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关键词： 人类基因组计划   内容   现状   未来  

摘要： 近年来人类基因组计划广泛的引起了人们的关注,我们大学生对这个计划的了解去还是有限的,我们应该了解它的内容、进程、未来,这样才能对我们未来生物基因学的发展产生良好的推进作用。本文通过浅显易懂的语言向大家简述人类基因组计划的内容、现状及未来。

关键词： 哺乳动物   胚胎干细胞   干细胞培养  

摘要： 胚胎干细胞(embryonic stem cell, ESC)具有发育分化的多潜能性和无限的自我更新能力,能在体外长期培养并具有向机体各种组织细胞分化的潜能。鉴于此,ESCs被广泛应用于研究胚胎发育与细胞分化调控,作为修复器官与器官移植的种子细胞,并生产转基因动物。本文综述了哺乳动物胚胎干细胞的研究现状以及几种哺乳动物胚胎干细胞的研究进展,并简单介绍了哺乳动物胚胎干细胞培养过程中的一些问题及改善方向。

关键词： 七氟醚   胚胎干细胞   自我更新能力   活性氧自由基   2-脱氧-D-葡萄糖  

摘要： 目的探讨2-脱氧-D-葡萄糖在逆转七氟醚引起胚胎干细胞自我更新能力下降的机制。方法采用鼠胚胎干细胞(m ESCs)作为研究七氟醚对孕早期胚胎毒性的模型,随机分成4组:对照组(暴露于5%CO2及21%O2的环境中)、七氟醚组(4.1%七氟醚的密封塑料盒中处理6 h)、2-DG组(10 mmol/L 2-DG处理6 h)、2-DG+七氟醚组(4.1%七氟醚+10 mmol/L 2-DG处理6 h)。各组干预6 h后,通过从形态学观测细胞宏观改变,荧光测定细胞内活性氧自由基(ROS)水平,qRT-PCR检测干性基因的mRNA表达情况和免疫萤光染色直接观察干性基因的水平四个方面比较七氟醚组与对照组在ROS水平和自我更新能力方面的差异。结果与对照组相比,七氟醚组细胞呈现高ROS水平,干性基因及其表达也有显著降低(P<0.05);对照组和2-DG组上述指标则无显著差异(P>0.05);2-DG+七氟醚组较七氟醚组ROS水平低,干性基因及其表达显著升高(P<0.05)。结论七氟醚通过诱导细胞内ROS产生从而导致了m ESCs的自我更新能力的下降。2-DG缓解其引起的高水平ROS从而逆转其对胚胎干细胞自我更新能力的抑制。

关键词： 人胚胎干细胞   Apelin13   心肌细胞   细胞分化  

摘要： 目的探讨Apelin13对人胚胎干细胞(hESCs)定向心肌细胞分化效率的影响。方法将hESCs单层培养后经EDTA消化传代,应用明确的诱导分化培养基对观察组(加Apelin13)和对照组(不加Apelin13)定向诱导hESCs向心肌细胞分化。于诱导第2天(中胚层阶段)、第4天(心肌分化初始阶段)、第7天(心肌分化末阶段)作为时间节点,采用实时荧光定量PCR检测两组Brachury T、Mesp1、NKx2.5、APJ mRNA表达水平,采用Western blotting检测两组Brachury T、Mesp1、NKx2.5、APJ、Nanog、Sox2蛋白表达;同时于诱导第7天采用细胞免疫荧光技术检测两组心肌细胞标志物肌钙蛋白T2(TNNT2)、α-辅肌蛋白(α-actinin)表达。结果诱导第7天观察组hESCs定向心肌分化程度高于对照组,免疫荧光染色倒置显微镜下可清楚看到成熟心肌细胞的肌结及心肌细胞TNNT2、α-actinin表达。在3个诱导时间节点,观察组Brachury T、Mesp1、NKx2.5、APJ mRNA及其蛋白表达均高于对照组(P均<0.05),观察组hESCs标志蛋白Nanog、Sox2低于对照组(P均<0.05)。结论 Apelin13可提高hESCs向心肌细胞的分化效率。

关键词： 紫菜腐霉   基因组DNA   RNA污染   透析  

摘要： 紫菜腐霉(Pythiumporphyrae)是一种专性侵染紫菜并引起紫菜赤腐病的病原菌。为了深入了解紫菜腐霉的遗传信息,本文计划对其开展全基因组测序,而制备高质量的DNA样品是关键性工作。海洋生物生境和代谢的特殊性,细胞中富含的一些次级代谢物质往往影响着DNA样品的质量。紫菜腐霉的基因组DNA样品中具有严重的RNA污染,即使通过延长RNase A降解时间和增加降解次数也不能完全消除其中的RNA,无法获得满足于PacBio文库构建和测序的DNA样品。本研究首先通过琼脂糖凝胶电泳(Agarosegel electrophoresis,AGE)来区分DNA和RNA,然后将DNA条带所在的胶块切下并放入透析袋中继续电泳,使DNA从胶条中迁移到透析袋内的缓冲液中,从而获得DNA的TAE溶液。然后通过透析的方法去除DNA的TAE溶液中的乙酸钠,最终获得DNA的TE溶液。经AGE检测发现DNA条带清晰、无RNA污染;经脉冲场凝胶电泳(Pulsed field gel electrophoresis,PFGE)检测发现DNA完整性较好,可用于PacBio文库的构建和测序。

关键词： 人胚胎干细胞   复审程序   伦理道德   专利审查  

摘要： 对于人胚胎干细胞应用相关主题的发明专利申请是否符合专利法中关于伦理道德的要求,是发明专利审查的难点之一。本文根据专利法的立法宗旨及胚胎干细胞技术的发展现状,通过对复审程序中维/撤驳案件的数量、理由、变化趋势等进行分析,以期对人胚胎干细胞应用相关主题的申请和审查提供一些借鉴和参考。

关键词： 多烯大环内酯抗生素   结构改造   产量提高   基因工程  

摘要： 多烯大环内酯抗生素是一类重要的高效广谱抗真菌药物,被广泛用于治疗真菌感染与食品防腐,但多烯大环内酯抗生素的进一步应用因其细胞毒副作用而被限制.多烯大环内酯抗生素的药理性质提升与产量提高是目前亟待解决的问题.本文总结了多烯大环内酯抗生素多烯区域、环外羧基、多元醇区域及糖基配体四方面的结构改造工作,系统阐释了多烯大环内酯抗生素的活性作用机制与构效关系.同时,总结了用于多烯大环内酯抗生素产量提高的调控基因改造、群体感应信号通路改造及前体供给优化等基因工程改造策略,指出了多烯大环内酯抗生素结构改造及产量提高面临的挑战与尚待解决的问题.

关键词： 番茄   基因工程   遗传转化   筛选  

摘要： 近年来,随着分子生物学技术的飞速发展,番茄的基因工程研究也取得了巨大的进步。该研究综述了转基因番茄的抗病毒性、抗虫性、抗逆性、改善番茄品质和种质资源利用等方面进行的研究进展,总结了转基因番茄在提高抗性和改善品质等方面的巨大应用价值,以期为今后转基因番茄的研究和品种改良提供参考依据。

关键词： 遗传与变异   遗传物质   基因工程  

摘要： 遗传生命现象如“种瓜得瓜,种豆得豆”和变异生命现象如“一树结果,有酸又甜”,遗传和变异是生物界普遍存在的生命现象,也是生命活动的基本特征之一,它们是一对矛盾,相互依存, 相互制约,相互促进。本文主要由微观到宏观,由实质到表象构造中学生物之遗传学基的 结构路线。