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关键词： 分子诊断技术   国际会议中心   上海市   学术   东方   人类基因组计划   医学会   医学发展  

摘要： 随着人类基因组计划的完成，分子诊断技术在临床的应用越来越广泛。上海市医学会顺应最新医学发展需求，于2016年11月18日在全国各地医学会旗下率先成立了上海市医学会分子诊断专科分会，以切实推动分子诊断技术在临床的应用。时隔半年之后，由上海市医学会、上海市医学会分子诊断专科分会主办的第一届东方分子诊断学术会议于7月13日到15日在沪国际会议中心隆重召开。

关键词： 环孢霉素A   心肌干细胞   胚胎干细胞   心肌细胞   分化  

摘要： 目的探讨环孢霉素A(CSA)对小鼠胚胎干细胞(ESCs)向心肌细胞分化的影响及调控机制。方法应用分阶段胚胎干细胞向心肌细胞的分化系统,设ESCs自发组和CSA诱导组,用细胞免疫组织化学和流式细胞仪(FACS)评估心肌细胞分化率以及计数。细胞免疫化学检测CSA诱导出的心肌细胞标志物的表达。在ES细胞分化的不同阶段添加CSA,观察CSA是否特异地作用于某一特定的分化阶段。分别添加另外一种免疫抑制剂也是钙调磷酸酶抑制剂他克莫司(FK506)和T细胞核因子(NFAT)抑制剂11R-VIVIT,与添加CSA比较,比较各组的心肌细胞分化率。结果 ESCs自发组的心肌细胞分化率为(6.00±0.05)%,CSA诱导组为(60.00±0.08)%,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05),且诱导生成的心肌细胞具备心肌细胞特有的特征。CSA特异性地作用于中胚层干细胞,促进其分化成心肌干细胞;CSA强力促进中胚层干细胞分化成心肌细胞增多,相反分化成的上皮细胞减少;添加FK506和11R-VIVIT后没有出现类似CSA的促心肌分化作用。结论 CSA特异地作用于中胚层干细胞,通过非NFAT径路,能够强力诱导ESCs向心肌细胞分化。

关键词： 黄曲霉毒素   生物降解   基因工程   酶  

摘要： 黄曲霉毒素具有强致癌性、致突变性和致畸性,影响动物生产性能,降低饲料转化效率,减少产肉量、产蛋量和产奶量,增加动物发病率和死亡率,给畜牧业造成巨大的经济损失。另外,黄曲霉毒素通过肉、蛋、奶食物链传递给人类,严重威胁人类健康。因此,黄曲霉毒素的防控已经成为全球性高度关注的问题。目前,饲料中黄曲霉毒素的脱毒方法主要采用物理吸附,如蒙脱石、活性炭、酵母细胞壁等,但物理吸附仅是吸附了黄曲霉毒素,并不能减少毒素的量,最终饲料中被吸附的毒素在体内解吸附后排出体外,可造成环境的二次污染。另外吸附剂效果不稳定,可能会吸附饲料中的维生素等营养物质,造成饲料品质下降。其中,生物降解法具有解毒彻底、专一性强,不影响饲料的营养价值且能够避免毒素的重新产生等优点,从而备受研究者的关注。目前,有越来越多的研究报道了真菌、细菌及其代谢产生的酶能够降解黄曲霉毒素,而鲜有关于降解黄曲霉毒素重组酶的报道。基因工程技术在黄曲霉毒素生物降解中的运用,可采用现代分子生物学的方法,从复合解毒酶中分离纯化出特定的蛋白。但因微生物降解酶分离纯化过程复杂、酶活不稳定、酶作用条件苛刻,较难用于实际生产。因此,人们利用基因工程手段将活性高的解毒酶基因进行基因克隆,实现降解酶基因在原核或真核工程菌种的异源高效表达,为酶制剂在降解霉菌毒素的实际生产中作用研究奠定了理论基础。文章就基因工程技术在黄曲霉毒素降解中的运用研究进展及未来发展方向进行综述,为饲料和食品中霉菌毒素生物降解酶的运用提供理论基础和实践依据。

关键词： 基因芯片技术   生物组分   微细加工技术   表面构建   人类基因组计划   科学技术创新   微流体   应用概述   基因表达谱   DNA  

摘要： 1基因芯片技术的发展历史基因芯片（gene chip）亦称DNA芯片,主要是指通过平面微细加工技术在固体芯片表面构建的微流体分析单元和系统,用以实现对细胞、核酸、蛋白质及其他生物组分的快速、准确、大信息量检测。随着人类基因组计划（HGP）的实施,基因芯片应运而生,该技术是继大规模集成电路之后的又一次具有深远意义的科学技术创新。

关键词： 甲醇   核酮糖单磷酸途径   大肠杆菌   定向进化  

摘要： 甲醇是一种重要的有机化工原料,价格低廉,碳还原度高,在生物化工中是糖质原料的理想替代原料。但是常用的工业微生物宿主如大肠杆菌不能利用甲醇作为碳源,这限制了甲醇在生物化工领域的应用。通过表达甲醇脱氢酶、3-己酮糖-6-磷酸合成酶和6-磷酸-3-己酮糖异构酶在大肠杆菌中构建可同化甲醇的核酮糖单磷酸途径。以基因工程菌作为出发菌株,通过连续传代和定向进化引入随机突变,突变株进行以甲醇为碳源的压力筛选,得到了2株可以利用甲醇生长的突变株。在以甲醇为辅助碳源的培养基中,25113Δfrm A/p ZWM1-13号突变株较原始菌株25113Δfrm A/p ZWM1菌体生长量增加27.6%。对25113Δfrm A/p ZWM1-13号突变株进行^(13)C示踪分析检测蛋白质合成氨基酸,结果表明氨基酸中^(13)C比例有明显提高。其中,甲硫氨酸^(13)C标记含量增加7.236%。因此,定向进化有效地提高了基因工程大肠杆菌的甲醇利用效率。

关键词： 人源铜锌超氧化物歧化酶   基因工程   巴斯德毕赤酵母   表达   优化  

摘要： 超氧化物歧化酶(SOD)由于具有高效清除氧自由基的作用而广泛用于食品、日化和医药领域。作者研究了提高SOD产量的基因工程新方法。利用密码子优化后人源铜锌超氧化物歧化酶基因,构建亚克隆及表达载体,最终转化进巴斯德毕赤酵母进行表达。通过正交试验,分析工程菌的最适摇瓶表达条件。摇瓶正交试验确定最优表达条件为:28℃,诱导剂体积分数1.0%,接种体积分数1.0%,最优表达水平为2 339.4 U/mL,与现有的一些研究相比,其表达量提高了近3倍。这些结果表明:对人源铜锌SOD经过适当的密码子优化和发酵条件优化,使酵母表达量显著提高,有助于解决SOD原料来源的局限。

关键词： 乳酸菌   基因工程   重组   综述  

摘要： 乳酸菌是人和动物肠道内常见的益生菌,具有提供营养、改善胃肠道功能、提高免疫力、抗菌等作用,随着基因工程技术的发展,选择乳酸菌作为载体传递系统,在细菌、病毒、肿瘤、寄生虫等领域构建了一系列重组乳酸菌。本文就基因工程重组乳酸菌的制备及防治效果作一综述。

关键词： 转基因作物   安全评价   代谢组学   差异代谢物   能量代谢  

摘要： 转基因技术的应用十分广泛,尤其是用于获得具备优良性状的农作物新品种。但在转基因作物商业化推广的同时,农产品的安全问题一直备受关注。组学技术的不断发展,为转基因作物的安全评价提供了新方法。鉴于代谢组数据具有即时性和可获得性的特点,本文基于之前的研究,通过收集转基因作物代谢组方面文章的数据,对6种作物的野生型和转基因型样本的比较结果进行整合分析,通过显著性检验得到了8种代表性差异代谢物。代谢通路富集分析结果显示与这8种差异代谢物关联的蛋白质主要参与能量代谢过程,与已报道的单一物种转基因非预期效应的研究结果相同。该研究从代谢物和蛋白质两个方面说明转基因事件影响了这6种作物的能量代谢过程,并且该现象很可能普遍存在于多种转基因作物中。希望本研究结果可以为转基因农作物的安全评价提供参考。

关键词： 生物化学   医学   教学改革   基因工程  

摘要： 本文阐述了探究、培养学生分析解决问题能力的重要性,通过对学生的问题意识培养进行探讨,构建 平等的师生关系,转变教学观念,提高学生问题意识,开放学生思考方式,强化学生基本知识和提高其基本技能.

关键词： 植物生物技术概论   基因工程   视频资源   视频实验期刊(JoVE)   教学  

摘要： 《植物生物技术概论》基因工程部分信息量大、概念和技术方法多、涉及范围广、内容抽象,但课时数有限,不利于学生吸收理解。将网络视频尤其是Jo VE视频应用于该部分内容的教学,对教学效果的提高大有裨益。对网络视频资源的应用在《植物生物技术概论》基因工程部分教学过程中取得的效果进行总结,可为该部分内容的教学提供一定借鉴。