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关键词： 基因工程教学课程   改革   探析  

摘要： 随着科学技术的不断发展,基因工程已经在我国的医疗、农业、食品、化工等行业已经得到了广泛的应用,也促进了这些行业的快速发展。所以国家为了促进生物基因工程的发展在学校教学中设立了基因工程这门课程。基因工程是一门实验性质的学科,而且随着科学技术水平的不断发展,基因工程的研究结果也是每天都在发生变化,所以在教学过程中相关教学工作人员一定考虑到这些方面的因素,对基因工程课程进行改革,才能提高课程教学的效率。本文中我们就从教学内容、教学方法和手段以及教学与科研结合等方面对基因工程课程教学进行了改革,通过在这些方面的改革来提升基因工程教学质量,进而促进基因工程和生物技术的发展。

关键词： 基因编辑技术   CRISPR/Cas9   基因工程育种   应用  

摘要： 作为传统基因工程育种技术,转基因技术在植物分子育种工作中的应用受到技术本身缺陷及其他风险因素的限制。CRISPR/Cas9基因编辑技术是近几年新发展起来的一种基因组定向编辑技术。本研究介绍了CRISPR/Cas9基因编辑技术的基本原理和研究进展,分别比较分析了CRISPR/Cas9系统与前两代基因编辑技术(ZFNs和TALENs)和传统转基因技术之间的差异。至今为止,CRISPR/Cas9基因编辑技术已经在多种植物中实现了定点突变诱导(插入,缺失或修饰等)。由于成本低廉、操作简易和突变诱导率高等特点,CRISPR/Cas9系统作为一项高效植物遗传改良和育种研究的分子操作技术手段,应用前景十分广阔。

关键词： 线粒体   测序   肉类掺假   系统进化树   动物源性成分  

摘要： 目的建立生鲜肉中猪、牛、羊、鸡、鸭源性成分的DNA测序鉴别方法,并对采集自北京各地区生鲜肉品进行检测验证。方法合成动物线粒体上12S rRNA、cytochrome b、cytochrome c oxidase基因引物,建立猪、牛、羊、鸡、鸭源性成分的DNA测序鉴别方法,并对50份猪、牛、羊、鸡、鸭肉品进行检测。结果使用线粒体上12S rRNA、cytochrome b、cytochrome c oxidase基因引物对猪、牛、羊、鸡、鸭肉品进行扩增,分别获得456、400和710 bp大小的DNA片段。只有12S rRNA基因引物均可对此5种动物源性成分扩增且效果良好。扩增产物进行序列测定。根据序列构建的系统进化树发现,此方法可有效区分样品中猪、牛、羊、鸡、鸭源性成分。结论此方法快速、简便,可准确检测50种生鲜肉样品中的动物源性成分,作为肉类鉴别的新方法。

关键词： 多能干细胞   胚胎干细胞   诱导多能干细胞   胚胎毒性  

摘要： 药物对于生殖细胞或者早期胚胎的影响将会引起不孕或者种植前胚胎的发育异常,进而引起胚胎毒性或者是后代的畸形,因此药物的临床应用需要有可靠的实验数据证明其对胚胎的影响,而胚胎干细胞(embryonic stem cell,ESC)由于其无限增殖及多向分化的潜能而作为研究药物胚胎毒性的细胞模型得到广泛应用,以ESC为基础的胚胎干细胞实验(embryonic stem cell test,EST)是获得国际认可的胚胎毒性评价的体外替代方法,但是该实验方法的快速性和准确性存在一定的局限性,目前该细胞模型的研究主要集中于快速性和准确性的优化。新兴的诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,i PSC),由于具有与ESC相似的增殖和分化特性,目前也被逐步应用于药物胚胎毒性的研究。

关键词： 兔病毒性出血症   江苏省农业科学院   基因工程疫苗   灭活疫苗   杆状病毒载体   亚单位疫苗   突破性   兽药  

摘要： 近日,江苏省农业科学院兔病学科团队在兔病疫苗研究方面取得重大突破性进展,其研发的兔病毒性出血症（俗称兔瘟）杆状病毒载体灭活疫苗（BAC-VP60株）获得国家新兽药一类注册证书（[2017]新兽药证字06号）.这是我国第一个兔用基因工程疫苗,也是世界上第一个获得政府许可针对兔瘟的亚单位疫苗.

关键词： 基因工程   遗传病   发展前景  

摘要： 基因工程是基于分子水平上的研究,随着分子生物学的发展,基因治疗成为医学生物学研究的热点之一。为了更深入了解基因工程,本文先介绍了我国典型的遗传病的特点及其发病率,分析了目前遗传疾病治疗面临的挑战,并阐述了基因工程为遗传病治疗做出的突出贡献,站在高中生的角度,探讨基因工程治疗遗传病的发展前景。

关键词： 植物防御素   抑菌作用   基因工程   病害  

摘要： 植物防御素是一类碱性、富含半胱氨酸、具有抗菌活性的低分子量多肽。不同植物防御素抗菌活性差异较大,但高级结构相似,都是1个α-螺旋和3个反向平行的β片层结构。植物防御素具有抑制酶活、抑菌、抑制癌细胞生长等功能,其作用机理主要是与真菌细胞膜上鞘脂等复杂脂类相互作用。植物防御素具有抗菌谱广泛和高效性的特点,将在植物抗病基因工程和作物品种改良中发挥重要作用,并有望开发成为新型的抗菌剂以减少农药的使用。本文综述了植物防御素的结构、功能、作用机理以及在植物抗病虫害基因工程上的应用研究进展。

关键词： DA8600   EGFR基因突变   DNA测序用量  

摘要： 目的基于DA8600测序平台,探讨Ampli Seq建库方法检测EGFR基因突变所需最低样本DNA用量,以评估下一代测序(next generation sequencing,NGS)检测技术的性能。方法本研究选择10例EGFR突变的石蜡包埋组织样本,分别取1 ng、5 ng、10 ng、20 ng样本DNA进行文库构建,使用DA8600半导体测序仪进行检测,并比较检测结果。结果 10 ng和20 ng DNA用量均可全部准确检出EGFR基因突变;5 ng DNA用量准确检出7例EGFR基因突变,1例文库质量不合格无法进行测序,1例无法检出EGFR突变,1例测序数据量不足检测失败;1 ng DNA用量构建文库全部质量不合格,无法进行测序。结论通过对10例样本不同DNA用量构建文库的检测结果分析,说明10 ng DNA即可采用Ampli Seq建库方法在DA8600半导体测序仪进行EGFR基因突变检测。

关键词： 人角膜缘干细胞   microRNAs   胚胎干细胞   微环境  

摘要： 目的探讨microRNA-31(miR-31)对在胚胎干细胞微环境中培养的角膜缘干细胞(LSCs)自我更新与分化的调控作用。方法采用CnT-20,添加20%胚胎干细胞培养上清液(ESC-CM),对LSCs进行培养。将ESC-CM组细胞进行转染miR-31或者Antago-31,检测细胞克隆形成能力的改变;流式细胞仪分析细胞周期、凋亡的改变,qPCR检测FIH-1、P21、P63、ABCG2、CK3、miR-31、miR-143、miR-145、miR-184的表达情况;免疫荧光与Western blot检测CK3、Cx43 P63、ABCG2、Survivin、FIH-1、P21、Caspase-3等的表达情况。结果 miR-31 mimic组细胞的CFE明显低于miR-31 inhibitor组[(3.00±1.00)%vs.(6.90±0.79%),P<0.05];Antago-31组细胞的CFE[(8.90±0.53)%vs.(7.27±0.80),P<0.05]则显著高于Ir-antago组。miR-31mimic组进入S期细胞的比例[(9.33±2.88)%vs.(16.00±1.73)%,P<0.05]明显低于miR-31 inhibitor组;Antago-31组进入S期细胞的比例[(22.33±2.58)%vs.(15.33±0.58)%,P<0.05]则显著高于Ir-antago组。miR-31mimic组细胞凋亡的比例[(31.13±7.56)%vs.(4.83±0.38%),P<0.05]明显高于miR-31 inhibitor组;Antago-31组细胞凋亡的比例[(3.03±0.23)%vs.(5.93±1.53%),P<0.05]则显著低于Ir-antago组。在进行miR-31mimc处理之后,P63、ABCG2、Survivin、FIH-1、miR-143、miR-145的表达量下降,而P21、Cx-43、CK3、miR-31、miR-184的表达量明显上升(P<0.05)。在antago-31处理组,P63、ABCG2、Survivin、FIH-1、miR-143、miR-145的表达量上升,而P21、Cx-43、CK3、miR-31、miR-184的表达量明显下降(P<0.05)。Caspase-3的表达水平在antago-31处理组一直维持在相对较低的水平。结论通过转染Antago-31提高了FIH-1在LSCs中的表达水平,并减少了P21的表达。miR-31表达水平的下调促进了LSCs干性的维持。ESC-CM通过抑制miR-31/FIH-1/P21部分调控了LSCs的更新与分化。

关键词： 红景天苷   关键酶   代谢工程  

摘要： 红景天苷主要来源于红景天,是红景天属植物的重要活性物质,具有抗辐射、抗缺氧、抗肿瘤等多种药用功效。由于红景天野生资源少,且红景天苷在红景天中含量极少、提取率低,因此,研究提高红景天苷产量的生产方法具有重要的意义和价值。在研究红景天苷生物合成机制的基础上,通过基因工程技术来提高红景天苷的产量具有一定的前景和研究价值。综述了红景天苷的生物合成机制、代谢途径中的关键酶和利用代谢工程合成红景天苷的方法,并对其研究前景进行了展望,以期为红景天苷的生物合成相关研究提供参考。