,PVR显著低于站立位;蹲位排尿的Qave显著高于站立位,PVR显著低于站立位,其余数据比较均未见显著差异。表明基础疾病这一因素并不影响坐位姿势对于BPH患者排尿的改善。2)既往或当前用药史:无用药史的BPH患者坐位Qmax显著高于站立位,PVR显著低于站立位和蹲位。有用药史的BPH患者,坐位及蹲位排尿的Qmax及Qave均显著高于站立位,PVR均显著低于站立位,其余数据比较未见显著差异。表明既往用药史这一因素同样不影响坐位排尿对BPH患者排尿更好的改善。3)年龄:“55-65岁”的BPH患者坐位排尿的PVR显著低于站立位;“66-75岁”的BPH患者坐位排尿的Qave显著高于站立位,坐位及蹲位的PVR均显著低于站立位;“76-85岁”的BPH患者坐位排尿的Qmax及Qave均显著高于站立位,PVR显著低于站立位,同时蹲位排尿的Qave高于站立位,其余数据的比较均未见显著差异。表明在所划分的各年龄阶段内,坐位与蹲位相较于站立位而言均能更好地改善BPH患者的排尿。结论:与站立位姿势排尿相比,BPH患者以坐位姿势进行排尿时,尿流率数据显著升高,PVR值显著降低;而与蹲位排尿相比,坐位排尿明显降低了BPH患者的PVR值。年龄、基础疾病、用药史等因素并不会影响坐位相较于站立位在改善BPH患者排尿上的优势。蹲位排

关键词： 前列腺增生   1-鞘氨醇磷酸受体   上皮-间质转化   纤维化  

摘要： 目的:良性前列腺增生(benign prostatic hyperplasia,BPH)是中老年人常见的慢性、进展性疾病,极易引起膀胱出口梗阻(BOO)以及下尿路症状(LUTS)。目前而言,BPH的确切病因和具体机制并未十分明确。鞘氨醇1-磷酸(S1P)是一种多效溶血磷脂介质,主要由鞘氨醇经鞘氨醇激酶(Sph K)转化而成,并刺激多种信号通路,导致多种重要的细胞过程,譬如细胞增值凋亡,内皮细胞保护和纤维化等,与泌尿系统疾病密切相关。本研究的目的是检测鞘氨醇1-磷酸受体1(sphingosine 1-phosphate receptor 1,S1PR1)在BPH中的表达、对前列腺间质纤维化的影响。 方法:首先,实验使用了正常人与BPH患者的前列腺组织和细胞系,进行免疫组化染色、免疫荧光染色、荧光定量PCR(q RT-PCR)和蛋白质印迹法(western blotting)。接下来,我们建立了S1PR1沉默和过表达的细胞模型,并且在特定的分组中加入Wnt/β-catenin通路和TGFβ-1/smad通路的抑制剂,然后蛋白印迹法检测上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)和纤维化相关的标志物。我们进一步选取了间质中的人前列腺成纤维细胞,细胞迁移实验(Transwell)分析S1PR1是否能够影响前列腺成纤维细胞的迁移运动。最后,我们分别建立了睾酮诱导的前列腺上皮增生大鼠模型和肾上腺素诱导的间质增生大鼠模型,并且注射S1PR1的激动剂,取大鼠的前列腺组织,观察前列腺重量大小、免疫组织化学、组织病理学及分子生物学改变,借此探究大鼠体内S1PR1与良性前列腺纤维化的关系。 结果:研究发现,S1PR1在人类BPH样本中表达上调,并且组织定位于前列腺上皮和间质中,细胞定位于胞膜与胞质。S1PR1的缺乏抑制了上皮细胞的EMT和间质成纤维细胞向肌成纤维细胞转化。同样,过表达S1PR1后,促进了上皮细胞的EMT和间质成纤维细胞向肌成纤维细胞转化。此外,在上皮细胞中,抑制TGFβ-1/smad通路后,可显著逆转过表达S1PR1导致的EMT激活。在间质细胞中,抑制Wnt/β-catenin通路,可以回复过表达S1PR1对TGFβ-1/smad信号通路以及间质成纤维细胞向肌成纤维细胞转化的激活。不仅如此,细胞迁移实验还证明了S1PR1缺乏能够减弱S1P对成纤维细胞的迁移和聚集作用。在动物实验中,我们发现,S1PR1的激活,能够促进大鼠的前列腺增生纤维化。 结论:我们的新数据说明了,S1PR1在增生前列腺组织中上调,通过调控Wnt/β-catenin通路和TGFβ-1/smad通路,促进EMT和间质组织纤维化,并且能够促进S1P依赖的成纤维细胞聚集,从而促进BPH纤维化的进展。在未来,S1PR1可能是治疗BPH纤维化的重要靶点。

关键词： 良性前列腺增生   慢性前列腺炎   前列腺小体外泄蛋白   下尿路症状   慢性前列腺炎症状  

摘要： 目的:探讨良性前列腺增生(Benign Prostatic Hyperplasia,BPH)患者中炎症对下尿路症状(Lower urinary tract symptoms,LUTS)的影响并进一步探索尿液前列腺小体外泄蛋白(Prostatic exosomal protein,PSEP)作为慢性前列腺炎(Chronic prostatitis,CP)的诊断指标在BPH伴CP患者中的临床应用价值以及能否作为预测术后LUTS改善情况的指标。方法:选择2020年9月-2022年2月在河北医科大学第二医院行经尿道前列腺电切术(Transurethrue resection of prostate,TURP),且年龄在50岁以上的BPH患者69例进行研究,依据国际慢性前列腺炎组织学分类诊断标准,将患者分为4组,分别为无炎症组(9例),轻度炎症组(12例),中度炎症组(40例)与重度炎症组(8例)。手术前检测患者尿PSEP、血清PSA、尿流率、残余尿,同时记录术前与术后3个月的国际前列腺症状评分(International Prostate Symptom Score,IPSS)和美国国立卫生研究院慢性前列腺炎症状指数评分(National Institutes of Health Chronic Prostatitis Symptom Index,NIH-CPSI)并进行分析。结果:依据前列腺组织病理学分组,将纳入患者分为A、B、C、D四个组,分别为无炎症组(n=9),轻度炎症组(n=12),中度炎症组(n=40)与重度炎症组(n=8)。其中A、B、C、D组的尿PSEP含量分别为(4.31±1.02)ng/ml、(4.16±0.76)ng/ml、(4.13±1.27)ng/ml、(4.33±1.26),各组间差异无统计学意义(F=0.11,P=0.954)。各组术后IPSS评分较术前明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。术前、术后IPSS评分组间比较有显著性差异(F=42.05,P<0.01)(F=65.24,P<0.01)。术前、术后各组IPSS评分与前列腺组织病理学炎症分级之间相关性显著,且呈正相关(r=0.624,P<0.01)(r=0.825,P<0.01),术后IPSS改善情况与炎症等级之间呈负相关(r=-0.709,P<0.01)。术后NIH-CPSI评分明显低于术前,差异有统计学意义(P<0.01),术前、术后NIH-CPSI评分各组间比较有显著性差异(F=6.834 P<0.01)(F=7.252,P<0.01),术前、术后NIH-CPSI评分与炎症等级呈正相关(r=0.441,P<0.01)(r=0.428,P<0.01),术后NIH-CPSI改善情况与炎症等级无相关性。尿PSEP含量与前列腺组织病理学炎症分级、术前IPSS评分、术后IPSS评分均无相关性。多元回归分析显示BPH组织学炎症严重程度为术后导致轻中度下尿路症状发生的危险因素(P<0.01),而年龄、BMI、PSA、尿流率、残余尿均无统计学意义。结论:BPH大部分都合并组织学慢性前列腺炎,但没有证据表明PSEP可以作为BPH合并慢性前列腺炎的诊断及预测术后LUTS改善情况的指标。患者术后LUST明显改善,且患者术前、术后LUTS严重程度和CP的症状与炎症等级呈正相关,炎症可能会引起BPH和CP症状的恶化,且可能会导致患者愈后较差。炎症也是术后导致轻中度下尿路症状发生的危险因素。

关键词： 尿失禁   经尿道前列腺钬激光剜除术   尿道外括约肌   良性前列腺增生   前列腺12点尿道粘膜  

摘要： 目的:评估完整保留前列腺12点尿道粘膜的经尿道前列腺钬激光剜除术治疗良性前列腺增生的有效性及安全性,探讨完整保留前列腺12点尿道粘膜的意义。 方法:通过统计分析2020年07月至2021年06月期间,在我科住院治疗的100例前列腺增生患者,所有病例均经相关辅助检查及查体以诊断明确,严格按照纳入标准及排除标准,有手术治疗指征且无明显手术禁忌症。术前穿刺活检或术后病理均证实为良性前列腺增生。患者主要分为两组,其中A组:患者50名,采用传统经尿道前列腺钬激光剜除术治疗,不保留前列腺12点尿道粘膜。B组:患者共50名,采用经尿道前列腺钬激光剜除术治疗同时完整保留前列腺12点尿道粘膜。统计、记录并分析两组患者术前相关指标:年龄、前列腺体积(PV)、前列腺特异性抗原(tPSA)、血红蛋白、国际前列腺症状评分(IPSS)、生活质量评分(QoL)、最大尿流率(Qmax)以及残余尿量(PVR)等。统计分析两组患者围手术期指标:手术时间、术后留置尿管时间、术后持续膀胱冲洗时间等。随访记录并统计两组患者术后并发症:尿失禁(UI)、前列腺电切综合症(TUR-S)、术后出血、尿道狭窄、逆行射精、包膜穿孔等并发症的发生情况。通过门诊随访或电话随访两组患者术后1个月和6个月的情况,随访内容主要包括:最大尿流率、残余尿量、尿失禁情况、国际前列腺症状评分、生活质量评分等指标。 结果:1、两组患者的术前相关指标:年龄,前列腺体积,前列腺特异性抗原,血红蛋白,国际前列腺症状评分,生活质量评分,最大尿流率以及残余尿量等相关指标,Avs B组:年龄(71.30±7.57岁vs70.98±7.12岁)、PV(57.95±15.49mlvs53.13±16.99ml)、PSA(7.15±10.68ng/mlvs6.41±7.38ng/ml)、Hb(130.48±16.39g/Lvs129.40±15.65g/L)、IPSS(20.02±4.22分vs18.64±4.99分)、QoL(4.54±0.81分vs4.38±0.98分)、Qmax(7.22±4.00分vs6.38±3.92分)、PVR(108.98±90.99mlvs130.10±169.92ml),经两独立样本t检验,以上指标差异无统计学意义(P>0.05)。 2.两组患者的手术时间比较,A组vs B组(94.84±35.83minvs79.92±23.05min),经两独立样本t检验,两组差异有统计学意义(P<0.05)。 3.两组患者术后1个月随访指标,A组vs B组最大尿流率、残余尿量、国际前列腺症状评分、生活质量评分分别为:(20.79±2.73ml/minvs21.02±3.30ml/min)、(7.16±3.11mlvs6.20±2.81ml)、(3.12±0.89分vs3.00±1.19分)、(1.64±0.72分vs1.48±0.61分);术后6个月随访指标,A组vs B组最大尿流率、残余尿量、国际前列腺症状评分、生活质量评分分别为:(21.00±1.95ml/minvs21.16±2.21ml/min)、(6.44±3.17mlvs5.94±2.88ml)、(2.94±0.91分vs2.88±1.00分)、(1.60±0.67分vs1.40±0.49分);两组术后1个月和6个月指标Qmax、PVR、IPSS、QoL比较,经两独立样本t检验,差异均无统计学意义(P>0.05)。 4.两组患者术后尿失禁的发生情况:A组:患者拔除尿管后有11例出现尿失禁,其中2例为急迫性尿失禁,8例为压力性尿失禁,1例真性尿失禁。尿失禁恢复情况:4例患者的尿失禁在1月内恢复,6例患者尿失禁在6个月内恢复,1例至今仍尿失禁,发生尿失禁占22%;B组:患者拔除尿管后有3例出现尿失禁,均为压力性尿失禁,均在6个月内恢复,发生尿失禁占6%;经卡方检验后,两组患者尿失禁发生率比较,X2=5.316,P=0.021,差异有统计学意义(P<0.05)。 5.两组患者其他并发症(尿失禁除外)发生率比较,经卡方检验,X2=0.346,P=0.556,差异无统计学意义(P>0.05)。 结论:通过对两组患者术前、围手术期、术后随访指标、术后并发症等情况统计分析得出,完整保留前列腺12点尿道粘膜的HoLEP,可以减少术后尿失禁的发生率,同时缩短手术时间,两组术后IPSS、QoL、Qmax、QVR等指标无明显差异,手术并发症(除尿失禁外)无统计学意义,临床疗效确切及安全可靠。

关键词： 肠道菌群   乳腺癌   乳腺纤维腺瘤  

摘要： 目的:通过分析健康成年女性、乳腺纤维腺瘤患者、乳腺癌患者三组之间肠道菌群丰度和多样性差异,寻找筛选与乳腺肿瘤相关性较强的菌群,探究乳腺肿瘤与肠道菌群的相关性,为乳腺良恶性肿瘤病情评估、治疗、随访提供参考依据。材料和方法:收集36例健康成年女性,20例乳腺纤维腺瘤患者,36例乳腺癌患者的晨起新鲜粪便标本放入缓存液中,乳腺纤维腺瘤患者和乳腺癌患者的粪便标本均在术前或初次辅助化疗前收集。统一对92例粪便标本进行16S r RNA V4区测序。测序数据进行处理后,对三组间肠道菌群OTU、α多样性、肠道菌群门水平丰度、肠道菌群属水平丰度以及肠道菌群代谢通路进行差异性分析。分析比较得出三组间肠道菌群丰度及多样性差异。三组间菌群数据符合正态分布的通过单因素Anova检验进行分析,非正态分布数据通过Wilcoxon秩和检验进行分析,差异有统计学意义(P<0.05)。结果:三组92例标本中共获得8625625个高质量序列,平均序列长度约为303bp。在97%相似度下,将其聚类为OTU,共得到4352个OTU,三组间共有的OTU数目是1342,所有样本的测序覆盖率为99.9%。与健康成年女性组和乳腺纤维腺瘤患者组相比,乳腺癌患者组的Simpson指数较低,整体α多样性降低(P<0.005)。同样,与另外两组相比,乳腺癌患者组也表现出了测序片段数量减少的趋势(P<0.01)。PCA分析显示,三组间肠道菌群在门水平存在差异。乳腺癌患者组的拟杆菌门(Bacteroidetes)丰度显著低于健康成年女性组(P<0.001)和乳腺纤维腺瘤患者组(P<0.05)。乳腺纤维腺瘤患者组厚壁菌门(Firmicutes)丰度显著高于健康成年女性组(P<0.01)。乳腺癌患者组厚壁菌门(Firmicutes)丰度高于乳腺纤维腺瘤患者组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。与门水平类似,PCA分析显示,三组间肠道菌群在属水平组成也存在差异。在属水平上,从健康成年女性组到乳腺纤维腺瘤患者组和乳腺癌患者组,瘤胃球菌属(Ruminoccoccus)的丰度逐渐增加。瘤胃球菌(Ruminoccoccus)的丰度在乳腺癌患者中最高,在健康成年女性组中最低。罗氏菌属(Roseburia)、布劳特菌属(Blaautia)和粪球菌属(Coprococcus)也有类似的变化趋势。普雷沃菌属(Prevotella)和双歧杆菌属(Bifidobacterium)仅在乳腺纤维腺瘤患者组和乳腺癌患者组的对比分析中有统计学差异。乳腺癌患者组中普雷沃菌属(Prevotella)和双歧杆菌属(Bifidobacterium)的丰度较乳腺纤维腺瘤患者组低。此外,KEGG功能预测分析显示乳腺癌患者组与乳腺纤维腺瘤患者组在次生代谢产物的生物合成和生物降解(Biosynthesis and biodegradation of secondary metabolites)方面存在显著差异。在乳腺癌患者组和健康成年女性组的对比分析中,醚脂代谢(Ether lipid metabolism)方面有显著差异。与乳腺癌患者组和健康成年女性组的对比分析相似,乳腺纤维腺瘤患者组与健康成年女性组之间的醚脂代谢(Ether lipid metabolism)也存在显著差异。结论:乳腺癌患者、乳腺纤维腺瘤患者、健康成年女性的肠道菌群在多样性和物种丰度上均存在差异,表明肠道菌群与乳腺良恶性肿瘤的发生发展有关,本研究为乳腺肿瘤的临床诊治辟了新的思路。

关键词： 认知衰弱   良性前列腺增生   影响因素   护理  

摘要： 目的了解老年良性前列腺增生住院患者认知衰弱的现况,并分析其影响因素,为尽早识别和管理认知衰弱的老年良性前列腺增生住院患者提供参考依据。方法本研究属于横断面研究。选取湖北省荆州市2所三甲医院泌尿外科的老年良性前列腺增生住院患者作为研究对象,使用一般资料调查问卷、Fried衰弱表型量表、蒙特利尔(Mo CA)认知评估量表对调查对象进行问卷调查,使用EXCEL软件进行数据录入,SPSS25.0数据分析软件对数据进行分析:(1)描述性分析:对于符合正态分布的计量资料,采取均数±标准差表示。对于计数资料,采取频数或百分比进行数据的描述;(2)单因素分析:对于计数资料的组间比较,采取卡方检验和Fisher's精确概率检验;(3)多因素分析:将卡方检验结果中有统计学意义的变量纳入回归方程中,采取多元有序Logistic回归分析,筛选出老年良性前列腺增生住院患者认知衰弱的主要影响因素。结果1.本研究共发放调查表290份,回收有效调查表274份,调查表有效回收率为94.5%。2.274例调查对象中,老年良性前列腺增生住院患者认知衰弱的患病率为69.7%,其中潜在可逆性认知衰弱168例(61.3%),可逆性认知衰弱23例(8.4%),无认知衰弱83例(30.3%)。Fried衰弱表型量表5项指标中,最高为握力减小(44.5%),最低为体重减少(15.3%)。3.单因素分析结果显示,274例调查对象的年龄、文化程度、个人平均月收入、规律锻炼、患病情况、服用药物情况与不同认知衰弱分型之间的比较差异具有统计学意义(P<0.05)。4.多元有序Logistic回归分析结果表明,年龄、平均月收入、规律锻炼、服用药物等是老年良性前列腺增生住院患者发生认知衰弱的主要影响因素。其中,年龄≥75岁、服用多种药物是老年良性前列腺增生住院患者发生认知衰弱的危险因素;个人平均月收入高、规律运动为老年良性前列腺增生住院患者发生认知衰弱的保护因素。结论1.老年良性前列腺增生住院患者认知衰弱患病率高,应引起重视。2.高龄、服用多种药物的老年良性前列腺增生住院患者更易发生认知衰弱。个人平均月收入高、规律运动为老年良性前列腺增生住院患者发生认知衰弱的保护因素。

关键词： GDNF   化疗耐药   视网膜母细胞瘤   miR-211-5p   自噬  

摘要： 研究背景:视网膜母细胞瘤(Retinoblastoma,RB)是5岁以下儿童中最常见的一种眼内高度恶性肿瘤,其进展非常迅速,主要通过破坏眼球结构导致患儿失明。全球的RB患儿有43%都分布在亚太地区,而中国的RB患儿占全球患儿的13.6%。目前针对RB的治疗方案在进一步完善,化疗是最常见的治疗方法,而卡铂是最常用的化疗药物,临床上常使用卡铂与其他药物联合进行化学治疗,但是RB患儿的存活率依旧很低,据报道部分原因是由于RB对化疗药物的耐药性增加导致的。因此,明确RB耐药机制,寻找可能抑制耐药的靶点进行联合治疗有望增加RB患儿的存活率。胶质细胞源性神经营养因子(Glial cell derived neurotrophic factor,GDNF)是转化生长因子-β(transforming growth factor-beta,TGF-β)超家族的成员,是一种分泌蛋白。有文献报道,GDNF通过与糖基磷脂酰肌醇连接的GDNF受体α(glycosylphosphatidylinositol-linked GDNF receptor alpha,GFRα)蛋白结合,进而招募受体酪氨酸激酶(Receptor tyrosine kinase,RET),从而对靶细胞产生影响。GDNF在胶质瘤、肺癌和胰腺癌中过表达,但GDNF在RB中的表达尚未见报道。近年来,微小RNA(micro RNA,miRNA)被报道与肿瘤细胞的侵袭性和耐药密切相关,调控micro RNA可通过促进自噬促进RB耐药,提高化疗敏感性。自噬是通过隔离自噬囊泡中的细胞器和蛋白质并将细胞质载体递送至溶酶体以降解,继而保证肿瘤细胞在代谢和化疗药物的作用下存活。但由于miRNA mimics一般存在多个结合位点,所以可能有较大概率脱靶。此外,因为miRNA不稳定且血清中存在大量RNase酶降解RNA,所以miRNA的体内运输存在一定问题。寻找miRNA下游分子机制,针对下游靶点设计药物联合卡铂等化疗药物,可能更好地治疗RB。研究目的:进一步研究GDNF促进RB耐药的分子机制,为设计药物治疗靶点进而联合卡铂治疗RB从而减弱其耐药性提供充分的理论依据。研究方法:1、本文通过对视网膜母细胞瘤细胞系Y79构建耐药细胞株Y79R,然后进行RNA-seq测序。生信分析中的GO和KEGG富集分析发现差异基因在药物转运功能中明显富聚。然后我们选择其中变化最明显的GDNF和miR-211-5p进行下一步分析,在Y79R中,敲低GDNF的表达或过表达miR-211-5p,用CCK-8实验检测Y79R的IC50,流式细胞学实验检测Y79R的凋亡细胞,WB检测凋亡相关蛋白cleaved PAPR1、Bcl-2、Bax的蛋白表达水平。双荧光素酶试验和WB实验验证miR-211-5p与GDNF的关系。2、为进一步挖掘GDNF引起Y79R耐药的其他机制,我们对测序结果进行进一步生信分析,发现差异基因在自噬相关通路中富集。为了明确GDNF对Y79R细胞株自噬及凋亡的影响,我们在Y79R中敲低和过表达GDNF后,用CCK-8检测细胞IC50;流式检测细胞凋亡,q PCR检测自噬相关的基因的m RNA水平表达,WB检测凋亡相关蛋白cleaved PAPR1、Bcl-2、Bax和自噬相关蛋白LC3I、LC3II,p62的表达水平;使用电子显微镜检测自噬小体的形成。3、为了在体内证明GDNF对Y79卡铂耐药的作用我们构建了裸鼠成瘤模型。利用过表达和沉默GDNF的Y79R细胞干预裸鼠皮成瘤,使用免疫组化检测肿瘤组织中GDNF蛋白的表达情况及TUNEL检测肿瘤组织凋亡水平。研究结果:1、成功构建耐卡铂细胞模型Y79R后测序发现GDNF在药物转运相关基因中表达水平升高最明显,在可能与GDNF相互作用的基因中,miR-211-5p表达水平降低最明显。双荧光素酶试验表明miR-211-5p可以直接结合GDNF 3’-UTR,WB实验表明miR-211-5P可以抑制GDNF蛋白水平的表达。敲低GDNF和过表达miR-211-5p降低Y79R细胞的IC50,使Y79R细胞的凋亡增多。2、生信分析提示GDNF在Y79R细胞中的引起的卡铂耐药可能与自噬相关。在Y79R细胞中过表达GDNF后,CCK-8实验发现Y79R细胞IC50升高;流式细胞术结果表明Y79R细胞凋亡减少;WB结果表明凋亡相关蛋白减少,自噬相关蛋白LC3I向LC3II转化增加,p62减少;电镜也显示自噬小体增加;而在过表达GDNF的Y79R细胞中加入早期自噬抑制剂3-MA后,Y79R细胞IC50降低,细胞凋亡增加;自噬相关蛋白LC3I向LC3II转化减少,p62表达升高,自噬小体减少。结果说明GNDF可能通过诱导早期自噬影响RB耐药。3、CCK-8实验表明过表达miR-2