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关键词： 高危型人乳头瘤病毒   P16   ki67   宫颈上皮内瘤变   临床意义   相互关系  

摘要： 目的:探究P16、ki67和高危型人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)在宫颈上皮内瘤变中诊断临床意义,并就上述指标的相关性进行分析。方法:选择2019年1月至2019年12月于我院接受治疗的31例宫颈炎患者、45例上皮内瘤变患者(其中25例为低级别上皮内瘤变,20例为高级别上皮内瘤变)为研究对象,分别对上述患者采用免疫组化法检测P16和ki67的表达,并采用PCR法对高危型人乳头瘤病毒的表达进行检测,而后实施组间比对。结果:高级别人乳头瘤变组和低级别人乳头瘤变高于宫颈炎组(P<0.05),高级别人乳头瘤病变组感染率高于低级别人乳头瘤变组,但是对比无统计学意义(P>0.05);P16表达阳性率由高至低为高级别内瘤变组、低级别内瘤变组和宫颈炎组,各组间表达阳性率比对差异具有统计学意义(P<0.05);ki67表达阳性率由高至低为高级别内瘤变组、低级别内瘤变组和宫颈炎组,各组间表达阳性率比对差异具有统计学意义(P<0.05);P16和ki67表达阳性率与HPV16/18感染率呈正相关联系(P<0.05)。结论:高危型人乳头瘤病毒、P16以及ki67对宫颈上皮内瘤变具有较好的诊断鉴别价值,可依据上述指标判断患者病程进展程度,对临床治疗具有一定指导意义。

关键词： 肠杆菌属   多粘菌素   异质性耐药   耐药机制   phoP/Q   脂多糖修饰  

摘要： 目的:研究华西医院血培养临床标本中分离的肠杆菌属细菌,了解1)血流感染中肠杆菌属细菌对多粘菌素异质性耐药的发生率及耐药水平;2)通过体内、体外实验探究肠杆菌属细菌对多粘菌素的异质性耐药是否会导致治疗失败而具有临床意义;3)深入分析肠杆菌属细菌对多粘菌素的异质性耐药机制。整个研究为多粘菌素异质性耐药的肠杆菌属细菌的临床感染的诊断、治疗和防控提供理论支持。材料和方法:1、收集华西医院临床微生物室2016.01-2019.06间血培养临床标本中分离的肠杆菌属细菌,对所有菌株进行全基因组测序和分析,通过平均核苷酸相似度(Average nucleotide identity,ANI)和模拟DNA杂交(in silico DNA-DNA hybridization,is DDH)明确所选菌株的确属于肠杆菌属,并将菌株精确鉴定到种。2、将全基因组测序所得的(reads)读序,使用Trimmomatic进行过滤,再使用SPAdes将过滤后的读序拼接contigs。用Prokka对拼接好的全基因组序列进行功能注释。分别使用多位点序列分型(Multilocus sequence typing,MLST)、Res Finder和Plasmid Finder分析和预测菌株的序列类型(Sequence type,ST)、耐药基因和质粒类型。针对同一ST类型的菌株,使用Snippy分析菌株间的单核苷酸多态性(Single nucleotide polymorphism,SNP)进行克隆相关性分析。3、对所有明确属于肠杆菌属的菌株,采用微量肉汤稀释法检测多粘菌素E最低抑菌浓度(minimum inhibition concentration,MIC),对多粘菌素E敏感的细菌进一步做菌群谱型分析(Population analysis profile,PAP)明确是否对多粘菌素存在异质性耐药,从而了解华西医院血流感染中肠杆菌属细菌对多粘菌素的异质性耐药发生率及耐药水平。4、将异质性耐药菌和敏感菌作为对照,分别行体外时间-杀菌实验,并以小鼠(C57BL/6)建立动物腹腔感染模型进行多粘菌素E的药效试验,分析体外杀菌曲线的特点及观察动物实验结局,分析异质性耐药是否会导致多粘菌素治疗的失败。5、选取异质性耐药株(120027菌)做耐药表型鉴定及传代实验,并将异质性耐药菌株送全基因组测序。将全基因组测序所得结果分别使用Snippy、Mauve、Interproscan和荧光实时定量PCR(Quantitative Real-time PCR,q-RT-PCR),从SNP变化,蛋白水平变化及基因拷贝数变化等多个方面探究肠杆菌属细菌对多粘菌素异质性耐药的机制。6、在临床采集的菌株中发现了含有新的mcr基因(质粒介导的多粘菌素耐药基因),最终命名为mcr-10。经过对此mcr基因行基因克隆验证是否介导多粘菌素耐药,并在Gen Bank数据库中筛选该mcr基因了解其全球分布情况。结果:1、2016.01-2019.06在四川大学华西医院微生物室共收集临床血液标本来源,并根据Vitek II鉴定为肠杆菌属的细菌共109株,通过全基因组测序并使用ANI和is DDH的方法,将菌株精确鉴定到种。这109株确实都属于肠杆菌属,菌种结果为:52株香坊肠杆菌(Enterobacter xiangfangensis)、24株霍夫曼肠杆菌(Enterobacter hoffmannii)、5株Enterobacter roggenkampii、5株布干达肠杆菌(Enterobacter bugandensis)、5株阿氏肠杆菌(Enterobacter asburiae)、3株阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)、3株神户肠杆菌(Enterobacter kobei)、2株霍氏肠杆菌(Enterobacter hormaechei)、2株华西肠杆菌(Enterobacter huaxiensis)、2株成都肠杆菌(Enterobacter chengduensis)、2株桑树肠杆菌(Enterobacter mori)、1株川大肠杆菌(Enterobacter chuandaensis)、1株四川肠杆菌(Enterobacter sichuanensis)、1株路德维希肠杆菌(Enterobacter ludwigii)和1株Enterobacter quasiroggenkampii。2、所有菌株通过微量肉汤稀释法检测了对多粘菌素E的药敏值,结果判读判读根据欧洲药敏试验委员会(European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing,EUCAST)(http://***/)的标准执行。结

关键词： 白细胞介素26   慢加急性肝衰竭   乙型肝炎  

摘要： 目的探讨乙型肝炎病毒相关慢加急性肝衰竭(HBV-ACLF)患者血清白细胞介素26(IL-26)的表达水平及其临床意义。方法选取临沂市人民医院自2018年10月至2019年12月收治的30例HBV-ACLF患者为A组,另选取同期收治的30例慢性乙型肝炎(CHB)患者为B组。根据预后情况将A组患者分为好转亚组(n=21)与死亡亚组(n=9);根据是否继发细菌感染将A组患者分为感染亚组(n=16)与无感染亚组(n=14);根据疾病严重程度将A组患者分为早期亚组(n=14)与中晚期亚组(n=16)。记录并比较A组与B组患者内毒素、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、总胆红素(TBIL)、丙氨酸转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、凝血酶原活动度(PTA)及IL-26水平。分析A组患者血清IL-26水平与其他相关指标相关性。结果A组患者TBIL、hs-CRP、内毒素、IL-26水平均明显高于B组,PTA明显小于B组,差异均有统计学意义(P<0.05)。早期亚组IL-26水平明显低于中晚期亚组,差异有统计学意义(P<0.05);感染亚组IL-26水平明显高于无感染亚组,差异有统计学意义(P<0.05);死亡亚组IL-26水平明显高于存活亚组,差异有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关性分析表明,IL-26与PTA呈显著负相关(r=-0.67,P<0.05),与hs-CRP、内毒素呈显著正相关(r=0.38、0.71,P<0.05)。结论IL-26水平在HBV-ACLF患者中明显升高,对监测患者病情及治疗预后具有重要临床意义和应用价值。

关键词： PLR   NLR   LMR   乙型肝炎病毒相关肝脏疾病   临床诊断  

摘要： 目的分析血小板淋巴细胞比(PLR)、中性粒细胞淋巴细胞比(NLR)和淋巴细胞单核细胞比(LMR)在乙型肝炎病毒相关肝脏疾病中的变化及其临床意义。方法在2018年1月至2018年12月到我院进行治疗的HBV感染孕产妇中,选取240例作为本次的研究对象,将其分为HBV感染孕妇组、乙肝活动期孕妇组和乙肝活动期产妇组,各80例,选取同一时期到我院进行产检的健康孕产妇60例作为本次研究的对照组。对比各组受检者的PLR、NLR、LMR指标水平。结果HBV感染孕妇组、乙肝活动期孕妇组的PLR无明显差异(P>0.05),且均低于对照组(P<0.05),乙肝活动期产妇组的PLR高于对照组(P<0.05);HBV感染孕妇组的NLR与对照组无明差异(P>0.05),3组HBV相关疾病组之间的NLR具有明显差异(P<0.05),且HBV感染孕妇组<乙肝活动期孕妇组<乙肝活动期产妇组;在LMR方面,乙肝活动期产妇组<乙肝活动期孕妇组

关键词： 肝炎   乙型   肝肿瘤   预后  

摘要： 目的探讨长链非编码RNA CCHE1(lncRNA CCHE1)在乙型肝炎病毒感染相关肝癌组织中的表达及临床意义。方法选取2012年1月-2014年12月绍兴第二医院收治的94例乙型肝炎病毒感染相关肝癌患者的肝癌组织及其癌旁组织。采用RT-PCR测定肝癌组织和癌旁组织中lncRNA CCHE1的表达。结果肝癌组织lncRNA CCHE1表达较癌旁组织高(P<0.05)。肿瘤直径≥5 cm,TNM分期Ⅲ、Ⅳ期,有门静脉癌栓及有淋巴结转移患者肝癌组织中lncRNA CCHE1表达较肿瘤直径<5 cm,TNM分期Ⅰ、Ⅱ期,无门静脉癌栓,及无淋巴结转移患者高(P<0.05)。lncRNA CCHE1诊断肝癌的ROC曲线下面积为0.814(95% CI:0.811,0.817),敏感性为72.31%(95% CI:0.693,0.734),特异性为79.24%(95% CI:0.743,0.831)。低表达组5年生存率较高表达组高(P<0.05)。两组5年生存曲线比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论乙型肝炎病毒感染相关肝癌组织中lncRNA CCHE1表达升高,其与临床病理特征关系密切,在疾病诊断、预后评估中具有一定价值。

关键词： 猪霍乱沙门菌   噬菌体   跨属感染   生物学特性   裂菌效力  

摘要： 从健康猪肠道内容物分离鉴定猪霍乱沙门菌(Salmonella choleraesuis,***)的烈性噬菌体,并对其进行生物学特性分析。以*** 13122为宿主菌,用双层平板法从猪肠道黏膜和食糜样品中分离噬菌体,用电镜形态观察和基因组测序确定其分类,用点滴法和双层平板法测定其在大肠杆菌上的宿主谱,用浊度法测定其裂菌效力。分离到1株猪霍乱沙门菌噬菌体,命名为沙门菌噬菌体L6jm(Salmonella phage L6jm)。L6jm头部呈正多面体直径约75 nm,具有非收缩性的尾部,长约190 nm,其基因组无整合酶基因和细菌基因组,故判定为烈性噬菌体;L6jm可感染*** 13122并跨属感染1株大肠杆菌(Escherichia coli,***)244,同时,可裂解9株大肠杆菌,包括1株产肠毒素大肠杆菌(ETEC);L6jm在*** 13122和*** 244上的最佳感染复数分别为0.01和0.001;潜伏期均为15 min,暴发期分别为145和125 min;L6jm在≤50℃,pH为3~11时稳定;L6jm在液体培养基中对*** 13122有显著(P<0.05)的抑菌效果,对ETEC104在MOI 100时也可产生显著(P<0.05)的抑菌效果。L6jm可跨属感染***和***,且能裂解1株ETEC,具有防治沙门菌和大肠杆菌感染的应用潜力。

关键词： 乙型肝炎,慢性   乙型肝炎病毒   肝炎病毒核心抗原,乙型   肝炎病毒核心相关抗原,乙型  

摘要： 中华医学会感染病学分会和肝病学分会于2019年12月联合发布了2019年版《慢性乙型肝炎防治指南》(简称本指南)[1]。与2015年版《慢性乙型肝炎防治指南》相比,本指南在实验室检查部分新增了乙型肝炎病毒(HBV)核心抗体(抗-HBc)、HBV RNA、HBV核心相关抗原(HBcrAg)等HBV新型标志物的检测,本文将对这3种标志物的临床意义进行深入解读。

关键词： 基因型   丙型肝炎病毒   PCR-荧光探针法  

摘要： 目的对山西省丙型肝炎病毒(HCV)感染者基因分型实验室检测结果及临床资料进行分析,探讨HCV基因型的临床应用价值。方法收集2019年1月至7月在山西医科大学第一医院感染病科就诊的HCV感染患者(抗-HCV阳性,HCVRNA≥1×10~3U/ml)作为研究对象,采用聚合酶链反应(PCR)-荧光探针法检测其基因型,并检测HCV-RNA含量,丙氨酸转氨酶(ALT)、白蛋白(ALB)、总胆红素(TBIL)、甲胎蛋白(AFP)指标,根据不同基因型分组,比较不同基因型的HCV感染者的临床指标。结果共检测90例HCVRNA≥1×10~3U/ml的阳性标本,检出2种基因型,分别为1b型78例(87%),2a型12例(13%),可分型率为100%。1b基因型HCV感染患者血清HCV-RNA病毒载量、血清ALT、ALB、TBIL、AFP水平与2a基因型HCV感染者比较,差异无统计学意义(均P>0.05)。结论山西省HCV基因型主要为1b型,其次为2a型。HCV分型不足以判断HCV相关临床情况,需同时检测HCV基因型、HCV-RNA含量及肝功能等全面评估病情。

关键词： 高危型人乳头瘤病毒   亚型   分布特征   宫颈疾病   诊断  

摘要： 目的探讨高危型人乳头瘤病毒(HPV)亚型分布特征在诊断宫颈疾病中的临床意义。方法选取我院妇科门诊2017年6月—2019年6月宫颈疾病患者560例,均行高危型HPV检测,对高危型HPV阳性行薄层液基细胞学(TCT)检测,对TCT阳性者行活检病理检测,统计高危型HPV在宫颈疾病中阳性率及不同宫颈病变中分布情况。结果 560例宫颈疾病患者中,经病理检查结果显示,慢性宫颈炎186例,CINⅠ级114例,CINⅡ级130例,CINⅢ级82例,原位癌48例;经高危型HPV检测、TCT检测显示,宫颈疾病患者中高危型HPV277例,阳性率为74.06%(277/374);最常见高危型HPV亚型为HPV 16(28.16%),其次为HPV 52(23.47%)、HPV 58(16.25%)、HPV 33(13.00%)、HPV 18(11.91%)。结论高危型HPV亚型分布特征与宫颈癌及癌变前期具有密切关系,可为临床诊断提供可靠依据。

关键词： 宫颈癌   高危型人乳头瘤病毒   FAM19A4甲基化   癌前病变  

摘要： 目的探究高危型人乳头瘤病毒(HPV)阳性宫颈组织中FAM19A4甲基化检测对宫颈癌前病变的临床意义。方法选择2017年2月至2019年1月在山西省肿瘤医院就诊的115例宫颈疾病患者和65例宫颈正常的体检者。根据宫颈病变情况将受试者分为正常组65例,宫颈癌组50例,癌前病变组99例。采集三组受试者的宫颈脱落细胞进行HPV筛选,对于检出的HPV采用杂交捕获法进行DNA检测,对HPV基因型做分型检测;采用DNA提取试剂盒提取样品DNA,并采用重亚硫酸盐进行处理;通过RT-PCR和Western Blot方法检测各组样品中FAM19A4、PFAM19A4的mRNA和蛋白表达情况。结果三组受试者宫颈组织脱落细胞中HPV检出结果:正常组、癌前病变组和宫颈癌组中HPV检出率分别为7.69%(5/65)、35.35%(35/99)、48.00%(24/50),三组HPV检出率比较,宫颈癌组>癌前病变组>正常组,差异有统计学意义(P<0.05)。分子实验检测结果显示,与正常组相比,宫颈癌组和癌前病变组FAM19A4基因mRNA和蛋白表达降低,PFAM19A4基因表达升高(P<0.01);与癌前病变组相比,宫颈癌组PFAM19A4基因的mRNA和蛋白表达上调更显著(P<0.01)。结论高危型HPV阳性宫颈组织中FAM19A4甲基化程度的升高可增加宫颈癌变的概率,检测FAM19A4甲基化程度可为临床防治宫颈癌提供参考。