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关键词： 表面活性素   高效合成   基因工程   理性设计  

摘要： 表面活性素是由芽孢杆菌属微生物次级代谢所产生的一类脂肽,具有多种生物活性,在食品、医药、日化、采油和生防等多个领域具有广阔的应用前景。但天然菌株产表面活性素效率低、生产成本高,严重限制了表面活性素的实际应用。对微生物表面活性素的结构性质、应用效果、合成途径调控进行了简要阐述,重点综述了提升其产量的多种策略,并对其高效生产和应用前景进行了展望。

关键词： 专利即时影响力   专利影响域   专利活跃度   同族专利   基因工程  

摘要： [目的/意义]在基因工程等新兴领域技术更迭尤为迅速,如何及时、准确地识别高影响力技术对捕捉技术机会、跟踪技术热点、分析技术演化都具有重要参考价值。[方法/过程]基于引文网络方法,引入影响域来揭示技术影响力扩散的范围,在空间上将评估范围从直接关系扩展到间接关系;引入活跃度来揭示技术影响力持续的时间,在时间上考虑了专利年龄和技术贡献的持久性,从空间和时间两个层面构建专利即时影响力指数。[结果/结论]从基因工程领域的技术成长期中筛选出40件高影响力专利,专利影响力评价结果与领域实际发展现状吻合。利用专利即时影响力指数不仅可以及时、准确捕捉到领域内现阶段的高影响力技术,还可以挖掘出基因工程在新冠肺炎疫情大背景下的整体研发热点的转变。[局限]从技术生命周期的角度来看,该指标适用于技术成长期的专利即时影响力评价。

关键词： 胰岛素基因   乳糖酶基因   工业用酶   受体细胞   编码蛋白质   基因工程   抗除草剂基因   目的基因  

摘要： 一、目的基因和标记基因在基因工程的设计和操作中,用于改变受体细胞性状或获得预期表达产物等的基因就是目的基因,主要是指编码蛋白质的基因,如与生物抗逆性(抗旱基因等)、生产药物(人的胰岛素基因等)、毒物降解(抗除草剂基因等)、工业用酶(淀粉酶基因等)等相关的基因以及与优良品质相关的基因(肠乳糖酶基因等).

关键词： 重组人α-半乳糖苷酶   法布雷病   酶替代疗法   悬浮CHO-S细胞   溶酶体贮积症   基因工程  

摘要： 目的 运用无血清可高密度悬浮培养的中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary cells, CHO-S)表达体系,分泌表达并纯化重组人α-半乳糖苷酶(recombinant human α-galactosidase A, rhα-Gal A),验证其对法布雷病贮积底物神经酰胺三己糖苷(globotriaosylceramide, Gb3 or GL3)的清除效果。方法 构建人α-半乳糖苷酶基因gla融合6×His标签的表达载体pcDNA4-GLA,将其转染至悬浮CHO-S细胞中,表达纯化并检测rhα-Gal A糖基化形式、表达量及酶活性;通过与人皮肤成纤维细胞共孵育,观察rhα-Gal A是否能被摄取到胞内并有效清除Gb3。结果 研究结果显示,rhα-Gal A成功在CHO-S细胞中表达,表达量最高可达(100±20.6) mg·L^(-1),且rhα-Gal A被糖基化修饰,酶活与商品酶Fabrazyme酶活相近,为(59±9.1) kU·g^(-1);此外,rhα-Gal A能被有效摄取到人成纤维细胞胞内并靶向溶酶体进而有效清除Gb3。结论 利用瞬时转染技术在悬浮CHO-S细胞中成功表达并纯化出rhα-Gal A,具有良好的生物学活性且可有效清除Gb3,为我国法布雷病的酶替代疗法提供新的选择。

关键词： 多囊卵巢综合征   间充质干细胞   外泌体   诱导多能干细胞   胚胎干细胞  

摘要： 干细胞治疗在医学领域发展迅速且应用日益广泛。在基础研究和临床试验中,干细胞治疗多种生殖系统疾病均显示良好效果。近年来不同来源的间充质干细胞(MSCs)在多囊卵巢综合征(PCOS)治疗中取得一系列研究进展。本文总结了MSCs及其外泌体治疗PCOS的机制,包括调节激素和糖、脂代谢,抑制炎症反应和调节免疫功能,归巢效应以及促血管生成,改善排卵与生殖潜能等。回顾了诱导多能干细胞(iPSCs)和胚胎干细胞(ESCs)在PCOS实验研究进展,为干细胞在PCOS的临床研究与应用提供探索思路。

关键词： 猪圆环病毒2型   佐剂   疫苗   攻毒  

摘要： 为筛选适合猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)基因工程亚单位疫苗的佐剂,将重组的PCV2 Cap蛋白抗原与佐剂混合,分别制备氢氧化铝胶佐剂、ISA 15A VG佐剂和IMS 251C VG佐剂疫苗,并选择PCV2阴性仔猪(14日龄)开展动物安全性检验和免疫效力检验。安全性检验结果显示:3组免疫高剂量(2倍免疫剂量)佐剂疫苗的仔猪在免疫后14 d内,精神、食欲、呼吸均正常,注射部位及其周围组织未见异常,仅IMS 251C VG佐剂组有2头仔猪出现发热症状(1~2 d)。免疫效力检验结果显示:3种佐剂疫苗免疫攻毒组仔猪免疫当天(接种前)PCV2抗体均为阴性,免疫第28天抗体均为阳性,其中ISA 15A VG佐剂组、IMS 251C VG佐剂组仔猪抗体S/P值均显著高于氢氧化铝胶佐剂组(P<0.05),均极显著高于空白对照组(P<0.01);于免疫第28天进行攻毒实验,攻毒对照组100%(5/5)发病,氢氧化铝胶佐剂组60%(3/5)保护,ISA 15A VG佐剂组和IMS 251C VG佐剂组均100%(5/5)保护。结果表明:ISA 15A VG是PCV2基因工程亚单位疫苗的适宜佐剂。

关键词： 英文文献   生物技术领域   人类基因组计划   生态知识   生物医疗   生物科技   阅读分析   英文文章  

摘要： 随着生物学研究的不断深入,生物技术这门新兴学科逐渐受到人们关注。很多科学家积极开展相关领域的研究探索,以期掌握更先进的生物医疗技术,进一步推动人类健康水平的提升。阅读分析生物技术领域的英文文献资料是相关研究重要的前提条件,也是人们了解国际生物学研究信息以及相关技术成果的关键渠道。由贾洪波、孙兴参、赵晓东和王巍编著、哈尔滨工程大学出版社出版的《生物技术英语》一书,精选生物科技领域的英文文章,详细阐述生物技术方面的最新成果以及基础知识,兼具理论性与实用性,既贴合生物英语的科技性,提供了专业的科技英语词汇参考,而且用英文对转基因、人类基因组计划、环境生态知识等进行详细介绍,具有良好的参考价值。

关键词： 三氧化二砷   胚胎干细胞   中胚层分化   TET2   甲基化  

摘要： 目的研究三氧化二砷(ATO)调节胚胎干细胞(ESC)的中胚层分化和分化相关基因的表达。方法构建10-11易位2蛋白(TET2)的敲低慢病毒载体(shTET2)和过表达慢病毒载体(pVd-TET2),阴性对照分别为shNC和pVd-null,并转染培养的ESC细胞(CGR8)。使用ATO联合pVdTET2处理CGR8。细胞分为对照组、ATO、shNC、shTET2、ATO+pVd-null、ATO+pVd-TET2。Western blot检测以上各组ESC干性蛋白Nanog、Oct4、Rex-1,分化相关蛋白AFP、cleaved-CASP3、PARP-1(p85),中胚层标志物APOA1、EOMES,及外胚层标志物PAX6、TFAP2B、ZIC1的表达量。免疫缺陷小鼠体内注射ATO、shNC、shTET2处理的CGR8细胞,10周后,免疫组织荧光法检测小鼠畸胎瘤组织中Nanog的阳性率。结果ATO抑制CGR8细胞的增殖率,增加Nanog甲基化水平,上调ESC干性蛋白和外胚层标志物的表达,下调TET2以及分化相关蛋白和中胚层标志物的表达量(均P<0.05)。在CGR8细胞中沉默TET2后表现出于ATO一致的结果。然而,与ATO+pAd-null组比,ATO+pVd-TET2组降低Nanog甲基化水平,下调ESC干性蛋白和外胚层标志物的表达,上调TET2以及分化相关蛋白和中胚层标志物的表达量(均P<0.05)。ATO和shTET2细胞都抑制体内畸胎瘤中Nanog的标记的中胚层分化(均P<0.05)。结论ATO通过抑制TET2促进Nanog甲基化并抑制中胚层的分化。

关键词： 聚合酶链式反应   半保留复制   医用价值   PCR技术   DNA复制   基因工程   核苷酸序列   分子生物学  

摘要： PCR是聚合酶链式反应的简称。它是一项根据DNA半保留复制的原理,在体外提供参与DNA复制的各种组分与反应条件,对目的基因的核苷酸序列进行大量复制的技术。该技术具有简便、快速、灵敏等特点,虽然问世时间不长,但已成为分子生物学中强有力的工具之一,在许多新的领域都有应用。1.获取和扩增目的基因【例1】(2016年天津卷,第7题节选)人血清白蛋白(HSA)具有重要的医用价值,只能从血浆中制备。

关键词： 产业化应用   转基因农作物   农作物产量   转基因作物   转基因生物   农业生态环境   代际特征   第一代产品  

摘要： 自1996年首例转基因农作物产业化应用以来,全球转基因技术研究与产业应用快速发展。品种培育呈现代际特征,目前全球转基因生物新品种已从抗虫和抗除草剂等第一代产品,向改善营养品质和提高产量的第二代产品,以及工业、医药和生物反应器等第三代产品转变。转基因作物的种植不仅提高农作物产量,并且通过减少农药、化肥的使用,在改善农业生态环境方面也显示出巨大的优势。