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关键词： 乙肝病毒   肝炎   乙型   慢性   肝肿瘤   微RNA  

摘要： 目的：探讨乙型肝炎病毒感染相关肝病中miRNA139的表达情况及其临床意义。方法：应用实时荧光定量PCR方法检测慢性乙型肝炎（CHB）患者（20例）、慢性乙肝肝硬化（LC）患者（20例）、原发性肝癌（HCC）患者（20例）及正常对照（NC）（20例）组外周血单核细胞中miRNA139的表达水平，结合临床指标进行分析。结果：与NC组比较，CHB组和LC组患者外周血中miRNA139的表达水平下调不明显，没有显著差异（P〉0.05）；与NC组、LC组和CHB组比较，HCC组患者外周血中miRNA139的表达水平明显下调，差异具有统计学意义（P＜0.01）。HCC患者外周血中miRNA139的表达与AFP呈负相关。结论：HCC组患者外周血中miRNA139的表达水平明显下降，提示miRNA139的下调可能与HCC的发生有关。

关键词： 人乳头瘤病毒   宫颈鳞状上皮病变   临床  

摘要： 随着人们健康意识的提高及宫颈细胞液基制片技术及TBS(the Bethesda System)报告方式的普及,大量宫颈细胞学异常患者被筛查出来,由于缺少可靠预后判断指标,地区间、医院间甚至同一医院不同临床医生间对这部分患者的处理原则、疾病的转归以及预后的判断都存在很多差异;随着人乳头瘤病毒(HPV)在宫颈鳞状上皮病变(CIN)及宫颈癌中的作用被确认以来[1,2],HPV L1壳蛋白的检测在CIN病变中的转归及预后的判断方面的作用越来越受到重视。目前相关研究在国内尚不多见,我们旨在通过在宫颈细胞涂/切片上检测HPV L1壳蛋白,分析在CIN病变不同阶段HPV L1壳蛋白表达的差异,探讨其在判断CIN在转归、预后和选择临床处理原则中的价值。

关键词： 鼻   内翻乳头状瘤   人乳头瘤病毒   聚合酶链式反应  

摘要： 目的探讨人乳头瘤病毒(HPV)感染在鼻内翻性乳头状瘤(NIP)中的表达及意义,为临床治疗提供可靠的科学依据。方法应用聚合酶链式反应(PCR)技术对54例原发组、26例复发组及24例恶变组NIP标本进行HPV 11、16及18检测分析。结果恶变组高危型HPV感染率明显高于原发组和复发组(P<0.01),复发组高危型HPV感染率明显高于原发组(P<0.05);原发组和复发组中,高危型HPV感染者多数存在局部上皮中重度异型增生或局部细胞增生活跃;发生于鼻腔外侧壁组高危型HPV感染率均高于上颌窦、筛窦及额窦组(P<0.05)。结论检测高危型HPV16/18在NIP中的表达状况对NIP的治疗及判断复发和恶变可能具有重要的临床应用价值。

关键词： 病毒感染者   临床意义   表达差异   细胞样   抑制细胞   丙型肝炎   T淋巴细胞功能障碍   慢性HCV感染  

摘要： HCV持续感染与机体免疫功能损伤密切相关，其中，细胞免疫中的T淋巴细胞功能削弱与慢性HCV感染的关系最为密切。目前已有研究显示，HCV感染引起的CD4^＋和CD8^＋T淋巴细胞功能障碍可能与DC介导的抗原提呈功能缺陷、调节性T淋巴细胞（Treg）异常增多、

关键词： 重庆   肝炎病毒,丙型   HCV   RNA   基因型  

摘要： 目的:了解重庆地区近年来丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)基因型分布、演变和可能的临床意义,为更好防治丙型肝炎提供依据。方法:回顾性研究2010年1月至2013年12月期间在重庆医科大学附属第二医院就诊并有基因分型结果的丙型肝炎患者的基因型分布,并与该地区其它文献报道的数据相比较,探讨基因型演变的可能影响因素。结果:共收集941例HCV感染者,检出4种基因型、9种基因亚型,成功进行基因分型有857例(均为单一基因型,分型率91.1%)。其基因型分布为:1a 30例(3.5%)、1b 238例(27.8%)、2a 42例(4.9%)、2b 1例(0.1%)、3a 132例(15.4%)、3b 244例(28.5%)、3k 6例(0.7%)、6a124例(14.5%)、6b 40例(4.7%)。与5年前的结果比较发现HCV 1b、2a亚型明显下降,3型、6型比例上升,差异具有统计学意义。结论:3b、1b型为目前重庆地区丙型肝炎患者感染HCV的主要基因型,3a、6a型亦占有较大比例,提示重庆地区HCV流行的基因型呈现多样性。

关键词： 肠杆菌科耐药性进化   碳青霉烯类耐药肠杆菌科   耐药机制   检测方法  

摘要： 自1941年世界上第一种抗菌药物青霉素在临床感染治疗中被广泛应用后,第2年便检出了青霉素耐药菌株。虽然以后一直有研究学者不断研制出各种类型的抗菌药物,至今为止,用于治疗细菌感染的抗菌药物已有几百余种,但这些药物应用于临床后,不管是革兰阳性菌还是革兰阴性菌都陆续多少出现了耐药机制更为复杂的耐药菌株。

关键词： 肺炎克雷伯菌   败血症   噬菌体   生物学特性   噬菌体治疗  

摘要： 目的自地下生活污水中分离肺炎克雷伯菌的噬菌体,明确其生物学特性,观察其对小鼠多重耐药肺炎克雷伯菌所致败血症的疗效。方法电镜观察LH-01形态,调查其噬菌谱、生长曲线等生物学特性。建立小鼠败血症感染模型,观察LH-01的疗效。结果 LH-01在其宿主菌的菌苔上形成毒性噬菌体所具有的完全透明的噬菌斑,电镜观察LH-01具典型的有尾噬菌体目短尾病毒科病毒的形态特征。一步生长曲线显示LH-01的潜伏期约为10min,裂解量约为100PFU/细胞。稳定性试验显示LH-01在pH 5~10及50℃和60℃环境均具良好稳定性。LH-01治疗克雷伯菌感染败血症小鼠的存活率为90%,对照组存活率为0,差异有统计学意义（P〈0.001）,且无毒副作用。结论 LH-01具有高效的裂菌活性和高稳定性,治疗克雷伯菌感染小鼠败血症有效且安全,有望成为生物抗菌剂,其有效成分有待进一步研究。

关键词： 微量元素   乙肝   铁   锌   谷丙转氨酶  

摘要： 目的：探讨血清微量元素与乙型肝炎病毒感染的关系。方法收集235例乙型肝炎病毒感染患者，根据疾病进展分为慢性乙肝携带者组、肝硬化组、肝癌组和50例健康对照者，采用罗氏生化分析仪进行血清钙、镁、铜、锌、铁、谷丙转氨酶的测定。结果慢性乙肝携带者组、肝硬化组、肝癌组血清铜含量高于健康对照组，差异有统计学意义(<0.05)，慢性乙肝携带者组、肝硬化组、肝癌组血清锌、铁、镁含量低于健康对照组，差异有统计学意义(<0.05)。血清钙与健康对照组比较差异无统计学意义(>0.05)，乙型肝炎病毒感染患者血清锌、铁、铜与谷丙转氨酶存在相关性(<0.05)。结论血清微量元素与乙型肝炎病毒感染存在一定的关系，血液中保持合理平衡的微量元素对于肝脏的保护具有积极作用。

关键词： 乙型肝炎   表面抗原   定量检测   临床意义  

摘要： 目的：对乙型肝炎患者乙肝病毒表明抗原进行定量检测，探讨其对乙型肝炎病毒复制情况的临床意义。方法选取本院自2014年4月~11月收治的110例乙型肝炎患者治疗前的血清样本为主要研究对象，根据表面抗原含量多少分为5组，对其应用化学发光法进行乙型肝炎表面抗原的定量检测以及HBV-DNA检测，血清学标志物检测，对比测算HBsAg含量，并计算HBV-DNA阳性率，观察两者之间关系。结果发现HBsAg的含量和DNA阳性率成正相关。结论血清中HBsAg含量，可以间接反映出患者体内HBV-DNA情况，进而反应乙肝病毒复制的活跃程度。

关键词： HCC   HBV   HBx   多态性   亚型   预后分析   整合   细胞增殖  

摘要： 在消化系统疾病中,原发性肝细胞癌(Hepatocellular Carcinoma,HCC)是肝脏疾病中严重威胁人类生命健康的常见恶性肿瘤,其在全球的病死率排名第二。病毒性肝炎、肝硬化、黄曲霉毒素、饮用水污染及遗传因素等均是常见的诱癌因素。与欧美国家因饮酒过量导致的酒精性肝硬化是肝癌的主要病因不同的是,在我国由乙型肝炎病毒(Hepatitis B Virus,HBV)触发的慢性乙型肝炎和肝硬化是肝癌最主要的致病因素。据流行病学调查,在我国患有慢性乙型肝炎的患者约有1亿左右,而由HBV相关性疾病引起的死亡每年约有50万左右,因此深入研究HBV在肝癌发生、发展中的作用及机制对降低肝癌发生率和死亡率有着重要而深远的意义。HBV是嗜肝属不全双链环状DNA病毒,当其感染宿主后可在肝细胞内生长繁殖,同时激活免疫系统引起肝脏炎症反应,并通过基因片段整合和反式激活作用等多种复杂机制最终导致了肝癌的发生和发展。乙型肝炎病毒X基因(Hepatitis B Virus X Gene,HBx)是HBV四个开放阅读框中最小的非结构基因,由452-465个碱基组成,其直接参与HBV的感染、复制过程。研究证实HBx蛋白可通过广泛的反式激活作用调控宿主细胞多条信号传导通路,从而影响细胞凋亡、细胞周期、细胞增殖、细胞自噬和迁移能力等多种生物学过程。此外,多项全基因组测序数据显示HBV整合在宿主基因组上的片段约80%均是HBx片段,因此HBx还可通过由片段整合引起的基因组不稳定性、癌基因的激活、抑癌基因的失活等效应诱发肝癌。HBV的复制需进行反转录,在此过程中易发生DNA序列的变异。根据HBV的变异程度可将其分为8种亚型(A-H型)及不同的准种,这些不同HBV序列所携带的HBx DNA序列均不同。此外,HBx还可分为ayw, adr, adw, ayr四种不同的血清型。HBx序列本身也存在着点突变、C端截断突变和缺失突变三种突变形式。这些证据表明HBx DNA序列存在多态性。HBV多种亚型及HBx基因型均可影响HCC的发生和发展,表明HBx多态性在HCC的进程中可能存在重要的生物学功能。因此,系统的研究HBx多态性现象,进一步挖掘其可能的生物学作用及临床意义,可为HCC的防治提供新的证据和方向。第一部分HBV相关HCC患者HBx基因多态性分析及临床相关性研究目的：检测HBV相关HCC患者HBx基因的多态性并进行临床相关性分析,寻找具有临床意义的HBx亚型。方法：搜集多中心HBV相关HCC患者癌及癌旁组织、血清及临床资料,并对患者进行长期随访。抽提癌、癌旁组织及血清样本中基因组DNA,采用巢式PCR扩增HBx片段并进行测序。利用Molecular Evolutionary Genetics Analysis 6.05(MEGA6.05)和Cluster 3.0软件寻找差异位点并进行聚类分析。采用χ2检验、Kaplan-meier法、Log-rank检验统计分析各种多态性类型的临床意义。结果：1、HCC患者癌和癌旁组织中分别获得准确的HBx序列：287例患者癌中获得213条、癌旁中获得268条准确的HBx序列,癌旁中更容易获得HBx序列;2、癌组织中的HBx序列与癌旁中的不完全相同：其中癌和癌旁HBx完全相同占39%,不同的占61%,且不同的序列中差异位点较分散、无规律;3、癌和癌旁组织的HBx多态性大体可分为三型：我们将聚类分析显示的287例HCC队列中的HBx亚型分别命名为EHBH1、EHBH2和EHBH3;4、携带有HBx亚型EHBH2(以下简称HBx-EHBH2)的患者预后较好,且与多项临床指标相关：HCC患者(癌和癌旁)携带有HBx-EHBH2的总体生存率(OS)较高(癌,P=0.042;癌旁,P=0.041),且其在癌组织中HBx-EHBH2与肿瘤包膜相关(P=0.002),在癌旁组织中HBx-EHBH2与肝硬化(P=0.000)、TNM分期(P=0.033)、肿瘤包膜(P=0.010)、子灶(P=0.012)相关;5、验证队列证明HBx-EHBH2的存在并与患者预后相关：不同地区的HCC患者队列表明携带HBx-EHBH2的患者有预后较好的趋势;6,血清中HBx DNA序列与癌旁中的相同;7,血清中的HBx-EHBH2与患者预后相关：外周血中携带HBx-EHBH2的患者总体生存率较高(P=0.032)。结论：HCC患者癌和癌旁组织中HBx基因均存在多态性且不完全相同;HBx亚型EHBH2在HCC进程中有着重要的临床意义。第二部分HBx亚型EHBH2在人基因组整合的系统分析目的：研究HBx-EHBH2在人基因组整合的特点,对整合频率和位点进行相关分析。方法：利用HVID(High-throughput Viral Integration Detection