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关键词： 肝炎病毒   乙型   DNA   HBeAg   ALT   FQ-PCR  

摘要： 目的 探讨乙型肝炎病毒HBV-DNA含量与血清标记物HBeAg、谷丙转氨酶（ALT）的相关性及其对肝病患者诊断、预后的意义.方法 采用酶联免疫吸附实验（ELISA）法检测523例乙肝患者血清学标记物（HBV-M）,其血清学模型包括以下四种组合,A组：HBsAg（＋）、HBeAg（＋）、HBcAb（＋）（大三阳）;B组：HBsAg（＋）、HBeAb（＋）、HBcAb（＋）（小三阳）;C组HBsAg（＋）、HBcAb（＋）;D组：HBsAb（＋）、HBeAb（＋）、HBcAb（＋）;并选取65例HBsAg（-）、HBsAb（-）HBeAg（-）、HBeAb（-）、HBcAb（＋）正常人（E组）作为对照.实时荧光定量PCR（FQ-PCR）检测血清中HBV-DNA含量,同时采用酶法测定血清ALT水平.结果 A组HBV-DNA阳性率为92.55%,明显高于B组78.97%（x2=189.60,P〈0.001）和C组50.98%（x2=234.15,P〈0.001）,A、D、C三组ALT水平均高于对照组（P〈0.001,P〈0.001,P〈0.001）;Log HBV-DNA与HBeAg S/CO之间存在正相关性（r=0.418,P〈0.001）,而ALT与Log HBV-DNA及HBeAg S/CO之间均无相关性.结论 HBV-DNA含量与乙肝病毒e抗原具有显著相关性,HBV-M和HBV-DNA定量检测并联合ALT水平对于临床乙肝病毒感染、复制及临床治疗有重要意义.

关键词： 人乳头瘤病毒   荧光定量PCR   基因分型  

摘要： 目的用实时荧光定量PCR法检测低危型人乳头状瘤病毒HPV(如6/11型)和高危型人乳头状瘤病毒HPV(如16/18型),探讨其在宫颈癌防治方面的意义。方法采用FQ-PCR方法检测624例不同年龄组患者感染HPV6/11、HPV16/18型情况。结果624例标本中HPV6/11、HPV16/18检测的阳性率分别为26.3%,8.3%,低危型远高于高危型(P<0.01)。HPV6/11、HPV16/18阳性患者的年龄分布不同,年龄段的感染情况也不同,HPV6/11型感染主要集中在20～40岁,HPV16/18型感染者年龄均在41～50岁。结论荧光定量PCR检测低危型HPV和高危型HPV,方法简便准确,快速。

关键词： 乙型肝炎病毒   相关性慢性肝病   外周血骨桥蛋白   多聚酶链反应法   炎症活动  

摘要： [目的]\n 研究乙型肝炎病毒(HBV)相关性慢性肝病患者的外周血骨桥蛋白(OPN)水平,探讨其与乙肝相关性慢性肝病的关系及其临床意义。\n [方法]\n 收集临床8例健康对照者和79乙型肝炎病毒相关性慢性肝病患者的血清,其中慢性乙型肝炎35例,慢性重型乙型肝炎12例,慢性乙肝后肝硬化20例,慢性乙肝相关性肝癌12例。采用酶联免疫吸附试验方法检测骨桥蛋白水平,采用常规方法检测临床指标,用多聚酶链反应法(PCR法)测乙型肝炎病毒载量(HBV-DNA),观察骨桥蛋白在各组中的表达水平变化及其与乙型肝炎病毒相关性慢性肝病的关系。\n [结果]\n 1.各组血浆骨桥蛋白检测结果:正常人组血浆骨桥蛋白表达水平为3.10±0.44ng/ml,慢性乙型肝炎患者组血浆骨桥蛋白表达水平为5.96±3.67ng/ml,慢性重型乙型肝炎患者组血浆骨桥蛋白水平为12.47±1.98ng/ml,乙型肝炎后肝硬化组患者血浆骨桥蛋白水平为6.21±3.55ng/ml,乙型肝炎相关性肝癌患者组血浆骨桥蛋白表达水平为13.13±1.50 ng/ml。\n 2.肝炎患者(包括慢性乙型肝炎和慢性重型乙型肝炎)组骨桥蛋白水平与肝功能指标中谷丙转氨酶(ALT)水平没有相关性,与总胆红素(TBIL)水平、谷草转氨酶(AST)水平、凝血酶原时间(PT)呈正相关性,与胆碱酯酶(CHE)水平、白蛋白(ALB)水平、A/G比值呈负相关。\n 3.将肝炎患者按HBV-DNA与HBeAg复制变化、HBV-DNA复制水平进行分组,比较各组骨桥蛋白水平,结果示各组之间不存在统计学差异,提示骨桥蛋白水平与乙型肝炎病毒复制水平没有关系。\n 4.肝硬化组患者按Child-Pugh分级,骨桥蛋白水平随分级级别增高而增高,C级与B级、A级比较均有统计学差异,B级与A级比较有统计学差异。\n 5.肝癌组OPN水平与AFP有相关关系(r=0.993,P=0.000＜0.05),呈正相关。\n [结论]\n 1.乙型肝炎病毒相关性慢性肝病患者外周血骨桥蛋白水平均高于与正常组,与正常组比较差异有统计学意义(P＜0.05),提示骨桥蛋白随着慢性肝病病情发展有增高趋势。\n 2.外周血骨桥蛋白与慢性肝炎的炎症活动的部分生化指标有相关性,随着炎症加重骨桥蛋白水平增高,尤其重度至重型肝炎增高更明显。测定骨桥蛋白水平变化可评估乙肝患者肝功能状况及疾病的严重程度,对判断乙肝患者预后有一定价值。\n 3.外周血骨桥蛋白水平与乙肝肝硬化病情严重程度有关,随着Child-Pugh分级级别增高而增高,提示骨桥蛋白水平可反映肝硬化的病情严重程度。\n 4.骨桥蛋白水平在肝癌患者明显增高,且与甲胎蛋白(AFP)有正相关性,提示骨桥蛋白水平的变化对判断乙型肝炎病毒相关性慢性肝病恶变有临床意义。

关键词： 乙型肝炎病毒(HBV)   基因型  

摘要： 目的了解山西省地区乙型肝炎病毒(HBV)基因型的分布特征,探讨HBV各基因型与血清HBV-DNA水平的关系以及各基因型与疾病的进展和转归的临床意义。方法法随机收集山西省HBV阳性病例128例,包括慢性乙型肝炎78例,肝硬化34例,急性肝炎8例,重型肝炎患者8例。取其外周静脉血,采用型特异性引物巢式PCR方法对血清中的HBV进行基因分型,并结合临床资料进行统计学分析结果山西省地区乙型肝炎患者HBV基因分型存在B型、B+C混合型和C型,以C型和B+C型为主;基因型C型的HBV-DNA载量的均值水平为2×108,显著高于其他型(p<0.05);C型HBeAg阳性率较B型和B+C型高(p<0.05);混合型及C基因型与较严重的肝脏疾病有关,更易发生重症肝炎、肝硬化。结论山西省地区基因型以C型和B+C型为主;基因型C的HBV-DNA载量水平均值显著高于其他型;混合型及C型与较严重的肝脏疾病有关。

关键词： 肝细胞癌   乙型肝炎病毒   基因型   预后因素  

摘要： 研究背景:<br>　　 原发性肝细胞癌(HCC)是我国常见恶性肿瘤之一；乙型肝炎病毒(HBV)感染也是亚洲地区肝癌患者最常见的致病因素。已有研究证明乙型肝炎病毒与肝癌的发生密切相关。近年来，乙型肝炎病毒基因及其亚型的研究进展逐渐被人们所重视，有学者试图从此方面入手，研究肝癌的发生发展及预后。肝癌细胞的生物学行为(包括侵袭性在内)决定其恶性程度，很大程度上影响着手术效果和预后。在临床病理方面，如癌组织分化程度低、子灶形成、多发癌灶、包膜不完整或无包膜形成、血管癌栓等均提示预后不良。国外已有关于乙型肝炎病毒基因型对肝病严重程度影响的研究，但是对乙型肝炎病毒基因型与肝细胞癌之间的临床病理联系，国内外研究的尚少。<br>　　 研究目的:<br>　　 了解感染不同基因型HBV的HCC患者临床特征和肿瘤组织病理学的差异，初步探讨HBV基因型与HCC生物学性状及行为的相关性。<br>　　 材料和方法:<br>　　 1.病例选择：本实验选择本院99例伴HBV感染的HCC患者为研究对象。入院时常规进行肝功能、病毒血清标志物、HBV-DNA定量、肿瘤标志物、B超、CT/MR等检查，根据检查结果及术后病理结果，排除其他肝炎病毒感染及其他肝脏疾病。<br>　　 2.标本收集和制作：所有病例术前抽取5～6ml患者静脉血，离心，取上层血清，于-80℃冰箱冻存；相应患者肿瘤组织标本收集并行HE染色、网织纤维染色。<br>　　 3.乙型肝炎病毒基因型检测：采用巢式PCR方法扩增HBV基因的S区，而后对特异性产物进行基因测序，测序结果输入MEGA基因分析软件进行进化树分析。<br>　　 4.病理学检查：包括大体标本检查和HE染色、网织纤维染色玻片镜检，由两位病理医生独立观察，内容包括肿瘤最大径、肿瘤数目(单发还是多发、卫星子灶形成)、血管侵犯和癌栓、包膜形成、肿瘤组织分化、周围肝组织纤维化分期。<br>　　 5.术后随访：所有入选病例根治性手术后，每2～3周复查一次，常规检测AFP和腹部B超，怀疑复发者行B超造影、CT/MR检查。统计患者的疾病进展时间和无病生存时间。<br>　　 6.使用SPSS11.0统计学软件进行医学统计学分析。正态计量资料采用F检验、t检验或单因素方差分析法分析；偏态分布资料采用Wilcoxon或Kwallis秩和检验分析；定性资料采用卡方检验或Fisher精确概率法分析；疾病进展时间和无病生存时间用Log-Rank生存分析。以上检验均以p＜0.05认为差异有统计学意义。<br>　　 结果:<br>　　 99例患者中，共检测出阳性结果87例，其中B2型组37例(42.5％)，C型组50例(57.5％)。男性77例(88.5％)，女性10例(11.5％)，平均年龄为51.19±11.39岁。两组性别、年龄均无统计学差异，B2型组患者在40岁以下年龄段及50岁以下年龄段所占比例相对较大。<br>　　 B2型组AST水平高于C型组，差异有统计学意义(p=0.015＜0.05)，其他肝功能指标无明显差异。B2、C型两组血清HBV-DNA含量、HBeAg阳性、HBeAb阳性比率和HBeAg、HBeAb阴性比率差异均未达到统计学意义。B2型组患者术前AFP水平较C型组者高，差异有统计学意义(p=0.035＜0.05)。<br>　　 两组在肿瘤大小、数目及分化程度无统计学差异。B2型组周围脉管癌栓形成、包膜不完整或无包膜形成者较C型组多，差异具有统计学意义(p=0.014＜0.05，p=.008＜0.05)；C型组肝纤维化较B2型组明显(p=0.020＜0.05)。<br>　　 排除随访丢失和不符合随访标准病例后，术后严格随访病例51例。疾病进展时间(TTP)，B2型组较C型组复发时间更早，差异具有统计学意义(p=0.032＜0.05)；无病生存时间(DFS)C型组优于B2型组(p=0.034＜0.05)。<br>　　 结论:<br>　　 1.本研究87例标本，B2型37例，C型50例，未发现其他基因型。B2型HCC患者相对于C型年轻化，倾向于早期发病；而C型相对于B2型更为多发。<br>　　 2.B2型患者肝功能较C型差；两种基因型在HBeAg阳性率、HBV-DNA定量等指标中无明显差异；B2型术前AFP量较C型高。<br>　　 3.B2型HCC多并发肿瘤周围小脉管癌栓，包膜大多不完整，侵袭性较强；C型HCC患者肝纤维化较严重，可能影响患者术后肝功能恢复。<br>　

关键词： 乙型肝炎病毒   基因型   反向点杂交  

摘要： 目的了解湘潭地区乙型肝炎病毒(HBV)基因型流行情况及其临床意义,并对HBV基因分型试剂盒进行评价。方法用HBV基因分型试剂对湘潭地区95例HBV感染者的样本进行检测,并对PCR产物进行测序分析。结果 HBV基因分型试剂盒检测结果与测序的符合率为100%,湘潭地区HBV各种基因型分布比例:B型占74.74%,C型占11.58%,B、C型混合感染占13.68%。无症状携带者组与慢性重型肝炎组.慢性乙型肝炎组与慢性重型肝炎组及肝硬化组之间HBV B型和C型感染率存在显著性差异,其中慢性重型肝炎组及肝硬化组C型感染率要明显高于其他组。结论 HBV基因分型检测试剂盒检测结果是准确、简便的,具有临床推广和应用价值。湘潭地区流行的HBV基因型主要为B型和C型,其中B型为优势基因型,具有其自身的特点。

关键词： 肝炎,乙型,慢性   肝炎病毒,乙型   共价闭合环状DNA   聚合酶链反应  

摘要： 目的探讨慢性乙型肝炎患者血清乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA(HBV cccDNA)的临床意义。方法选取经肝组织病理学诊断的慢性乙型肝炎患者57例,其中乙型肝炎e抗原(HBeAg)阳性37例,HBeAg阴性20例;肝组织炎症轻度33例,肝组织炎症中度24例。采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)同时定量检测其血清HBVDNA和cccDNA。结果HBeAg阳性组血清HBV cccDNA对数值和阳性率分别高于阴性组,8.1±1.3vs6.5±1.9,73.0%vs30.0%(均P<0.01)。肝组织炎症轻度组(G1～G2)血清HBVcccDNA对数值低于中度组(G3),7.1±0.4vs8.5±0.4(P<0.01)。血清cccDNA与丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶呈正相关(r=0.612、0.632,均P<0.05)。结论血清HBVcccDNA为病毒复制的标志物,与肝组织细胞损伤相关。

关键词： 丙型肝炎   病毒   检测  

摘要： 丙型肝炎病毒(HCV)是输血后肝炎的主要病原体,丙型肝炎易复发和慢性化。检测HCV标志物,可有效地筛选献血员,保证输血安全,降低丙型肝炎病毒感染率。本文就丙型肝炎病毒的检测方法以及其临床意义作一简要概述。

关键词： 肝炎病毒,乙型   膜蛋白质类   抗病毒治疗   阿德福韦酯  

摘要： 目的探讨乙型肝炎病毒表面大蛋白（LHBs）在监测抗病毒疗效上的临床意义。方法跟踪监测46例阿德谲韦酯治疗患者60周，分别采用ELISA法、时间分辨免疫荧光分析法和实时定量PCR法检测患者小同时间的LHBs、HBV血清学标志物和HBV DNA载量，并进行相关性分析。结果LHBs和HBV DNA下降趋势一致，其相关系数r=0．97，但LHBs消退晚于HBV DNA。治疗60周时共有20例患者的HBV DNA〈5×10^2／mL，其中8例LHBs转阴；疗效反复组14例患者HBV DNA转阴后又转阳，3例患者LHBs转阴；治疗无效组12例患者，2例LHBs转阴。结论动态监测LHBs可作为抗病毒治疗效果评价指标的有益补充.

关键词： 肝炎,乙型/诊断   肝炎病毒,乙型/遗传学   蛋白质前体   酶联免疫吸附测定  

摘要： 目的:了解前S1抗原和乙型肝炎病毒(HBV)血清标志物的关系。方法:采用ELISA法检测709例乙型肝炎病毒感染者血清中的前S1抗原和HBV血清标志物。结果:19例HBsAg(+)、HBeAg(+)标本中,有18例前S1抗原阳性,阳性率94.74%;261例HBsAg(+)、HBeAg(+)、抗HBc(+)标本中,有224例前S1抗原阳性,阳性率85.82%;92例HB-sAg(+)、抗HBc(+)标本中,有62例前S1抗原阳性,阳性率67.39%;337例HBsAg(+)、抗HBe(+)、抗HBc(+)标本中,有87例前S1抗原阳性,阳性率25.82%。结论:前S1抗原作为病毒复制的指标与HBeAg具有很好的一致性,又具有其独立的检测价值,可弥补HBV血清标志物检测的不足。