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关键词： 紫色红曲菌   红曲色素   桔霉素   pksCT基因   基因敲除  

摘要： 以一株高产红曲色素的紫色红曲菌(Monascus purpureus)J01为研究对象,采用根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的T-DNA转化技术,敲除紫色红曲菌株J01基因组中的桔霉素合成关键基因pksCT,构建一株不产桔霉素高产红曲色素的红曲菌株。结果表明,通过菌落形态观察和生物量测定得出,菌株J42与菌株J01的菌落形态及生物量无显著性差异(P>0.05);经高效液相色谱(HPLC)与液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)分析得出,菌株J01的桔霉素含量为5.1 mg/kg,pksCT基因敲除菌株J42菌丝体中未检测到桔霉素;菌株J42的黄色素,橙色素和红色素色价分别为1 877 U/g、773 U/g、1 068 U/g,显著高于菌株J01(P<0.01),并且菌株J42的红曲色素总色价为415 U/mL,是原始菌株的1.56倍,成功构建了一株不产桔霉素高产红曲色素的生产菌株J42。

关键词： 溶氧浓度   大肠杆菌   合成生物学   基因工程   DNA片段   重金属离子   酒精浓度   生物体  

摘要： 生物学历史悠久,而基因工程作为它的一个分支在近几十年才有了蓬勃的发展.基因工程的新分支——合成生物学,作为一个名不见经传的“年轻小将”,却毫不逊色于两位“老前辈”.这一分支,有着自己的特色和长处.其不同之处就在于“合成”二字,它把一个个有一定功能的DNA片段“拼接”成-个有具体功用的基因或序列,再送入所选择的生物体中,以实现生产药品、燃料、布料、染料,检测土壤重金属离子、酒精浓度等诸多功用.

关键词： rVP2   传染性法氏囊炎病   最佳   注射剂量  

摘要： 实验选取同一鸡场同一日龄的肉鸡12000只,随机分为三组,三组分别在8日龄时于颈部皮下注射鸡传染性法氏囊炎病基因工程亚单位疫苗(rVP2)0.3ml,0.4ml和0.5ml,在同一条件下进行饲养,接种疫苗后分别在7、14、21、28、35、42天按1%的比例采血琼脂免疫扩散试验检测传染性法氏囊血清抗体,发病情况和法氏囊指数,确定可以对传染性法氏囊炎病提供切实保护的最佳疫苗注射剂量。

关键词： gmrB基因   gmrA基因   庆大霉素   基因表达   基因工程  

摘要： 目的研究绛红色小单孢菌(Micromonospora purpurea)G1008中抗性基因gmrB与gmrA功能,为阐明庆大霉素生物合成机制奠定基础。方法以红霉素抗性基因ermE分别置换gmrB和gmrA基因,构建突变株GerB102和GerA102。借助TLC和MS分析突变株代谢产物是否变化,同时检测突变株耐受自身代谢产物的能力是否发生变化。结果突变株GerB102代谢产物没有发生明显变化,仍主要积累庆大霉素C化合物,而GerA102代谢产物发生变化。庆大霉素耐受性试验结果显示,GerB102和G1008耐庆大霉素浓度达到6000U/m L以上,而GerA102不足50U/m L。结论 gmrB既非庆大霉素生物合成的关键基因,也非关键的抗性基因,而gmrA是庆大霉素抗性的关键基因。

关键词： 胚胎干细胞   伦理   法律   规范  

摘要： 胚胎干细胞的研发需要人类胚胎作为原材料,因而国际上对该技术存在较大的争议;当慎重对待胚胎干细胞在研发中的伦理问题,尊重人的尊严,以确保技术研发在规范内良性运行。本文着重分析胚胎干细胞研发的法律问题,以提出切实可行的建议。

关键词： 胚胎干细胞   细胞生存   肝细胞   代谢   AML-12细胞  

摘要： 目的:研究胚胎干细胞分泌因子是否能增强AML-12细胞在恶劣条件培养下的抗凋亡能力。方法:分别用胚胎干细胞完全培养基(CON-M)和胚胎干细胞上清液(ESC-M)培养AML-12细胞,并置于恶劣细胞培养环境中培养,MTT法比较各组AML-12细胞活力;Seahorse细胞代谢分析仪比较各组AML-12细胞氧消耗率以及细胞外酸化率等呼吸功能代谢情况。结果:MTT结果显示在恶劣细胞培养环境中,于ESC-M中培养的AML-12细胞拥有更强的抗凋亡能力。Seahorse细胞代谢分析显示ESC-M培养能加强AML-12细胞糖酵解潜力、最大氧化呼吸能力以及氧化呼吸潜力。结论:胚胎干细胞分泌因子能够增强AML-12细胞在恶劣培养条件下的抗凋亡能力。

关键词： 胚胎干细胞   临床研究   细胞治疗  

摘要： 胚胎干细胞的基础研究和转化是再生医学领域的重要研究课题。继传统化学药品和外科手术后,具有自我更新能力和多向分化潜能的胚胎干细胞有望成为新的疾病治疗药物,将在神经退行性疾病、特定组织或细胞缺损性疾病等难治性疾病的治疗中发挥重要作用。该文综述了国内外人胚胎干细胞的临床研究进展,总结了其在黄斑变性、帕金森病、脊髓损伤和心血管疾病治疗中的临床研究,最后提出了该领域存在的关键问题和面临的重大挑战,并对人胚胎干细胞的未来临床应用进行了展望。

关键词： 转基因作物   德国   草甘膦   联盟   政府  

摘要： 德国联邦议院两大党联盟党和社民党最终于近日就联合组阁协议达成一致。尽管联盟党与社民党高层已就新一届政府施政纲领及人员组成达成一致,但于3月初举行的社民党全体党员表决仍是摆在组阁各方面前的“拦路虎”。新政府何时能积极参与到欧盟改革尚未可知,德国媒体EURACTIV报道。

关键词： NSD2   H3K36甲基化   组蛋白甲基转移酶   胚胎干细胞   神经细胞  

摘要： 目的在体外建立小鼠胚胎干细胞(m ESCs)向神经细胞(NCs)方向分化体系,观察组蛋白甲基化转移酶NSD2及其相关的组蛋白修饰H3K36二甲基化(H3K36me2)、H3K36三甲基化(H3K36me3)在NCs发育过程中的表达变化。方法用维甲酸(RA)诱导m ESCs向NCs方向分化,通过观察细胞形态和RT-q PCR检测分子标志物来验证m ESCs诱导分化效果,用Western Blot方法检测NSD2以及其相关的组蛋白甲基化修饰在诱导分化过程中的蛋白水平变化。结果与m ESCs状态相比,在m ESCs向NCs方向分化的过程中,NSD2蛋白表现出先升高后下降的变化,差异具有统计学意义(均P<0.05),而其相关的组蛋白甲基化标记H3K36me2和H3K36me3蛋白表达总体变化不大,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 ESCs向NCs分化过程中NSD蛋白表达量的改变与相关组蛋白修饰变化趋势不完全一致,组蛋白甲基化修饰总量的变化比较小,这可能是因为同时受到其他甲基化转移酶与去甲基化酶综合作用的结果。

关键词： 胚胎干细胞   细胞分化   肾脏样结构  

摘要： 目的在体外诱导胚胎干细胞(ESCs)向肾脏细胞分化,并自发形成包含肾小球、近端小管、远端小管以及血管网络的肾脏样结构。方法在体外将ESCs培养至40%~50%汇合度。然后在成纤维细胞生长因子9(FGF9)与肝糖原合成激酶3β受体的选择性抑制剂CHIR99021的作用下,诱导ESCs分化形成肾脏样结构,对该肾脏样结构分别进行免疫荧光染色检查与电镜检查,以观察其内部结构并且成像记录。结果通过细胞因子FGF9与CHIR99021的作用,成功诱导ESCs分化形成了肾脏样结构,结构鉴定证实其中有肾小球、近端小管、远端小管以及血管网络的存在。结论利用ESCs分化可以形成包含完整肾单位及血管网络的肾脏样结构,其结构类似于正常肾脏。