教学课程资源库 更多>>

关键词： 单克隆抗体   基因工程抗体   单链抗体   双特异性抗体   免疫诊断   感染性疾病   综述  

摘要： 感染性疾病病原体的准确检测对于其有效防控极为重要,也是合理用药、有效治疗的前提。抗体因其高度的特异性和亲和力,已经成为免疫诊断中一个关键性的分子。其类型多样,从多克隆抗体到单克隆抗体,再发展到基因工程抗体,而基因工程抗体又包括单链抗体、双特异性抗体和多特异性抗体等。各类型抗体在感染性疾病的免疫诊断方面均有应用。本文就单克隆抗体和基因工程抗体在感染性疾病免疫学诊断方面的应用作一综述。

关键词： 转基因作物   监管工作   农业部门   农业行政主管部门   违法违规行为   依法监管   工作制度化   监管措施  

摘要： 3月31日，农业部在京召开全国农业转基因监管工作会议，要求各级农业行政主管部门进一步加强转基因监管工作，切实将转基因作物监管措施落到实处，促进监管工作制度化、规范化、常态化。会议认为，近年来，各级农业部门严格依法监管，推进体系建设，严厉查处违法违规行为，广泛开展科普宣传，全国转基因监管工作保持良好势头。会议指出，转基因是一项高技术，也是一个新产业，具有广阔的发展前景，中央已对发展农业转基因提出明确要求，在研究上要大胆，坚持自主创新；在推广上要慎重，做到确保安全；在管理上要严格，坚持依法监管。

关键词： 基因工程   活载体疫苗   病毒   细菌  

摘要： 作为分子生物技术发展的新兴产物,基因工程疫苗与传统疫苗相比,具有生产成本低、免疫途径广泛、安全性高等优点,已成为生物制品产业发展的一种趋势。而基因工程活载体疫苗具有其独特的优点,是当今与未来疫苗研制与开发的重要方向之一。根据选用的载体类型,基因工程活载体疫苗分为病毒活载体疫苗和细菌活载体疫苗。简要概述了病毒活载体疫苗和细菌活载体疫苗的特点及研究进展。

关键词： piggyBac   转座子   基因工程   转基因动物  

摘要： piggyBac(PB)转座子已被证明是一种高效的非病毒基因工程操作工具,现广泛用于基因操作和转基因动物研究中。借助PB转座子已获得转基因小鼠、鸡、猪、山羊等动物。文中重点就PB转座子在畜牧兽医科学研究中的应用进行综述。

关键词： 角膜基质/移植   角膜内皮细胞   人   组织工程/方法   组织支架   条件培养液   小鼠胚胎干细胞   猪脱细胞角膜基质  

摘要： 背景 目前角膜供体来源短缺,且体外培养的人角膜内皮细胞（HCECs）难以再生和扩增,为临床上角膜移植的开展带来了很大困难,组织工程角膜的构建仍是研究的主要课题.前期研究已证实,小鼠胚胎干细胞条件培养基（ESC-CM）能够促进体外HCECs的增生,脱细胞猪角膜基质（APCS）是较好的支架材料,但ESC-CM培养的HCECs是否能在APCS上融合成单层细胞鲜见研究. 目的 研究ESC-CM培养的HCECs在APCS上是否能够形成单层细胞. 方法 用小鼠ESC-CM培养液培养小鼠ES-E14细胞,收集培养上清液,离心后按体积比1∶3与人角膜内皮细胞培养液（CEM）混合,制备体积分数25％ ESC-CM液.取穿透角膜移植术后剩余的供体人角巩膜缘组织,采用组织块培养法用ESC-CM对HCECs进行培养和传代,采用逆转录PCR法检测HCECs中Ⅷ型胶原蛋白（ColⅧ）与神经元特异性烯醇化酶（NSE）的表达以鉴定细胞.取猪角膜,利用磷脂酶A2和碳酸氢盐溶液脱细胞法制备APCS,将第2代HCECs混合液按照800/mm2的密度种植于灭菌的APCS上进行培养,于倒置相差显微镜下观察细胞形态,采用苏木精-伊红染色法观察培养细胞的组织结构;采用免疫荧光法检测构建的HCECs单细胞片中闭锁小带蛋白-1（ZO-1）和Na＋-K＋-ATP酶的表达. 结果 体外培养的HCECs呈典型的六角形,内皮特异性标志物ColⅧ和NSE mRNA表达阳性.脱细胞APCS呈白色透明状,苏木精-伊红染色显示APCS中无角膜细胞,但角膜胶原纤维排列规则.第2代HCECs复水后可在APCS上生长并贴附,培养后7d融合成单层细胞片,细胞片上HCECs的细胞密度为（2 694± 143）/mm2.构建的HCECs片中内皮细胞泵功能相关蛋白ZO-1和Na＋-K＋-ATP酶均呈阳性表达,呈红色荧光. 结论 25％ESC-CM可促进HCECs的生长并维持细胞的正常形态,APCS可为HCECs片的构建提供支架和较好的生存微环境.在APCS形成的HCECs单细胞片可表达HCECs泵功能,是角膜移植的良好供体.

关键词： 牛乳铁蛋白肽   抗菌肽   基因工程  

摘要： 牛乳铁蛋白肽(lactoferricin bovine,Lfcin B)是由乳铁蛋白(lactoferrin)经酸性胃蛋白酶降解N端而产生的含25个氨基酸残基的小肽,它具有抗菌、抗癌、抗氧化、免疫调节等一系列生物活性,成为目前研究与开发的热点。由于受到生产成本的限制,无法进行大规模商业化生产,基因工程技术将是实现大规模生产的最佳途径。对牛乳铁蛋白肽的抑菌功能以及基因工程制备的优势和改良方法进行了综述,旨在为基因工程生产牛乳铁蛋白肽提供新思路。

关键词： 干细胞技术   临床研究   转化   论坛   干细胞治疗   临床应用   胚胎干细胞   成体干细胞  

摘要： 干细胞经历最近十年的飞速发展,从胚胎干细胞,到成体干细胞,进一步到诱导型多能干细胞以及这些细胞在动物实验和临床中应用,从小规模的临床研究到部分干细胞产品的上市,无疑给未来的临床应用领域提供巨大想象空间.为了进一步深入了解干细胞临床转化相关政策,探讨干细胞向临床转化过程中面对的科学问题,分析干细胞治疗技术细节障碍,探索干细胞治疗的治病机制,将在北京举办2016（第八届）干细胞技术与临床转化论坛.

关键词： 克隆   基因工程   Golden   gate   片段扫描   方法  

摘要： 功能序列的改造是基因工程的一项基础技术。序列改造往往涉及较大片段的插入或替换,为了获得更优化的改造序列,这种片段插入或替换经常需要以扫描方式进行。传统的酶切连接方式在这种情况下可能难以实现或者费时费力。建立了一种golden gate方法结合混合克隆和快速鉴定的策略(简称Gmix),利用该策略,成功地将外源基因(Gaussia荧光素酶基因)以4种模式,扫描式插入或替换HBV复制质粒的指定区域。该方法成功率高,操作简便快速且成本较低,适合于其他DNA序列的类似改造工作。

关键词： 基因工程   课程内容改革   实践教学  

摘要： 针对本科生《基因工程》课程教学中存在的问题,建立和完善《基因工程》教学模式,探索并改革了考核方式。在实践教学中,以综合性实验代替以往分散实验,吸收本科生参与教师科研课题。加强教学团队的教学研讨活动,支持教师深造和培训,不断提高教师教育教学水平。经过十余年的教学改革实践,《基因工程》课程取得了良好的教学效果。

关键词： 间充质干细胞   胚胎干细胞   低血清诱导  

摘要： 目的建立人胚胎干细胞向间充质干细胞分化的低血清诱导方法。方法用低血清培养体系培养人胚胎干细胞，每3d半量换液，7-10d后消化成单细胞用扩增培养基培养，每3d传代1次。结果人胚胎干细胞呈克隆样增殖，边缘呈锯齿状，表达多能干细胞标志OCT4、SOX2和NANOG。诱导3d后，克隆间隙出现体积较小的成纤维样细胞，增殖能力强，经两次传代后可获得形态一致的长梭形细胞。这些细胞表达间质细胞标志VIMENTIN，细胞均表达CD105、CD90、CD73、CD44和HLA-ABC，不表达CD34、CD45和HLA-DR，且具有成脂和成骨分化能力。结论用低血清诱导法能快速获得较高纯度的人胚胎干细胞源性间充质干细胞。