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关键词： 植物   NAC转录因子   抗旱   耐盐   耐冷   基因工程  

摘要： 植物在生长发育过程中,经常会遭遇各种非生物胁迫,影响其生长发育甚至产量。NAC转录因子是植物特有的、最大的转录因子家族之一,在植物生长发育及抵御多种非生物胁迫反应中具有重要的调控作用。从NAC转录因子对植物的抗逆时期(生殖生长期、营养生长期)及抗逆范围(单一抗性、综合抗性)影响方面阐述了其在植物抗旱、耐盐、耐冷等基因工程中的应用进展,为NAC转录因子的利用及植物抗逆遗传改良和育种提供参考。

关键词： 海带   基因工程   选择标记   敏感性  

摘要： 本文以海带(Saccharina japonica)配子体、配子体克隆及幼孢子体为实验材料,研究了不同发育时期的海带对草甘膦、草丁膦、氯霉素的敏感性,经SPSS软件计算出一定时间内3种选择试剂对不同发育时期海带的半致死剂量(LD50)。结果表明:海带配子体及配子体克隆对草甘膦和草丁膦极为敏感,对氯霉素较为敏感。4d时,草甘膦和草丁膦对海带配子体的LD50分别为8.19μg/mL和19.27μg/mL,对海带配子体克隆的LD50分别为73.69μg/mL和39.08μg/mL;而氯霉素对海带配子体及配子体克隆4天的LD50则高达742.00μg/mL和701.51μg/mL。海带幼孢子体仅对草甘膦极为敏感,4d的LD50为40.93μg/mL;对草丁膦和氯霉素较为敏感,4d的LD50分别为214.51μg/mL和907.86μg/mL。该结果说明草甘膦和草丁膦适合作为以海带配子体和配子体克隆为实验材料的基因工程选择试剂,草甘膦则更适合以海带幼孢子体为实验材料的基因工程选择试剂。

关键词： 胚胎干细胞   Gadd45g   自我更新   分化   STAT3  

摘要： 为探究生长阻滞和DNA损伤诱导蛋白45γ(Growth arrest and DNA-damage-inducible protein GADD45 gamma,Gadd45g)对小鼠胚胎干细胞(mouse embryonic stem cells,m ESCs)在体外培养条件下自我更新状态的影响,通过设计并构建含有Gadd45g基因的重组质粒,将其导入m ESCs内,过表达目标基因;在含有白血病抑制因子(LIF)的血清培养条件下,通过细胞计数、碱性磷酸酶染色、qRT-PCR以及免疫荧光等实验手段检测m ESCs的生长情况。结果显示,与对照组相比,过表达Gadd45g基因后,m ESCs的生长速度减缓,碱性磷酸酶活性降低,且中内胚层标志基因的表达水平显著上升。进一步研究发现,在添加LIF的有血清或2i无血清培养体系中,过表达Gadd45g均可以降低细胞内STAT3蛋白的磷酸化水平,由此推断上调Gadd45g的表达会抑制STAT3的活性,从而推动m ESCs向中内胚层分化。研究结果扩大了目前人们对于ESCs分化机制的理解,有利于胚胎干细胞未来的基础研究与安全应用。

关键词： 基因工程   操作过程   生命观念   学生   网络自主学习   导入设计   学习任务   课前预习  

摘要： 一、新课导入设计 1．课前预习：教师布置的学习任务是以小组为单位，利用百度、搜狗等搜索引擎对关键词“基因工程的应用实例”展开网络自主学习。课代表收集小组学习成果，评选出在课堂中展示交流的内容。

关键词： 基因工程   操作程序   复习课   教学设计  

摘要： 联系必修课中的基础知识，通过以题图导入、资料引领、尝试构建基因文库、例题反馈等环节进行本节复习课的教学。

关键词： 小鼠   基因工程鲎素   金黄色葡萄球菌   肺炎  

摘要： 基因工程鲎素体外抑菌活性良好,为进一步评价其在体内抑菌活性和治疗效果,本研究建立了金黄色葡萄球菌小鼠肺部和腹腔感染模型,探讨了基因工程鲎素对2种感染模型小鼠的治疗效果。比较基因工程鲎素治疗前后,不同模型小鼠的存活率、血液以及组织中的细菌载量变化;比较治疗前后小鼠肺部感染动物模型的病理学变化。结果表明,与对照组相比,基因工程鲎素治疗后肺部感染模型小鼠存活率升高40%,腹腔感染模型小鼠存活率升高60%,治疗后腹腔感染小鼠血液中的细菌载量下降10~4倍;病理学分析结果表明,基因工程鲎素治疗后小鼠肺脏的炎症反应较轻,肺部组织结构被破坏程度较轻。综上所述基因工程鲎素对金黄色葡萄球菌感染小鼠的体内治疗效果明显,显著提高了小鼠存活率,抑制了细菌的扩散,减轻了病理炎症变化,初步表明基因工程鲎素具有良好的抗感染药物研发前景。

关键词： 限制酶   脱氧核苷酸   基因工程   DNA   表达载体   目的基因   连接酶   相关知识  

摘要： '基因工程'是选修3的高考命题的重点,在近几年的高考题中都有考查。通过对近几年高考题及模拟题的分析,我们在复习这部分知识时,应注意以下几点:一、注重基础知识点的记忆,学会从图中获取信息,学会专业术语的表达在2016年的全国卷Ⅰ的40题中及2016年的全国卷Ⅲ的40题中都出现了对限制酶、DNA连接酶、质粒、基因表达载体的构建、标记基因及目的基因检测与鉴定的方法和原理等知识点的考查,题目难度不大。

关键词： 全球生物技术   商业化发展   生物技术领域   农业生物技术   种植面积   耐除草剂   大豆种植   转化体   应用服务   粮食安全  

摘要： 国际农业生物技术应用服务组织(ISAAA)出版了全球生物技术/转基因作物商业化年度回顾,即ISAAA简报,本文是这一系列的第21期,记载了以下最新信息:2016年转基因作物的应用和分布的全球数据,自1996年(商业化的第一年)以来的累计数据、国家状况、转基因作物的批准动态,以及转基因作物种植国家和全球的未来技术展望。ISAAA简报因其可靠性和准确性成为现代农业生物技术领域内最常被引用的参考文献之一。自从1996年应用转基因作物以来,ISAAA成为这一信息的最突出的单一来源。

关键词： 人胚胎干细胞源性间充质干细胞   外泌体   生物学特性  

摘要： 目的探讨人胚胎干细胞源性间充质干细胞(human embryonic stem cell derived mesenchymal stem cells,hESCMSCs)来源的外泌体的生物学特性。方法将已注册的未分化、人类ESC H9细胞系诱导成间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs),通过旋转超滤法从培养基中提取外泌体(exosomes)。流式细胞分析技术鉴定hESC-MSCs表面标志物,对间充质干细胞进行三系分化诱导,利用透射电镜、Izon qNano纳米粒子分析系统观察外泌体的形态和大小,Western blotting鉴定外泌体表面特异性标志物,观察hESC-MSCs-Exo对人微血管内皮细胞(human microvascular endothelial cells,HMEC-1)增殖和迁移的影响。结果成功诱导形成hESC-MSCs,并收集纯化外泌体。诱导后的MSCs CD29、CD73、CD90、CD105、CD146、CD44表达阳性,CD34、CD133、CD45、HLA-DR-PE表达阴性;hESC-MSCs通过诱导完成成骨、成脂和成软骨分化;hESCMSCs-Exo为粒径在40~100nm的囊泡,表达特异性的表面标志物CD9、CD63和CD81;体外促进HMEC-1的增殖和迁移。结论 hESC-MSCs-Exo作为一种生物活性囊泡,能够促进血管内皮细胞的增殖和迁移;hESC-MSCs-Exo来源无限,可为临床组织损伤的修复治疗提供丰富的干细胞外泌体来源。

关键词： DNA去甲基化   Tet蛋白   5-羟甲基胞嘧啶   胚胎干细胞   抗肿瘤  

摘要： Tet蛋白属于α-酮戊二酸(α-KG)和亚铁离子(Fe2+)依赖的双加氧酶家族。Tet特异识别基因组DNA上5-甲基胞嘧啶(5mC)的甲基并进行催化氧化,是哺乳动物基因组DNA主动去甲基化途径中唯一被发现的关键因子。通过调控基因组5mC的动态平衡分布,Tet在胚胎发育早期基因调控和胚胎干细胞定向分化中至关重要,其表达和功能异常与包括骨髓增生异常综合征、慢性骨髓单核细胞性白血病和急性白血病在内的多种血液恶性肿瘤以及实体肿瘤有密切关系。因此,Tet及其介导的DNA去甲基化是全新的抗肿瘤靶向药物靶标。对于Tet生物功能和催化机制的研究将有助于深入了解与DNA去甲基化途径相关肿瘤的发生和发展机制,同时也为研发全新的抗肿瘤靶向药物提供参考。