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关键词： 焦磷酸测序   DNA甲基化   平均峰高  

摘要： 目的研究不同的PCR产物投入量(2.5μL,5μL和10μL),对焦磷酸测序通过率的影响.方法从20例酒依赖患者和20例健康对照全血样本中提取DNA.按各样本的DNA用量200 ng进行亚硫酸盐转化,经PCR扩增后,按PCR产物不同投入量(2.5μL,5.0μL和10.0μL),对目的基因序列进行焦磷酸测序.结果比较各组平均峰高值和焦磷酸测序通过率,5μL体系的平均峰高以及焦磷酸测序通过率均高于2.5μL体系;10.0μL体系高于5μL体系,10μL体系为最佳.3组平均峰高和焦磷酸测序通过率,差异有统计学意义(P<0.05).结论在DNA量统一为200 ng进行亚硫酸盐转化的前提下,所得PCR产物投入量以10μL为最佳,焦磷酸测序通过率最高,达100%.

关键词： 电视节目   转基因技术   安全性问题   转基因作物   转基因食品   安全性评价   现代生物技术   环境安全  

摘要： 近年来，转基因作为一项新兴现代生物技术，在全球部分国家的农业生产中得到试验和应用，起到了提高粮食和农产品产量的重要作用。然而，自我国转基因技术研发和商业化生产以来，转基因作物的食用安全性和环境安全性问题就成为了人们争论的焦点。为此《农广天地》栏目专门拍摄了《转基因作物与环境安全》的科普宣传片，较深入全面地向观众朋友们介绍百姓关心的转基因食品的安全性问题，包括转入前基因的安全性、转基因食品的安全性评价以及转基因作物的环境安全性评价等内容。

关键词： 胚胎干细胞   中内胚层   TGF-β信号   Wnt信号   FGF信号   表观遗传修饰  

摘要： 在哺乳动物胚胎发育过程中,中内胚层(mesendoderm)也被称为原条(primitive streak),是中胚层和内胚层分化的过渡时期。中内胚层的存在时间较短,但成功的中内胚层分化对随后进行的中胚层与内胚层发育至关重要。发育生物学的研究极大地推动了人们对胚胎发育的认识,同时,越来越多体外分化系统的建立也加深了对环境信号如何影响胚层分化的理解。近些年来,通过表观遗传的研究,人们逐渐认识到染色体结构与组蛋白修饰的改变也在分化发育过程中起到重要作用。通过胚胎干细胞定向诱导中内胚层分化来探究相关分子机制,不仅有助于对早期胚胎发育的了解,也有助于临床应用与疾病治疗。现总结了TGF-β信号、Wnt信号和FGF信号调控中内胚层分化的研究现状,并概述了这些信号如何与表观修饰共同调控胚胎干细胞向中内胚层分化的进展。

关键词： 转化生长因子-β2   胚胎干细胞   心肌细胞   GATA6  

摘要： 目的:研究转化生长因子-β2(TGF-β2)在促进胚胎干细胞(ESCs)分化成心肌细胞中对GATA6表达的影响。方法:用"悬滴"法研究ESCs分化成心肌细胞。将ESCs(CGR8)分为对照组、TGF-β2(2 ng/ml)处理组和TGF-β2(10 ng/ml)处理组。第7天测量拟胚体(EBs)的直径,第14天统计贴壁拟胚体自发节律性跳动的百分数,免疫组织化学和免疫印迹检测GATA6的表达变化。结果:TGF-β2(10 ng/ml)可显著促进拟胚体生长,提高贴壁拟胚体跳动的百分数和促进高贴壁拟胚体中GATA6的表达。结论:TGF-β2促进ESCs分化成心肌细胞,可能与其上调GATA6表达相关。

关键词： 转基因作物   土壤微生物   多样性   研究策略  

摘要： 土壤微生物是土壤生态系统的一个重要组成部分,对土壤中的生物化学循环起着不可替代的驱动作用。转基因作物在生长过程中会不可避免地与土壤微生物发生交流,开展转基因作物对土壤微生物群落影响的研究对于科学评价转基因作物的潜在风险具有重要意义。随着现代生物技术的不断发展,土壤微生物多样性及其分析方法已经从传统的分离培养发展到从种群角度去研究整个土壤微生态系统内的微生物。但是由于土壤微生物的各种特性(如大部分不可培养、体积微小及群体效应等)和仪器设备检测性能的局限性,单一的研究方法会存在一些弊端,还需要结合其他的手段共同研究土壤生态系统中的微生物多样性。目前,人们对土壤微生物多样性的研究主要包括物种多样性、功能多样性、结构多样性及遗传多样性等4个方面,国内外关于转基因作物对土壤微生物多样性及其群落结构影响的研究方法很多,对常见的研究方法进行了总结,并提出了今后转基因作物对土壤微生物多样性及群落结构影响的研究策略。

关键词： 基因工程亚单位疫苗EG95   牦牛   效果   安全性  

摘要： 为研究牛包虫病基因工程亚单位疫苗EG95对牦牛的免疫效果、安全性,并调查该疫苗在不同性别、不同年龄、不同海拔地区牦牛间存在的免疫差异性。对4月龄及以上牦牛以免疫剂量每次1头份,每头份含EG95 250μg进行首免、加免(28d后)、安全评价(免疫剂量每次2头份含EG95 500μg),在试验前、首免后28d及加免后28d分别对免疫效果组和对照组牦牛采血,应用间接ELISA法检测血清中特异性抗体。结果显示,首免后28d免疫抗体群体阳性率为71.33%,加免后28d免疫抗体群体阳性率为83.00%,相比首免免疫抗体群体阳性率提高11.67%,与对照组、免疫前比较差异显著(P<0.05)。安全试验组牦牛免疫后第1天有6头出现精神沉郁、采食量下降、体温升高、注射部局部肿胀等不同程度免疫应激反应,4d后均恢复正常。石渠县、康定市不同海拔地区试验牦牛在免疫抗体产生时间、群体阳性率等方面,无明显差异(P>0.05)。结果表明,该疫苗适用于不同海拔地区牦牛使用,安全并可产生较高的抗体水平,对4月龄及以上牦牛免疫程序基本为2次免疫,分别颈部皮下注射1头份,间隔期28d。

关键词： 社会科技   人文反思   《文化纵横》   基因工程   21世纪   生命科学   细胞工程   医学技术  

摘要： 21世纪以来,人类社会科技的发展进入一个新的井喷期,生命科学（基因组计划、基因工程、细胞工程等）、医学技术工程、互联网信息科技、新型智能制造等领域都呈现出蓬勃发展的态势。不同于科技一日千里的发展,人文领域的思考范式却停滞不前,社会想象力日渐枯萎,在《文化纵横》2017年8月号,金观涛先生针对当前人工智能所带来的社会焦虑提出,其实质正是人文反思已经跟不上科学技术的发展脚步,终极关怀正在淡出公共讨论的视野。

关键词： 抗菌肽   毕赤酵母   发酵工艺   抑菌实验  

摘要： 本实验先以抗菌肽对金色葡萄球菌抑菌圈大小为指标,通过单因素和正交试验,对毕赤酵母基因工程菌发酵生产抗菌肽培养基配方和工艺进行了优化,获得工程菌株在2.0%甘油(v/v),1.5%柠檬酸铵,2.0%蛋白胨,1%酵母膏和0.25%谷氨酸组成的培养基中,30℃发酵培养24h补加1.5%甲醇(v/v),培养时间72h,抗菌肽抗菌效果最好,抗菌活性比优化前提高56.8%。最后用革兰阴性大肠杆菌和革兰阳性金色葡萄球菌验证了毕赤酵母基因工程菌发酵生产抗菌肽优化工艺参数的有效性。研究结果表明通过优化发酵工艺,可以提高工程抗菌肽的抗菌活性,同时也为该基因工程菌进一步工业化生产提供了重要的发酵工艺参数。

关键词： 转基因作物   鱼类   生态毒理学   转基因作物安全评价  

摘要： 转基因作物潜在的健康和环境风险一直以来颇受争议,转基因作物加工成动物饲料后可能会诱导动物产生免疫应激反应,影响动物的生长发育、繁殖等。鱼类是水生脊椎动物的代表,已广泛应用于水环境的监测,但目前转基因作物对鱼类的饲用安全性研究还相对较少。文章基于转基因作物作为鱼饲料原料对鱼类生态毒理学效应的研究现状,综述了转基因作物对鱼的生长表现、生理生化、脏器功能及发育、组织病理以及行为活动等方面的生态毒理学效应,分析了当前研究中存在的问题,并对今后的研究趋势进行了探讨。

关键词： 杨树   遗传   种质资源   基因工程   生态环境建设   目的基因   分子改良   研究进展   存在问题   解决途径  

摘要： 杨树作为全球使用最为广泛的生态、能源、分子遗传木本模式植物之一,其种质资源研究改良对我国生态环境建设意义重大。综述不同目的基因(抗虫、抗病、抗除草剂、抗逆境、降低木质素、促生长等)转化杨属植物的研究与应用,分析目前为止杨树分子改良研究应用发展现状、存在问题及解决途径,为杨树遗传改良的进一步发展提供参考。