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关键词： 科学隐喻   多元文化政策   种族文化悖论   认知共鸣  

摘要： 扎迪·史密斯善用隐喻进行创作,《白牙》是其小说创作中科学隐喻运用最为突出的一部。这些科学隐喻不仅丰富了文学创作的语言,也折射出20世纪末科学技术发展对作者的认知与文学创作带来的影响。透过21世纪小说中呈现的科学隐喻应用现象,可以看到作家与读者因共享科技文化背景而产生的认知共鸣,这为史密斯传达对英国社会的多元文化政策的思考和探寻种族文化悖论提供了可能。同时,小说中移民群体的困惑与无奈,能得到深陷种族文化悖论的现实读者的情感认同,实现小说文本的移情效果。

关键词： 表观遗传   基因工程   主题式命题法   科研论文  

摘要： 以一道采用科研论文和大学教材内容为背景的基因工程原创试题为例,阐述主题式试题的命制过程,探讨试题的命制方法和策略。该题以“表观遗传”为主题,结合高中教材基因工程模块相关知识,注重考查必备知识、关键能力和核心素养,引导学生形成健康的生活方式,增强健康意识,落实立德树人根本任务。

关键词： 大豆   抗旱性   基因工程   蛋白激酶   转录因子  

摘要： 干旱严重影响大豆的生长发育、产量及品质,应用基因工程技术进行大豆抗旱育种,提高大豆抗旱性,是保障大豆生产的重要措施。在植物抵御干旱胁迫的过程中,基因调控发挥重要作用。目前已证实,调控大豆抗旱性的植物调节基因主要有蛋白激酶基因和转录因子基因两类。蛋白激酶基因主要包括编码CIPK[CBL(Calcineurin B-like protein)-interacting protein kinase]和RLK(Receptor-like protein kinases)的基因。转录因子基因主要包括编码AP2/ERF(APETALA2/ethylene-responsive element binding factor)、bZIP(Basic leucine zipper)、NAC[NAM(No apical meristem)、ATAF1(Arabidopsis transcription activation factor 1)、ATAF2、CUC2(Cup-shaped cotyledon 2)]、NFY(Nuclear factor Y)、锌指蛋白和MYB(Myeloblastosis)的基因。本文综述了植物调节基因在大豆抗旱基因工程中的应用新进展,并对该领域存在的问题进行分析,以期为大豆抗旱遗传改良和育种提供参考。

关键词： SUPT6   CRISPR/Cas9   dTAG   胚胎干细胞  

摘要： 目的:利用降解TAG系统(dTAG)建立靶向SPT6同系物、组蛋白伴侣和转录延伸因子(SUPT6)的dTAG细胞系,诱导内源性SUPT6的急性降解。方法:设计靶向小鼠Supt6的向导RNA并构建PX459-PITCh-Supt6 sgRNA和Supt6-dTAG供体质粒;将载体转入小鼠胚胎干细胞V6.5细胞系中并进行药物筛选,对筛选后的单克隆进行基因型鉴定及测序分析;CCK-8法及碱性磷酸酶染色检测阳性克隆的增殖与分化;使用dTAG-13诱导阳性克隆SUPT6蛋白的降解并进行免疫印迹实验验证;碱性磷酸酶染色评估阳性克隆中SUPT6降解对干细胞多能性的影响。结果:成功设计并构建靶向Supt6向导RNA和dTAG供体载体;筛选获得插入dTAG标签的阳性克隆;插入dTAG标签不影响细胞的增殖与分化功能(F=0.01419,P>0.05);dTAG-13成功诱导Flag标签标记的内源性SUPT6降解(F=617.5、372.4,均P<0.001),且撤药后Flag标签标记的SUPT6水平逐渐恢复(F=410.9、226.8,均P<0.001);阳性克隆中SUPT6降解导致干细胞多能性下降。结论:构建的SUPT6-dTAG细胞系能够实现内源性SUPT6的急性可逆降解。

关键词： 转基因作物   RPA反应   荧光可视化   现场检测   快速提取  

摘要： 随着我国转基因玉米和转基因大豆的商业化种植,为了保证我国生物育种产业的健康发展,迫切需要开发转基因玉米和大豆的现场快速检测技术。本研究针对转基因玉米和大豆现场快速检测技术的不足,提出了一种基于重组酶聚合酶扩增技术(recombinase polymerase amplification,RPA)的快速检测方法。选择具有代表性的转基因玉米(双抗12-5、DBN9936、MON810)和大豆(DBN9004、GTS40-3-2、SHZD32-1)为检测对象,根据其侧翼序列,筛选特异性引物和探针,建立了高特异性、灵敏度达20拷贝的RPA扩增体系。为了快速获取DNA,种子样品利用核酸释放剂获得可用于RPA扩增的模板,为了消除叶片中叶绿素并快速获取DNA,叶片样品利用本实验室研发的核酸快速一体化提取装置快速获取DNA,以消除叶绿素干扰。结合便携式金属浴启动RPA扩增,蓝光切胶仪用于可视化检测,构建了转基因玉米和大豆的现场快速检测方法。该方法检测时间约为20 min,与常规PCR检测结果一致,适用于现场快速检测,无需大型设备,具备较强的实用性和适应性。该方法为转基因作物现场检测提供了技术支持,并为其他核酸快速检测技术的应用提供参考。

关键词： genetically modified crop   recombinase polymerase amplification   CRISPR/Cas12a   field detection  

摘要： With the approval of more and more genetically modified(GM)crops in our country,GM safety management has become more *** detection is a major approach for transgenic safety ***,a convenient and visual technique with low equipment requirements and high sensitivity for the field detection of GM plants is still *** the basis of the existing recombinase polymerase amplification(RPA)technique,we developed a multiplex RPA(multi-RPA)method that can simultaneously detect three transgenic elements,including the cauliflower mosaic virus 35S gene(CaMV35S)promoter,neomycin phosphotransferaseⅡgene(NptⅡ)and hygromycin B phosphotransferase gene(Hyg),thus improving the detection ***,we coupled this multi-RPA technique with the CRISPR/Cas12a reporter system,which enabled the detection results to be clearly observed by naked eyes under ultraviolet(UV)light(254 nm;which could be achieved by a portable UV flashlight),therefore establishing a multi-RPA visual detection *** with the traditional test strip detection method,this multi-RPA-CRISPR/Cas12a technique has the higher specificity,higher sensitivity,wider application range and lower *** with other polymerase chain reaction(PCR)techniques,it also has the advantages of low equipment requirements and visualization,making it a potentially feasible method for the field detection of GM plants.

关键词： 1，4-丁二胺   巴氏葡萄球菌   电转化   基因编辑   基因工程   耐受性  

摘要： 菌株对1，4-丁二胺耐受性低是1，4-丁二胺高产的技术瓶颈之一，提高菌株对1，4-丁二胺的耐受性是构建高产1，4-丁二胺工程菌株需要解决的主要问题。巴氏葡萄球菌326180菌株展现出了优异的高浓度1，4-丁二胺耐受性，不仅可以作为研究1，4-丁二胺耐受机制的理想模型，还可以为构建1，4-丁二胺高产工程菌株提供新的宿主选择。无论是耐受机制研究还是底盘菌株改造，都需要在分子水平上对巴氏葡萄球菌进行基因编辑。为了建立一套巴氏葡萄球菌遗传操作系统，为后续耐受机制研究和底盘菌株改造奠定基础，本研究系统优化了电转化条件，涵盖了菌株生长期、电场强度、电击缓冲液和复苏培养基等关键参数，成功建立了巴氏葡萄球菌电转化方法。同时，通过替换抗性表达盒，构建了基因编辑质粒pCpfOA；优化了基因编辑的筛选标记，建立了基于CRISPR/Cpf1的巴氏葡萄球菌基因编辑技术，编辑效率达到90%以上。本研究建立的巴氏葡萄球菌遗传操作系统为该菌的耐受机制研究以及底盘菌株的遗传改造提供了重要技术支撑。

关键词： 稀土   基因工程   重组蛋白   稀土分离  

摘要： 伴随现代社会对新能源材料需求的持续上扬，稀土元素作为堪称工业维生素般存在的重要性愈发显著。不过，鉴于稀土元素具备相近的原子半径以及化学性质，传统的分离手段遭遇到分离难度大、分离流程繁杂、能耗颇高、对环境造成污染等一系列棘手难题。为有力推动可持续发展以及实现资源的高效运用，生物材料在对稀土元素的富集与分离方面发挥着关键作用。近些年来，基因工程菌以及重组蛋白鉴于其拥有广泛的外源基因、颇高的表达量以及出色的选择性分离等特质，受到了极大的关注。此文针对近年来依托基因工程菌、重组蛋白等生物材料在吸附分离稀土矿、工业废水、电子产品以及电池废物中的稀土离子的应用研究进展予以分类评述，重点研讨了基因工程菌与重组蛋白等生物材料的制备、固定化工艺，并对分离稀土离子的成效进行深度剖析，阐述了此项研究面临的挑战，并对其未来的发展趋向进行了展望。