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关键词： 丙型肝炎   肝炎病毒   基因分型  

摘要： 目的：丙型肝炎病毒(HCV)存在不同的基因型，基因型分布有明显的地区差异，并且HCV基因型与丙型肝炎的临床特征和对干扰素(IFN)的应答存在一定的关系。 方法: 应用型特异性引物PCR分型法对57例HCVRNA阳性的慢性丙型肝炎、丙肝肝硬化、丙肝相关肝癌病人，进行HCV的基因分型。分析了不同HCV基因型与HCV感染途径、肝功能情况、肝脏损伤程度及其对干扰素(IFN)应答的相关关系。 结果: 对57例HCV RNA阳性患者的血清进行基因分型，44例结果阳性，13例结果阴性。44份阳性结果中，基因型为1b型26例，占59.09％，2a型14例，占31.82％，1b+2a及2a+2b混合型感染者2例，占4.55％，3a型1例，占2.27％，未分型1例，占2.27％。25岁以下患丙型肝炎者无，不同性别之间基因分型无显著差异(p>0.05);慢性肝炎与肝硬化之间基因分型无显著差异(p>0.05);不同感染途径之间基因分型无显著差异(p>0.05);谷丙转氨酶异常与正常患者之间基因分型无显著差异(p>0.05);干扰素治疗过与未用干扰素治疗患者之间基因分型有显著差异(p<0.05)，干扰素治疗过组1b型较多;哈尔滨市与黑龙江省其他地区基因分型无显著差异(p>0.05)。 结论: 黑龙江地区丙型肝炎的流行株为基因1b和2a型，以1b为主。25岁以下患丙型肝炎者较少，基因型与丙型肝炎的感染途径、性别、肝功能情况、肝脏损伤程度及省内区域分布无关，与干扰素疗效有关，干扰素治疗过基因1b型较多，说明1b型干扰素疗效低于基因2a型。

关键词： 血清淀粉样蛋白A   丙型肝炎病毒   炎症  

摘要： 目的通过酶联免疫吸附试验(ELESA)和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)两种方法检测丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus，HCV)感染者中血清淀粉样蛋白A(Serum amyloid A，SAA)和外周血单核细胞(peripheral blood monouclear cells，PBMC)中SAA-mRNA的表达水平，初步探讨SAA在HCV感染者中的临床意义。 方法采用ELISA方法检测134例HCV感染者和20例健康对照者血清SAA水平，同时选取上述部分患者及健康对照者的血标本通过RT-PCR方法检测PBMC中SAA-mRNA的表达水平。分析各组血清SAA水平或PBMC中SAA-mRNA表达水平的差异，RT-PCR测得SAA-mRNA表达水平与ELESA测得血清SAA水平做直线相关分析。 结果(1)按疾病的活动性分组比较：HCV感染者(包括HCV-RNA阳性及HCV-RNA阴性患者)SAA水平明显高于正常对照组(P＜0.01)；SAA水平在HCV-RNA阳性ALT升高组、HCV-RNA阳性ALT正常组、HCV-RNA阴性ALT正常(经干扰素治疗)组与HCV-RNA阴性ALT正常(未用干扰素治疗)组四组之间比较无显著性差异；(2)按HCV-RNA滴度分组比较：高度HCV-RNA阳性(HCV-RNA≥10～6 copies／ml)组、低度HCV-RNA阳性(HCV-RNA＞500 copies／ml、＜10～6 copies／ml)组及HCV-RNA阴性组三组SAA水平比较均无有显著性差异；(3)按ALT升高程度分组比较：SAA水平在ALT＞5倍正常上限值(ULN)组、ALT＞2～5×ULN组、ALT 1～2×ULN组与ALT正常四组间比较无显著性差异；(5)RT-PCR测得SAA-mRNA表达水平与ELESA测得血清SAA水平呈正相关(r=0.86，P＜0.01)。 结论(1)RT-PCR测得SAA-mRNA表达水平与ELESA测得血清SAA有良好的相关性，然而，ELESA方法简便、快捷，更适用于临床；(2)SAA表达水平与病毒载量无关；(3)SAA可作为提示HCV感染炎症活动的一个敏感指标，其对肝脏炎症活动的估计与ALT有互补作用。

关键词： 肝炎病毒   聚合酶链反应   限制性酶长度多态性分析   基因分型   丙型肝炎  

摘要： 目的:了解内蒙古及蒙古国地区丙型肝炎病毒(HCV)感染者中HCV基因型及亚型分布情况。 病例资料及方法:采用聚合酶链反应-限制性酶长度多态性分析(PCR-RFLP)方法对内蒙古及蒙古国74份抗HCV阳性感染者74份血清进行了HCVRNA检测。63份HCVRNA阳性标本进行了基因分型检测。抗HCV采用ELISA;HCVRNA采用荧光定量PCR;基因分型采用HCV 5’端非编码区限制性酶切长度多态性分析法。 结果:74份抗HCV阳性血清(内蒙古54份，蒙古国20份)，63份HCVRNA阳性(内蒙古45份，蒙古国18份)。63份HCVRNA阳性标本中48份(内蒙古34份，蒙古国14份)为1b型。14份(内蒙古血清10份，蒙古国血清4份)为2a型。1b型和2a型分别占76％，22％。混合型1份，为内蒙古血清。内蒙古地区lb型占76％，2a型占22％，混合型占2％。蒙古国1b型占77.8％，2a型占22.2％。不同性别HCV感染者基因型分布无显著性差异(P>0.05)。内蒙古地区汉族与蒙古族基因型分布无显著性差异(P>0.05)，内蒙古与蒙古国蒙古族基因型分布无显著性差异(P>0.05)。不同传播途径HCV感染者基因型分布无显著性差异(P>0.05)。 结论:内蒙古地区与蒙古国基因型以I b为主，其次为2a型。今后应以HCVlb型为重点，加强HCV的诊断、治疗和疫苗研制工作。

关键词： 乙型肝炎病毒   基因型   基因亚型  

摘要： 背景与目的：乙型肝炎病毒(HBV)是导致人类急性和慢性肝脏疾病的重要病原体，广泛分布于世界各地。据世界卫生组织统计，全球约20亿人曾感染过HBV，其中3.5亿人为慢性HBV感染者，每年约有100万人死于HBV感染所致的肝衰竭、肝硬化和原发性肝细胞癌(HCC)。我国属HBV感染高流行区，一般人群的HBsAg阳性率为9.09％，其中慢性乙型肝炎患者超过3000万人。HBV感染是肝硬化、肝癌的主要原因。在6岁以前受感染的人群中，约25％在成年时将发展成肝硬化和原发性肝细胞癌。所以HBV感染是我国也是世界的重要的公共卫生问题。 迄今为止，根据HBV全基因组序列差异≥8％或S基因序列差异≥4％，可将HBV分为A、B、C、D、E、F、G、H 8个基因型。目前已有报道，不同基因型可进一步分为不同的基因亚型。大量的研究已经表明，HBV基因型及亚型有明显的地域分布特点，亦可能与被感染人的种群、感染途径、疾病的感染谱、病情的进展和预后以及对抗病毒治疗的应答等有一定的相关关系。为了解HBV基因型及基因亚型在山东地区的分布特征及其临床意义，我们进行了本研究。 材料和方法：采用型特异性引物巢式PCR法检测了277例山东籍不同临床类型的HBV感染者HBV基因型和基因亚型，其中，慢性HBV携带者42例，急性乙型肝炎11例，慢性乙型肝炎185例，乙肝肝硬化35例，原发性肝细胞癌4例。比较不同临床类型、不同性别、不同年龄患者中HBV基因型构成的差异，及不同基因型在ALT、HBV DNA等方面有无差别。应用SPSS13.0统计软件进行相关统计分析。 结果：277例HBV感染者血清标本中，232例(83.8％)可检出基因型，其中B基因型20例(8.6％)，C型198例(85.3％)，B／C混合型14例(6.1％)，未检出A、D、E、F基因型。在B基因型中，16例(80％)为单一Ba基因亚型，3例(15％)为Bj基因亚型，1例(5％)为非Ba／Bj基因亚型；C基因型中，C2基因亚型159例(80.3％)，非C1／C2基因亚型39例(19.7％)；14例B／C混合型感染的亚型中，Ba+C2亚型占11例(78.6％)，Ba+非C1／C2基因亚型3例(21.4％)。在慢性乙型肝炎和乙肝肝硬化患者中，HBV基因型的构成差异无显著统计学意义(P=0.557)，二者合并后C基因型所占比例显著高于慢性HBV携带者，分别为88.1％和68.8％(P=0.000)。在≥20岁组C基因型占绝大多数(87.3％)，＜20岁组C基因型仍占多数(65％)，但B基因型达30％，≥20岁组C基因型所占比例显著高于＜20岁组。所有B基因型均为HBeAg阳性慢乙肝患者，在HBeAg阴性慢乙肝患者中，未检测到基因B型。在慢性乙型肝炎组，基因C型ALT值显著高于B型，分别为125u／L和68u／L；基因B、C、B／C型之间，HBVDNA水平无显著差异(P＞0.05)。基因型的分布与性别无关。 结论：山东地区HBV感染者中，存在基因B型、C型和B／C混合型，未发现A、D、E、F基因型。C基因型中以C2基因亚型为主，未发现C1基因亚型，存在非C1／C2基因亚型。在B基因型中，Ba基因亚型占绝大多数，存在Bj基因亚型和非Ba／Bj基因亚型。慢性乙型肝炎和乙肝肝硬化患者的C基因型比例高于慢性HBV携带者，慢性乙型肝炎患者中C基因型ALT水平显著高于B基因型。基因型的分布与年龄及HBeAg状态有关，与性别、HBVDNA水平无关。

关键词： 丙型肝炎病毒   基因分型   聚合酶链反应  

摘要： 丙型肝炎病毒(Hepatitis C Virus,HCV)感染呈全球分布,全世界约有1.7～2亿人感染HCV。在我国HCV的感染率占总人口的3.2%,约4200万,是引起慢性肝病的主要原因之一。HCV感染后85%以上会转变成慢性肝炎,如未经合理治疗,其中10%～30%经10～20年后会发展成肝硬化,1%～3%会发展成原发性肝癌。观察发现,基因分型对HCV流行病学调查、病毒毒力强弱的研究、不同基因亚型病毒特异疫苗的研制、病毒感染的自然历程及其持续感染在发病过程中的作用、病毒的演变过程、病毒与宿主的相互作用及临床治疗效果等都有着十分重要的意义。因此近年来,丙型肝炎病毒基因分型越来越受到大家的关注。本文的目的是探索HCV基因型在长春地区的分布及流行优势株,并探讨HCV基因型与丙型肝炎的感染途径、疾病的进展、炎症活动度、病毒血症水平、脂肪变性间的相关性。我们采用荧光定量PCR和型特异性引物PCR法对长春地区82例抗-HCV阳性的慢性丙型肝炎、丙肝肝硬化、丙肝相关肝癌病人进行HCV-RNA的检测及HCV的基因分型,同时收集病人的一般资料、感染途径、肝功能、脂肪变性(B超)等资料进行登记。研究发现长春地区丙型肝炎病毒基因型流行株为基因型1b和2a,还检测出少见的基因型1a、2b、3a;HCV基因型与HCV感染途径无明显相关性;基因型lb的病毒含量水平、ALT异常率明显高于2a型,这可能是基因型1b患者对干扰素应答不良的原因之一;基因型1b HCV感染者的肝硬化发生率显著高于2a型HCV感染者,HCV基因型与慢性丙型肝炎的严重程度及肝硬化的产生有一定的相关性,基因型的检测对病情的发展和预后有一定的预测作用;基因型1b对脂肪代谢的影响较大,发生脂肪肝的机会较多,也可能是影响其疗效、病情易反复的原因之一。

关键词： 乙型肝炎病毒核酸   乙型肝炎血清学标志物   荧光定量聚合酶链反应  

摘要： 目的探讨实时跟踪荧光PCR定量检测乙型肝炎病毒DNA临床价值。方法对2 367例临床血清标本用FQ-PCR方法进行HBV-DNA定量测定,并和ELISA两对半以及ALT结果进行比较。结果HBV-DNA阳性率为60.9%(1 442/2 367),其中大三阳HBV-DNA检出率为89.04%(845/949)、ALT升高47.84%(454/949)、小三阳HBV-DNA检出率为39.08%(408/1 044)、ALT升高33.42%(349/1 044)、单HBSAg63.8%(185/290);单抗HBe HBV-DNA检出率4.54%(1/22)。结论实时跟踪定量检测的荧光定量PCR技术可以检测HBV的真实感染和复制情况是乙型肝炎病毒复制和传染性的直接病原学依据。

关键词： 乙型肝炎病毒   变异   基因芯片  

摘要： 目的探讨乙型肝炎患者HBeAg和HBeAb双阳性状态下HBV前C区基因及BCP区基因变异情况,探讨前C区A1896及BCP区T1762与A1764变异与HBe转换的关系。方法采用时间分辨荧光免疫分析方法定量检测乙肝“二对半”,对HBeAg/HBeAb双阳性标本采用基于膜显色的DNA芯片检测HBVnt1896、nt1762、nt1764位基因。结果35例HBeAg、HBeAb、HBVDNA阳性的患者均存在nt1762和nt1764的突变,有14例患者出现了nt1896的突变。结论在乙型肝炎HBe转换过程中均伴有BCP区T1762和A1764的突变,部分存在A1896位点的突变,T1762和A1764的突变早于A1896的突变,A1896的突变主要在e抗体产生过程中或产生以后。

关键词： 乙型肝炎病毒   基因变异   临床意义  

摘要： HBV在多种因素影响下发生基因变异,以实现自身生存的目的。基因变异赋予HBV自身某些生物学特征的同时,也给临床表现、诊断、预后和防治等方面带来一系列新的问题。HBV不同基因区段变异的频率和类型不同,其临床意义也不同。本文就HBV基因变异的最新研究进展与临床意义加以阐述。

关键词： 乙肝病毒标志物   乙肝病毒前S1抗原   酶联免疫吸附试验(ELISA)  

摘要： 目的:分析乙型肝炎病毒(HBV)前S1抗原与其他HBV标志物的关系,并探讨其相应的临床意义。方法:用酶联免疫吸附试验方法(ELISA)检测95例HBV病毒感染者血清标志物和前S1抗原,并对结果进行分析。结果:前S1抗原在HBeAg阳性组合中的检出率明显高于HBeAg阴性组合者(P<0.05);HBV感染者抗HBc-IgM与前S1抗原检出率差异有显著性(P<0.05),HbcAb-IgM与前S1抗原的关系不密切(r=-0.1045)。结论:前S1抗原是反映HBV感染、复制的指标,与HBV标志物联合检测可为乙型肝炎的诊断、治疗提供更可靠的依据。

关键词： 定量聚合酶链反应   丙型肝炎病毒   感染检测   临床意义   RNA定量检测   抗-HCV   丙型肝炎患者   抗病毒药物  

摘要： 近年许多实验表明,应用荧光定量聚合酶链反应(FQPCIR)术检测丙型肝炎病(HCV-RNA)具有快速以及特异,灵敏度高等特点。这种方法对于丙型肝炎患者的早期诊断、治疗期间抗病毒药物的评价、受感人群的普查均有较高的实用价值。HCV-RNA定量检测在一定程度上可以反映肝脏炎症活动及肝损伤程度。本实验就对100份丙型肝炎分别进行HCV-RNA,抗-HCV,ALT检测,进一步探讨三者之间的关系。[第一段]