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关键词： 酯类   葡萄酒香气   果香型葡萄酒酵母   基因工程  

摘要： 酯类是影响葡萄酒香气的主要成分,使用果香型葡萄酒酵母能够酿造酯类含量相对较高的葡萄酒,提升葡萄酒的香气质量。因此,选育果香型葡萄酒酵母具有重要意义。现通过5种不同的育种技术,尤其是基因工程育种方面,对国内外果香型酵母的选育进行了综述,以期对未来果香型葡萄酒酵母的选育提供理论参考。

关键词： 胚胎干细胞   细胞移植   肝   小鼠  

摘要： 目的研究小鼠胚胎干细胞在正常肝脏微环境中的迁移、分化及对正常肝组织的影响。方法分离小鼠生殖腺嵴获取胚胎干细胞,体外扩增、5-溴-2-脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记后经尾静脉注入正常小鼠体内。于注射后2、4周取肝脏,连续冷冻切片,采用苏木精-伊红染色、免疫荧光双染色和PAS染色检测移植细胞在肝内的分布、清蛋白表达和糖原合成情况,显微计数分析肝细胞的增殖状态。结果移植2周,受体鼠肝脏内均可见散在分布的大而圆的BrdU和清蛋白双阳性细胞,PAS染色呈强阳性反应;体积小的BrdU阳性细胞,清蛋白表达呈阴性。移植4周,单位面积内BrdU阳性细胞数量较2周时减少,PAS着色较2周时浅,糖原颗粒细小、分布均匀,肝细胞的形态比较规则,但体积变大,胞核大而松散,单位面积的肝细胞数量较正常肝脏减少,肝小叶结构与正常鼠比较无显著改变。结论静脉移植的胚胎干细胞可以迁移至正常肝脏,在肝脏微环境中分化为肝细胞,并刺激正常肝细胞增殖。

关键词： 转基因作物   除草剂   《Nature》   联合国粮农组织   连载   市场   粮食问题   粮食安全问题  

摘要： 随着人口的不断增加,世界需要更多的粮食.生物基燃料也需要消耗大量粮食,如玉米、大豆等.现在世界上还有10亿人处于饥饿状态,联合国粮农组织估计,从2012年到2050年全球粮食需求增加70%.如何解决世界粮食问题？权威杂志《Nature》多次发文讨论世界粮食安全问题,专家们认为利用生物技术提高作物产量和抗逆能力才是解决饥饿问题的根本.

关键词： PM2.5   胚胎干细胞   成纤维细胞   细胞毒性   遗传毒性  

摘要： 目的研究汉阳地区PM2.5对人胚胎干细胞来源的成纤维细胞(EBf-H9细胞)的遗传毒性,验证EBf-H9细胞作为遗传毒性评价模型的可行性,拟为遗传毒性评价提供一个新的可选细胞模型。方法不同浓度PM2.5作用于EBfH9细胞24 h,应用CCK-8试剂盒及LDH试剂盒检测EBf-H9细胞的细胞毒性和LDH漏出率;采用单细胞凝胶电泳试验及微核试验评价PM2.5对EBf-H9细胞DNA和染色体损伤程度。结果细胞毒性试验结果显示,随着PM2.5剂量的增加,细胞存活率逐渐降低,而LDH漏出率呈先增加后降低的趋势,且存在剂量-效应关系;单细胞凝胶电泳试验与双核细胞微核试验结果显示,随着PM2.5剂量的增加,彗星拖尾率与双核细胞微核率逐渐上升,且存在明显的剂量-效应关系。结论在本试验条件下,汉阳PM2.5引起EBf-H9细胞出现DNA和染色体损伤,初步证实EBf-H9细胞可作为一种新的遗传毒性评价候选细胞模型。

关键词： 肌酸水解酶   基因工程菌   肌酸   肌氨酸  

摘要： 目的构建肌酸水解酶的重组质粒并转化至大肠杆菌,研究其蛋白的表达及活性。方法 1根据Genbank数据库已知的肌酸水解酶(黄杆菌U-188)的基因序列,由上海吉凯生物有限公司进行生物合成,得到肌酸水解酶基因片段b;2根据肌酸酶的基因序列设计引物,聚合酶链反应(PCR)扩增,进行双酶切的回收和纯化,与质粒GV296酶切后进行连接,构建重组质粒GV296-b,分别转化至大肠杆菌DH5a,筛选测序鉴定;3提取重组质粒GV296-b,转入至大肠杆菌BL21(DE3),进行菌液PCR鉴定;4工程菌GV296-b/BL21(DE3),向菌液中加入异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导其蛋白表达,并制备粗酶液进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺(SDS-PAGE)分析;5将工程菌GV296-b/BL21(DE3)于含特定浓度肌酸的培养基中培养24 h,取培养液测定肌酸浓度。结果 1成功构建重组质粒GV296-b,将上述重组质粒进行双酶切。电泳显示,目的片段大小约为0.783和1.212 kb,与理论值相符;2重组质粒GV296-b,转化至*** BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导后实现高效表达。工程菌GV296-b/BL21(DE3)表达肌酸酶,具有肌酸酶活性,按基因序列图分析肌酸水解酶403个氨基酸,经SDS-PAGE分析酶蛋白的分子量约为43 k D。结论成功构建的工程菌GV296-b/BL21(DE3)能高效诱导肌酸酶的表达,具有肌酸酶活性。

关键词： 基因工程   虚拟仿真   运行机制  

摘要： 目前,学员数量的激增与现有学校教学资源的紧缺之间形成了比较大的矛盾。为了在有限的资源下满足学生对基因工程技术的实践能力的形成,学校对基因工程虚拟仿真实验室的建设投入了大量的研究。该仿真实验室的建立可以不需要借助真实的实验设备和试剂即达到模拟真实实验操作的体验,以帮助学员进行真实操作前的培训和练习,同时不受空间和时间得限制。本文主要从实验室建设的意义、建设内容以及运行机制进行了阐述,以期待为该技术的开发和利用提供相关理论认识。

关键词： 基因组   基因组学   C值悖论   人类基因组计划  

摘要： 本文对基因组、基因组学以及人类基因组计划的相关内容作了简要介绍.

关键词： 口蹄疫病毒   感染性克隆   S片段   病毒生物学特性  

摘要： 【目的】研究嵌合口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus,FMDV)O/GSLX/CHN/2010株S片段的基因工程病毒的生物学特性。【方法】运用反向遗传操作技术,将FMDV O/GSLX/CHN/2010的S片段嵌合进2株同谱系FMDV的感染性克隆骨架,拯救得到两株基因工程嵌合病毒r GDexc、r GZexc;进而从病毒复制和病毒对乳鼠的致病力方面,对嵌合病毒、亲本基因工程病毒以及FMDV O/GSLX/CHN/2010株进行了评价。【结果】FMDV O/GSLX/CHN/2010株复制较慢,对乳鼠致病力较差。嵌合病毒和亲本基因工程病毒的复制能力、对乳鼠的致病力明显高于FMDV O/GSLX/CHN/2010株。【结论】研究表明FMDV O/GSLX/CHN/2010的S片段不能独自决定该病毒较差的复制能力和较弱的乳鼠致病力。这一发现为进一步研究O/GSLX/CHN/2010的致弱机制以及S片段对病毒生物学特性的影响奠定了基础。

关键词： 钙调蛋白磷酸酶B亚基   细胞凋亡   线粒体途径  

摘要： 目的 :探讨基因工程药物CNB通过线粒体途径引起肿瘤细胞凋亡的机制。方法 :本研究采用MTT比色法检测细胞存活和生长、流式检测细胞凋亡测定CNB对肿瘤细胞的杀伤效果;采用高内涵分析与成像仪检测细胞线粒体膜电势,以判断加入CNB后线粒体膜电势的变化情况等。结果 :在体外CNB能够有效的抑制Hep G2细胞的增殖。CNB对Hep G2细胞的抑制具有浓度依赖效应,浓度越高,抑制率相对越高。MTT实验证明,在体外CNB能够有效抑制肿瘤细胞的增殖;不同批次的CNB均具有同样的作用,能够抑制肿瘤细胞的增殖。但不同批次的CNB效果不同;CNB有浓度梯度效应,随着CNB浓度增加,能明显上调肿瘤细胞晚期凋亡的比例,当浓度达到700ug/ml时和抗肿瘤药品五氟尿嘧啶效果基本相同,说明CNB能促进肿瘤细胞凋亡;3种细胞加入CNB后均Caspase3表现为下调,说明Caspase3剪切体上调,Caspase3蛋白被激活,显示CNB能促进细胞凋亡;CNB能够定位到线粒体,导致线粒体膜通透性增加,从而引发线粒体介导的凋亡。结论 :CNB能够抑制肿瘤细胞增殖;CNB能够促进肿瘤细胞凋亡;CNB可促进线粒体途径的细胞凋亡。

关键词： 胚胎干细胞   培养基,无血清   培养基,条件性   组织工程   干细胞   培养   无血清培养   人胚胎干细胞   多能性   饲养层   基质   限定性培养基   科技型中小企业技术创新基金   深圳市战略新兴产业发展专项资金  

摘要： 背景:人胚胎干细胞有永久自我更新和向外、中和内胚层分化的能力,具有重要的基础研究价值和临床应用前景,可应用于再生医学、药物毒性筛选、早期胚胎发育、细胞移植治疗和基因治疗等领域,但是在限定条件下的大规模细胞培养、控制和定向分化技术的发展仍然具有实质性的挑战。在治疗应用方面,许多研究者试图建立可在无异源限定性和规模化培养体系中维持细胞多能性的培养方法。目的:综述近几年报道的人胚胎干细胞的无血清培养体系研究进展,重点是在发展适于治疗用途的无血清和无异源培养体系进程中,面临的挑战和进步。方法:应用计算机检索CNKI和Pub Med学术数据库中2008至2015年关于人胚胎干细胞无血清培养的文章,排除观点重复和陈旧的文章,最后对58篇文章进行归纳汇总。结果与结论:研究者已经在使用人源性饲养层细胞、无饲养层基质及限定性成分培养基上做了许多尝试,旨在选择合适的基质和培养基,使异源性成分达到最小化或者不使用,以求获得临床级别的细胞株。但是目前的细胞制品距离临床应用还有很大的距离,仍有很多问题需要解决,比如细胞制品的规范化、标准化、个性化定制等。相信随着干细胞研究和行业的规范,胚胎干细胞产品将会在临床得到广泛应用。