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关键词： 乙型肝炎病毒   肝炎   肝硬化   乙型肝炎病毒携带者  

摘要： 目的　了解血清中乙型肝炎病毒免疫学标志物 (HBVM)阴性而有病毒复制者的临床意义。方法　对 5 0例疑为肝病需进一步检查的患者 ,经知情同意行肝活检 ,其中 12例血清HBVM阴性者 ,经PCR法检测血清HBVDNA ;肝组织以免疫组化检测HBsAg及HBcAg的表达 ;采用组织学活动指数 (HAI)评估肝组织损伤程度 ;按慢性肝炎病理诊断标准进行分级 (G)和分期 (S)。结果　 12例血清HBVM(- )者中原被临床疑为HBV携带者共 5例 ,其中 4例病毒负荷为 10 4～ 10 5copies/ml、1例 <10 4copies/ml,汇管区及周围和小叶内炎症均为G1、纤维化程度分期为S1,有HBsAg、HBcAg单独或同时在胞质表达 ;其余 7例中 4例临床原疑为慢性肝炎者其病毒负荷 2例 >10 6copies/ml、2例 >10 5copies/ml,而另 3例临床疑为肝硬化者其病毒负荷量均低于 10 4copies/ml,但其肝组织炎症病理改变程度较重 ,分级、分期有 2例为G4、S4、1例为G3、S4 ,HAI达 17、17、11分 ,有中等量的HBsAg、HBcAg单独或同时在胞质或胞膜表达。结论　本研究结果提示 ,血清HBVM均阴性的所谓HBV携带者并不少见 ,其预后的判断不容盲目忽视。对有临床症状但血清HBVM均阴性的患者应行进一步的病因学检查 ,以明确诊断。

关键词： 浦乳动物细胞   分泌   乙型肝炎病毒   表面S+PreS1融合抗原   理化性状   生物学性状   N-末端序列   免疫原性  

摘要： 研究了哺乳动物细胞(转基因GdSS1-18细胞系)分泌的乙型肝炎(乙肝)病毒表面S+PreS1融合抗原(SS1)纯品的理化及生物学性状,结果表明:经HPLC柱层析呈现一个对称峰,证明HBsAg颗粒所带电荷的均一性;SDS-PAGE出现P24及P27条带,未出现Gp30的条带,凝胶扫描分析其各条带分别各占22 3%、77 7%、0%;West ernblot试验证实,P27和Gp30能与S及S1抗体结合,而P24条带仅能与S抗体结合,表明S、PreS1是特异性条带;N-末端的氨基酸序列与所用目的基因编码的序列相同;乙肝SS1融合抗原在4℃储存较稳定。动物实验结果表明:与单纯含S基因的参比疫苗相比,含SS1融合基因疫苗免疫Balb/c小鼠既产生S抗体,又产生S1抗体,S抗体的ED50滴度与参比疫苗相似,S1抗体产生早于S抗体。

关键词： 丙型肝炎病毒   准种   丙型肝炎   基因变异   准种筛选   准种检测  

摘要： 丙型肝炎病毒(hepatitis C virus, HCV)是一种重要的致人类肝炎病毒,它与瘟病毒和黄病毒有相似的基因组结构,在分类上归属于黄病毒家族中的一个独立的属[1].与其他RNA病毒类似.HCV易发生变异,其基因序列呈高度异质性(heterogeneity).HCV基因组异质性可以见于两种情况:基因型(genotypes)和准种(quasispecies).其中,HCV准种在病毒逃避宿主免疫监视、病毒持续存在及耐受抗病毒治疗中的重要地位日益受到重视[2,3].

关键词： PCR   单纯疱疹性角膜炎   角膜炎   单纯疱疹病毒   聚合酶链反应  

摘要： 单纯疱疹性角膜炎(HSK)主要是由单纯疱疹病毒I型(HSV-I)引起的一种致盲率很高的传染性眼病.目前主要依靠病史及典型的角膜病变形态确诊,尚缺少实验室的病原学早期诊断指标.笔者自1999年6月至2000年5月,采用聚合酶链反应(PCR)技术对45例各型角膜炎患者泪液HSV-I DNA进行检测,现将结果报告如下.

关键词： 检测   乙型肝炎病毒   乙肝病毒前S1蛋白   抗原   抗体   乙型肝炎  

摘要： 目的　探讨乙型肝炎病毒前S1蛋白与乙型肝炎病毒复制的关系及其在临床上的应用。方法　通过对 10 1例乙型肝炎患者血清进行“两对半”、HBV DNA和前S1蛋白的检测分析。结果　 10 1例HBsAg阳性与HBV DNA同时阳性的血清 ,Presl检出率为 94 .1% ,HBeAg/Ab的阳性率分别为 5 8.4 %和 30 .7% ;78例preS1Ab阳性血清中 ,抗HBs阳性率为 4 7.4 % ,抗HBe阳性率为 2 8.2 %。结论　乙型肝炎病毒前S1蛋白表达主要在HBVDNA复制期 。

关键词： 荧光定量聚合酶链反应   乙型肝炎病毒   乙型肝炎   诊断   治疗  

摘要： 目的 设计应用荧光定量聚合酶链反应方法定量检测血清中乙型肝炎病毒（HBV）DNA，以指导临床对乙型肝炎的诊断和治疗。方法 采用AG9900Robo MasterPCR 仪及相配套Amplisensor定量试剂，全封闭、全自动地定量检测了669例临床血清标本中HBV DNA。结果 224例HBeAg阳性者其HBV DNA对数均值为10^8.64±0.88coppys/ml、阳性率为99.12%，明显高于HBeAg阴性者10^6.95±1.13coppys/ml、50.85%阳性率（P<0.05)，401例HBsAg阳性者血清HBVDNA7.94±1.21coppys/ml,明显高于HBsAg阴性者10^5.74±0.70coppys/ml,p<0.05。结论 能对HBV DNA作出准确定量，真实反映HBV感染状况及复制水平，有助于临床对乙型肝炎及时诊断，对抗病毒药物选择、疗效考核及预后判断等均有较高应用价值。并能克服普通PCR易污染、易导致假阳性等不足。

关键词： 乙型肝炎病毒   基因型   临床意义   PCR-RFLP  

摘要： 目的:建立乙型肝炎病毒(HBV)前S基因巢式聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(nestedPCR-RFLP的基因分型方法,并分析不同基因型与临床疾病谱的相关性.方法:设计nestedPCR扩增前S基因,建立分型方法.并对32例慢性无症状携带者(ASC)、35例慢性乙型肝炎(CHB)、37例乙肝肝硬化(LC)、36例慢性重型乙型肝炎(HCH)患者的HBVDNA进行分型及分析.结果:广州地区分型结果:A型(2.9%),B型(30%),C型(67.1%);LC患者与ASC、CHB患者的基因型分布有统计学差异,前者以C型为主(分别为P<0.01,P<0.05).而HCH与ASC、CHB、LC患者的基因型分布并无统计学差异.结论:新的基因分型方法结果可靠,运用范围更广.广州地区以C型和B型为主,其中C型与B型相比,前者与更严重的肝损害相关.C型发展为肝硬化的可能较大,相对B型的预后则较好.

关键词： 糖尿病   庚型肝炎病毒   感染   逆转录套式聚合酶链反应  

摘要： 目的　了解糖尿病患者 (I型和II型 )庚型肝炎病毒 (HGV)感染情况及临床意义。方法　应用逆转录套式聚合酶链反应 (RT -NestedPCR)检测 183例糖尿病患者血清标本中的HGVRNA ,部分扩增产物进行核苷酸序列分析 ,所有患者均进行ALT检查。结果　I型和II型糖尿病患者血清标本中HGV检出阳性率分别为 4 6 7% (7/ 15 )和 2 0 2 % (34/ 16 8) ,总阳性率为 2 2 4 % (41/ 183) ;5例HGV 5’ -NCR和NS3区扩增产物与文献报道的核苷酸序列同源性分别为 87 2 %～ 89 4 %和 79 8%～ 83 5 % ;HGV感染的糖尿病患者ALT异常 (5 2～ 88U)的比例 (7 1% ,13/ 183)明显高于未感染HGV的糖尿病患者 (1 1% ,2 / 183)。结论　糖尿病患者 ,尤其是I型糖尿病患者的HGV感染率较高 ;不同地区检出的HGV基因组RNA片段的核苷酸序列存在一定的差异 ;HGV感染可导致部分患者轻微的肝脏损害。

关键词： 丙型肝炎病毒   NS5区   研究   临床意义   丙型肝炎   诊断   治疗  

摘要： NS5区是丙型肝炎病毒基因组中最长的亚基因组片段,它可进一步分为NS5A和NS5B区。NS5基因及其所编码的蛋白在丙型肝炎病毒的基因分型、病毒检测及临床抗病毒治疗等方面具有重要的意义。本文就NS5区的特点以及以上几方面的应用加以阐述。

关键词： 乙型肝炎病毒   前C区   突变   拉米夫定  

摘要： 目的　研究拉米夫定治疗过程中乙型肝炎病毒 (HBV)前C区、P区YMDD基序变异及其对疗效的影响。方法　对 5例拉米夫定 ( 10 0mg/d)治疗过程中HBeAg血清转换而HBVDNA仍阳性的慢性乙型肝炎患者 ,采用聚合酶链反应 (PCR)产物直接测序方法分析HBV前C、P区的基因序列。结果　 5例患者前C区均发现有G1896A变异 ,其中 3例HBeAg血清转换前未发现此变异 ,2例已有此变异 ;同时 5例患者在拉米夫定治疗后检测出YMDD变异 ,变异类型均为M5 5 2I ,其中有 1例在出现M5 5 2I变异 4 0周后变为M5 5 2V变异 ,有 2例M 5 5 2I联合L5 2 8M变异 ;5例患者中有 1例治疗无反应 ,另 4例在治疗过程中HBVDNA突发。结论　拉米夫定治疗过程中YMDD变异的出现可导致HBVDNA突发 ,而前C区G1896A变异可致HBeAg阴转 ,因此在治疗过程中出现HBeAg血清转换后需结合HBVDNA检测 。