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关键词： 石蜡包埋肝组织   乙型肝炎病毒   共价闭合环状DNA  

摘要： 目前全世界约有3.5亿慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染者[1],每年有约100万人死于乙型肝炎(乙肝)相关肝硬化或肝癌[2]。HBV感染者的临床表现多样化,病毒和疾病活动程度不一,但持续感染的主要原因是肝细胞核内HBV共价闭合环状DNA(covalently closed circular DNA,cccDNA)的存在。HBV cccDNA是HBV复制过程中的重要中间体,是HBV mRNA和前基因组RNA(pgRNA)的合成模板及病毒持续感染的关键因素[3-7]。HBV cccDNA半衰期长,不易降解。

关键词： 手足口病   肠道病毒71型   柯萨奇病毒感染   脑脊髓液  

摘要： 目的 分析肠道病毒71型（EV71）感染手足口病重症患儿的脑脊液特点和临床特征.方法 对杭州市儿童医院2013年5至8月收治的经反转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测EV71阳性的重症手足口病患儿（EV71感染组）114例进行脑脊液常规和生化检查,并与同期入院的其他肠道病毒感染的78例重症手足口病患儿（对照组）脑脊液检测结果作比较,结合临床表现进行分析.计数资料的比较采用x2检验,计量资料的比较采用Mann-Whitney U检验.结果 EV71感染组呕吐（35.1％）和肢体抖动（50.9％）的发生率高于其他肠道病毒组,差异均有统计学意义（x2=7.864和19.682,P＜0.05）;EV71感染组中脑脊液有核细胞计数≥100×106/L的患儿肢体抖动的发生率高于脑脊液有核细胞计数＜ 100×106/L的患儿（72.3％比35.8％,x2=14.740,P=0.000）;EV71感染组脑脊液有核细胞计数和蛋白质定量及阳性率明显高于其他肠道病毒感染组（Z=-9.458和-6.591,P=0.000;x2=105.421和10.932,P=0.000和0.001）.结论 EV71感染重症手足口病患儿神经系统损伤的临床症状及脑脊液检测的异常值较其他肠道病毒感染的重症患儿严重,且EV71感染组脑脊液有核细胞计数越高,肢体抖动越明显.

关键词： 乙型肝炎病毒   基因型   临床意义  

摘要： 慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染是全球性公共卫生问题,慢性HBV感染可导致不同类型的肝病,包括慢性肝炎、肝硬化和肝细胞癌。大量的研究表明,HBV基因组易发生变异,形成不同的基因型,HBV基因型具有明显的地理分布和种族分布特点,它与疾病进展和临床转归有关,不同的基因型对抗病毒治疗的应答也不完全相同,近年来国内外学者从流行病学、分子生物学、临床医学开展了大量的研究,本文就国内外乙型肝炎病毒基因型及其临床意义的研究进展进行了综述。

关键词： 荧光定量   乙型肝炎病毒DNA   PCR检测  

摘要： 乙型肝炎病毒（HBV）引起的传染病称为乙型肝炎.我国是乙型肝炎高发国家,人群累计感染率〉10%[1].HBV血清标志物检测是常用的方法之一,而酶联免疫吸附试验（ELISA）只能提供阴、阳性判断结果,不能提供病毒的具体载量.而对HBV-DNA进行定量检测能直接了解HBV在体内的复制情况及传染性程度,并能对治疗效果、耐药性及是否复发进行动态监测.笔者对538份血清标本的HBV-DNA检测结果与其HBV血清标志物检测结果进行了对比分析,现报道如下.

关键词： 丙型肝炎病毒   基因型分布   1   b基因   温州  

摘要： 目的探讨温州地区丙型肝炎病毒感染者基因型分布特征及其临床意义。方法收集2010年1月～2012年12月温州市中心血站自愿献血者244例，其中，HCV感染经ELISA方法证实为HCV抗体阳性者122例，健康者122例，收集同期来温州地区某医院门诊肝病患者122例，所有对象均静脉采血，HCVRNA提取，AMV反转录，并采用巢式PCR扩增对研究对象进行HCV—RNA的检测及基因分型。结果门诊肝病患者1b总阳性率为100．0％，HCV抗体阳性者1b总阳性率为95．9％，健康者lb总阳性率为0．0％，三者比较，差异有统计学意义（x2=10．28，P〈0．05）。122例肝病患者中1b型所占比例最高，且在重度病变及肝硬化患者中占比最高（P〈0．05），不同肝病程度间比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论温州地区HCV的基因型以1b型占优势，由1b型感染所致疾病的病情较为严重。

关键词： 乙型肝炎病毒   基因型   荧光定量PCR   分布   临床意义  

摘要： 目的了解泰兴地区乙型肝炎病毒(HBV)基因型分布情况,探讨HBV基因型与临床的相关性。方法选择HBV慢性感染者138例,其中慢性乙型肝炎(CHB)病例113例,肝硬化病例25例,采用荧光定量PCR法测定HBV基因型,并结合临床资料进行统计学分析。结果 138例病例中,基因B型46例(33%),C型89例(65%),B/C混合型1例(0.7%),非B非C型2例(1.4%);CHB组中,B、C基因型在ALT、HBV DNA、HBeAg阳性率差异无统计学意义(P>0.05);C基因型在CHB重度占77%、肝硬化中占80%,B基因型在CHB重度占20%,肝硬化中占20%,C基因型在CHB重度、肝硬化中比例明显升高。结论本地区HBV基因型中以C型为主,其次为B型,有少量B/C混合型及其他类型,C基因型往往较B基因型病情严重。

关键词： 乙型肝炎病毒   表面抗原   持续病毒学应答  

摘要： 型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）感染的慢性化是我国卫生健康管理的主要问题之一,截至2009年,全球约有3.5亿慢性HBV感染者,而我国现有的慢性HBV感染者约为9300万人,其中慢性乙型肝炎（CHB）患者约2000万例[1].我国可用于治疗CHB的药物有干扰素及口服核苷（酸）类药物（NAs）,但合适的治疗终点并不明确,目前亚太肝病组织与欧洲肝病协会的HBV管理指南[2~4]推荐将HBsAg转阴作为CHB治疗的理想终点,并推荐HBsAg转阴后可停药,推荐意见赋予了这个古老的HBV病毒标志物新的临床意义.

关键词： HPV   E6/E7 mRNA   宫颈病变   bDNA法  

摘要： 目的探讨人乳头瘤病毒（HPV）癌基因E6/E7 mRNA检测在宫颈病变中的临床意义。方法收集郑州大学第三附属医院行宫颈液基薄层细胞学（TCT）检查,且经第二代杂交捕获法（HC2）证实HPV DNA阳性的患者280例,采用QUANTIVIRUS?HPV E6/E7 mRNA3.0 Assay（bDNA）法检测宫颈脱落细胞中HPV癌基因E6/E7 mRNA水平,并随访其组织病理结果。结果 280例患者的细胞学结果:未见上皮内病变或恶性细胞（NILM）27例（9.64%）,非典型鳞状上皮细胞（ASC）94例（33.57%）,低度鳞状上皮内病变（LSIE）70例（25.00%）,高度鳞状上皮内病变（HSIL）67例（23.93%）,鳞癌（SCC）22例（7.86%）。不同细胞学诊断级别间HPV癌基因E6/E7 mRNA水平比较,差异具有统计学意义（F=2.827,P=0.025）,病变组（ASC、LSIL、HSIL、SCC）HPV癌基因E6/E7 mRNA水平均显著高于NILM组（*P=0.000、**P=0.000、***P=0.016、****P=0.022）。随宫颈细胞学病变程度加重,HPV癌基因E6/E7 mRNA表达增高;280例患者有1 84例追踪到组织学结果:慢性宫颈炎5 1例（27.72%）,宫颈上皮内瘤样病变I级（CIN I）46例（25.00%）,宫颈上皮内瘤样病变Ⅱ级（CINⅡ）25例（13.59%）,宫颈上皮内瘤样病变Ⅲ级（CINⅢ）30例（16.30%）,SCC 32例（17.39%）。不同组织学诊断级别组间HPV癌基因E6/E7 mRNA水平比较,差异显著（F=2.682,P=0.033）,病变组（CIN I、CINⅡ、CINⅢ、SCC）HPV癌基因E6/E7 mRNA水平均显著高于慢炎组（*P=0.016、**P=0.025、***P=0.007、****P=0.039）。随宫颈组织学病变程度加重,HPV癌基因E6/E7 mRNA表达水平增高;将细胞学病变程度和组织学病变程度分别与HPV癌基因E6/E7 mRNA水平进行spearman等级相关分析,相关系数,分别为0.188（P=0.001）与0.582（P=0.000）。结论 bDNA法可定量检测TCT标本中HPV癌基因E6/E7 mRNA;HPV癌基因E6/E7 mRNA表达很可能促进宫颈病变的发生发展,对分流感染HPV及细胞学阳性患者有较好的临床应用前景。

关键词： 广西地区   丙型肝炎病毒   基因型   系统进化树  

摘要： 目的了解广西地区丙型肝炎病毒（Hepatitis C Virus,HCV）基因型的分布特征，探讨HCV基因型与民族、性别、年龄、感染途径及HCN-RNA载量的关系。 方法收集广西地区2011年2月～2013年5月158例HCV-RNA阳性患者的血清，采用逆转录巢式PCR(RT nested-PCR)法扩增HCV NS5B区段,对PCR产物进行纯化后测序，测序结果与Genbank中已注册的标准株全基因序列比对共同构建系统进化树;分别分析HCV基因型与民族、性别、年龄、感染途径及HCN-RNA载量的关系。 结果158例样本中，共有150例成功扩增并分型，分型结果显示：广西地区HCV基因型以1b型为主，占54.7%(82/150)，其次是6a型占13.3%（20/150）、1a型占10%（15/150）、3b型占9.3%（14/150）、2a型占6.7%（10/150）、3a型占5.3%（8/150）、6d型占0.7%（1/150）。分析表明，HCV基因型与民族、性别无明显相关（P＞0.05），而与年龄、感染途径及HCV-RNA载量相关（P＜0.05）。HCV基因6型有21例（20例6a亚型，1例6d亚型），占分析总数14%（21/150）。进化分析表明，广西地区HCV6型病毒株与来自越南的标准株在进化上相似。 结论1、构建HCV NS5B区段系统进化树能得到准确的HCV基因型和亚型;2、包括早期报道的2b、6b亚型，广西地区目前至少存在9种HCV基因亚型，本研究检出7种亚型（1a、1b、2a、3a、3b、6a、6d），其中以1b型为主,6a型次之;3、较以往的研究报道，1b型的流行率似乎呈下降趋势，而6a型的流行率似乎逐渐上升;4、1b型多见于≥40岁的患者，主要通过输血感染，其HCV-RNA载量高于其它基因型，3型与6a型多见于有静脉药瘾史的年轻患者;5、随着感染途径的变迁，HCV基因型的分布也将发生改变;6、广西地区HCV6型病毒株与越南标准株进化距离很近，有很高的同源性。

关键词： 丙型肝炎病毒   ANA   自身抗体  

摘要： 目的探讨丙型肝炎病毒(HCV)感染者血清自身抗体情况及临床意义。方法采用间接荧光法检测120例HCV感染者及50例健康体检者血清中抗核抗体(ANA)及抗平滑肌抗体(SMA),采用酶联免疫吸附法检测抗线粒体抗体M2型(AMA-M2),采用散色比浊法测类风湿因子(RF),采用印迹法检测抗可溶性肝抗原/抗肝胰抗原抗体(SLA/LP)、抗肝肾微粒体抗体I型(LKM-1)、抗肝细胞浆抗体I型(LC-1)。结果 (1)120例HCV感染者中有54例自身抗体阳性,自身抗体阳性率为45.0%(54/120),高于正常对照组的4.0%(2/50)(χ2=26.86,P<0.05);(2)HCV阳性携带组、肝炎组、肝硬化组各组自身抗体阳性率分别为42.5%(17/40)、40.0%(16/40)、52.5%(21/40),组间比较χ2=1.41,P>0.05,差异无统计学意义;(3)自身抗体ANA、SMA、AMA-M2和RF的阳性率分别为31.7%(38/120)、9.2%(11/120)、11.7%(14/120)、5.0%(6/120);(4)ANA滴度以1︰100为主,荧光类型以"胞浆型"、"颗粒型"为主;(5)对ANA滴度≥1︰320的进行肝谱分析,HCV携带组有1例、肝炎组有1例、肝硬化组有2例AMA-M2阳性,说明部分HCV感染者合并自身免疫肝病;(6)自身抗体阴性组和阳性组TBIL和γ-GT比较,P<0.05,差异有统计学意义,表明自身抗体在肝功能破坏方面起一定的作用。结论 HCV感染者体内存在多种自身抗体,并由于自身抗体的存在造成肝功能进一步损伤,特别是合并自身免疫性肝病的个体应引起临床医生的高度重视。