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关键词： 丙型肝炎病毒   基因分型   分子流行病学  

摘要： 目的探索丙型肝炎病毒基因型在山东临沂地区的分布,及其与丙型肝炎的感染途径、性别、年龄、炎症活动度、HCV RNA水平以及肝病程度的相关性。方法采用丙型肝炎病毒基因分型测序法进行基因分型检测。结果临沂地区医院就诊患者抗-HCV阳性率为0.453%,无偿献血人群抗-HCV阳性率0.151%。抗HCV阳性者HCV RNA阳性率为68.7%。主要基因型为2a型(70.77%)、1b型(20.00%),未发现混合基因型。各基因型在年龄、感染途径、ALT水平及肝硬化比例方面差异无显著性。基因1a、1b型的HCV RNA水平均明显高于2a、2b、3a型(P<0.05)。结论临沂地区丙型肝炎病毒基因型以2a型为主,1b型次之;各HCV基因型间在传播途径、年龄、ALT水平及肝病严重程度方面均无明显相关性;基因1a和lb型的病毒含量水平明显高于2a、2b和3a型。

关键词： 手足口病   EV17型   IL-6   TNF-α  

摘要： 目的探讨IL-6及TNF-α在EV71型感染手足口病重症患者、普通患者及正常儿童中的表达与其临床意义。方法收集2010年4月至2011年12月在我院治疗的病例,根据病情对其分组,另取无手足口病儿童作为对照组,借助化学发光法检测IL-6及TNF-α在患者血清的浓度,并进行统计学分析。结果 IL-6及TNF-α在重症患者中显著高表达,较另两组,差异有统计学意义。结论 IL-6及TNF-α可作为诊断和治疗EV71型重症手足口病患者的临床依据。

关键词： 血清C反应蛋白浓度   小儿呼吸道病毒感染   临床诊断  

摘要： 目的进一步探讨血清C反应蛋白浓度在小儿呼吸道病毒感染中的变化及临床意义。方法本文选取2010年11月至2011年11月间入院治疗的222例上呼吸道感染患儿为研究对象,同时选取了75例经检查无感染症状的儿童为对照进行了比较分析。结果四组患儿血清C反应蛋白浓度细菌感染组的75例患儿的检测结果为(55.23±7.24)mg/L;病毒感染组的74例患儿的检测结果为(4.51±1.54)mg/L;支原体感染组的73例患儿的检测结果为(9.13±3.11)mg/L;正常对照组的75例患儿的检测结果为(3.13±1.32)mg/L。组间比较F值为232.31,P<0.05,差异具有统计学意义。3组患儿在治疗后CRP水平均显著下降,且治疗前后比较,P<0.05,差异具有统计学意义。结论血清C反应蛋白浓度对于小儿呼吸道感染病原体的鉴别具有重要的意义,是诊断小儿细菌性呼吸道感染的敏感指标。

关键词： 肝炎,乙型,慢性   肝肿瘤   微RNAs  

摘要： 目的探讨微小RNA(miR)-122和29在乙型肝炎病毒感染相关肝病中的表达水平及其临床意义。方法应用实时荧光定量PCR方法检测肝细胞癌(HCC)患者(20例)、肝炎肝硬化(LC)患者(20例)、慢性乙型肝炎(CHB)患者(15例)、乙型肝炎病毒携带者(ASC)(20例)以及正常对照(NC)(20例)血清中miRNA-122和29的表达水平,结合临床指标进行分析。结果与NC、LC和ASC组比较,HCC和CHB组患者血清中miR-122的表达水平明显升高;与NC比较,LC组患者血清中miR-29的表达水平明显下降,差异均具有统计学意义(P<0.01)。相关分析显示,CHB患者血清中miR-29表达与HBVDNA呈正相关;HCC患者血清中miR-29与AFP呈负相关。结论 miR-122的表达升高与CHB的肝损伤及HCC发生有关;miR-29的表达下降与肝纤维化有关,检测其变化有助于评价乙型肝炎病毒感染者肝脏的炎症损伤和纤维化。

关键词： microRNA-143   生物学标记   癌,肝细胞   诊断  

摘要： 目的探讨血清中miR-143的表达在乙型肝炎病毒感染相关性肝病的诊断及预后评估中的应用价值。方法收集79例慢性乙型肝炎、61例乙型肝炎肝硬化、67例HBV相关性肝癌患者的一般临床资料及血清样本,同时收集30例健康体检者的一般临床资料及血清样本。分别提取各血清样本中的microRNA,再经实时定量PCR检测各血清中miR-143的表达水平,分析miR-143在各组之间的表达差异。结果与健康对照组相比,血清miR-143的表达量在HBV相关性肝癌组中表达量下降,且差异具有统计学意义（P<0.001）,在慢性乙型肝炎组及乙型肝炎肝硬化组中的表达量亦下调,但差异无统计学意义。在区分HBV相关性肝癌组与健康对照组时,受试者工作曲线分析结果显示单用血清miR-143的曲线下面积为0.890（95%CI:0.810;.945）,敏感性为83.6%,特异性为83.3%;单用AFP的曲线下面积为0.836（95%CI:0.742;.907）,敏感性为70.7%,特异性为96.7%;联合血清miR-143与AFP时的曲线下面积为0.945（95%CI:0.875;.983）,敏感性为89.7%,特异性为96.7%。结论血清miR-143有可能成为一种新的无创性HBV相关性肝癌诊断的血清学标记物。

关键词： HBVX基因   乙型肝炎病毒   临床治疗   突变检测   PCR-HRM分析  

摘要： 背景：<br>　　乙型肝炎病毒(HBV)变异株是病毒基因碱基序列与同型的代表株或共有序列比较有独特的变化。HBV的DNA多聚酶由于在DNA复制过程中缺乏校正功能,具有较高突变率。在慢性感染者中,HBV持续承受宿主巨大的免疫压力,更易发生变异,但大多数变异并无实际意义;若变异发生在重要功能的区段内,影响了病毒蛋白质的合成和结构,可使变异的病毒逃避免疫监控,大量复制增殖,致病性增强,导致乙肝慢性化、重症化及致癌化。既往重点对HBV基因组、P基因区、前C及C区的变异研究,而位于HBV基因前C/C区上游约200bp左右的X区(nt1374-nt1838)是目前研究的热点,其含有基本核心启动子(Base Core Promoter,BCP)、核心上游调节序列(Core Upstream Regulation Sequences,CURS)、负性调节元件(Negative Regulation Element,NRE)、增强子Ⅱ(Enhancer,EnhⅡ)和直接重复序列(Direct Repeatsequence,DR)1,2等重要的基因表达调控元件,编码154个氨基酸残基的X蛋白,具有广泛的反式激活作用,在HBV的复制和表达中起重要作用。因此,据上述推测,HBVX基因变异对HBV复制及乙肝患者病程进展起着重要影响。<br>　　目的：<br>　　研究HBVX基因变异对HBV复制情况、乙肝患者病程进展、肝功能的影响及与HBV基因型的关系,为临床治疗乙肝患者及监测病情进展提供理论基础。<br>　　方法：<br>　　根据2005年病毒性肝炎防治方案诊断标准,将168例乙肝患者分为乙型肝炎携带者为29例,慢性乙型病毒性肝炎为70例,肝炎肝硬化31例,乙肝肝癌38例。所有入选患者以无菌操作取新鲜血液4ml。标本离心后分离血清置EP管,放入-70℃低温冰箱保存。采用PCR-HRM分析技术检测血清HBVX基因变异情况;直接测序(或克隆测序)确认变异位点;利用NCBI网站上的genotypetool确定HBV基因型;ELISA检测HBV血清标志物;采用日立7600型全自动生化分析仪检测肝功能指标(ALT、AST、ALB及TBIL);放射免疫技术检测肝纤维化指标(HA、LN、IV-C及PIIIP)。<br>　　结果：<br>　　1.采用PCR-HRM分析技术能很好地区分基因不同位点突变。168例乙肝患者血清HBVX区段突变检出率前五位的位点是nt1764(72.6％)、nt1719(68.5%)、nt1762(67.8%)、nt1727(54.2%)、nt1726(37.5%)及nt1730(37.5%)。<br>　　***基因变异与血清肝脏功能指标无显著性关系(p>0.05,t检验)。在HCC病例组里,BCP双变异联合CP聚集变异与层粘连蛋白(LN)之间差异有统计学差异(p<0.05)。<br>　　***阴性组BCP双变异(nt1762A→T/1764G→A)联合CP聚集变异(nt1719T→C/1726A→C/1727A→T/1730C→G)、nt1755A-C/nt1768T-A双变异的检出率均显著高于HBeAg阳性组(p<0.05)。<br>　　***高水平(105copies/ml≤HBVDNA)BCP双变异联合CP聚集变异、nt1755A-C/nt1768T-A双变异的检出率均显著高于HBVDNA低水平组(103copies/ml≤HBVDNA<1×105copies/ml)(p<0.05)。<br>　　***基因型中BCP双变异、CP聚集变异、BCP双变异联合CP聚集变异及nt1755A-C/nt1768T-A发生率均较B基因型高(p<0.05)。<br>　　***双变异联合CP聚集变异和nt1755A→C/nt1768A→G双变异检出率随着乙肝病程进展有升高的趋势,在乙肝肝癌组中检出率最高。<br>　　结论：<br>　　***-HRM分析在HBV基因突变检测中是一种较新的技术,但此技术对所检测样本要求较高,可能影响其在临床的广泛使用。<br>　　***1755A→C/nt1768A→G双变异是除BCP双变异外新的双位点联合突变。<br>　　***基因变异能导致乙肝患者血清HBeAg表达障碍,同时能提高变异株HBV复制能力,且与HBVC基因型、乙肝患者病程密切相关。<br>　　***双变异联合CP聚集变异能加重乙肝患者病情,趋向肝硬化、肝细胞癌发

关键词： 乙型肝炎病毒   基因型   肝炎类别   临床意义  

摘要： 目的探讨乙型肝炎病毒基因型在临床诊断中的意义。方法将185例确诊的乙型肝炎患者根据临床诊断分为无症状乙型肝炎携带者(ASC)、急性乙型肝炎(AHB)、慢性乙型肝炎(CHB)、肝硬化(LC)、肝细胞癌(HCC)5个疾病组,30例体检健康组作为对照,采用实时荧光定量PCR、PCR-反向点杂交等指标进行测定。结果乙型肝炎病毒基因B、C两组肝病患者中,HBV基因B型占57.8%,基因C型占42.2%,HBV-DNA载量与HBV基因型无明显差异。结论 185例肝病患者以HBAV基因B型为主,C型次之。

关键词： 肺表面活性蛋白A   肠道病毒71型   神经源性肺水肿  

摘要： 目的探讨肠道病毒71型(EV71)感染患儿血清肺表面活性相关蛋白A(SP-A)水平变化及其临床意义。方法选取2011年4至12月河北医科大学附属邢台市人民医院儿科收治的EV71感染的患儿40名,分为普通组18例,重症组14例,危重组8例。同时选取体检健康儿童15名作为正常对照,采用ELISA定量法检测患儿血清SP-A水平的变化。结果普通组和重症组血清SP-A与对照组比较P>0.05,危重组血清SP-A明显高于对照组、普通组及重症组P<0.05。结论通过检测血清SP-A水平,对EV71感染神经源性肺水肿(NPE)早期判断有临床指导价值。

关键词： 乙型肝炎病毒   乙型肝炎病毒表面大蛋白  

摘要： 目的探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者在用恩替卡韦抗病毒治疗过程中血清HBV表面大蛋白(HBV-LP)水平变化的临床意义。方法检测40例CHB患者在用恩替卡韦抗病毒治疗的0、12、24、36、48、72、96周血清中的HBV-LP、HBV DNA、HBeAg水平。结果治疗过程中,HBVDNA载量对数值及HBV-LP吸光度(A)值均下降,且呈正相关(r=0.989,P<0.01)。不同治疗时期HBV DNA阴性患者的HBV-LP A值与HBV DNA阳性患者比较,差异较大。HBV DNA阳性组的HBV-LP A值均值为1.478。以HBV-LP A值≥1.5为界值时,其与抗病毒治疗效果明显相关(P<0.01)。结论在抗病毒治疗过程中,血清HBV-LP与HBV DNA有较好的相关性,可作为新的判断病毒复制的生物指标。

关键词： 肝炎病毒/分离和提纯   实验室技术和方法  

摘要： 丙型肝炎是由丙型肝炎病毒（HCV）感染引起的传染性疾病。其感染呈世界性分布，感染者中约50％～85％呈慢性转化，引起肝脏的慢性炎症坏死和纤维化，部分患者甚至会发展成肝硬化和肝癌，严重危害患者的健康和生命。HCV主要以输血和应用血液制品及性传播为主要传播途径．发病隐匿，症状不典型，病毒的传播不易控制，患者因不能及时诊断而错过治疗的最佳时机。因此丙型肝炎的早期诊断显得尤为重要。目前。实验室检测丙型肝炎病毒的手段主要有四项。