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关键词： decision support systems   Delivery of Health Care   Machine Learning   Artificial Insemination   bioethics  

摘要： Artificial intelligence and machine learning have the potential to revolutionize the delivery of health care. But designing machine learning-based decision support systems is not a merely technical challenge. It also requires attention to bioethical principles. As AI and machine learning advance, bioethical frameworks need to be tailored to address the problems that these evolving systems might pose, and the development of these automated systems also needs to be tailored to incorporate bioethical principles.

关键词： 人胚胎干细胞   造血分化   BET   bromodomain蛋白   I-BET   151  

摘要： 目的:探讨BET bromodomain蛋白在人胚胎干细胞造血分化中的作用。方法:应用人胚胎干细胞单层造血分化体系,通过免疫荧光技术、流式细胞术及实时定量PCR技术,研究BET bromodomain蛋白抑制剂I-BET151对造血分化的影响,并在不同分化阶段添加I-BET 151探讨其在造血分化过程中的作用阶段。结果:I-BET151能够显著抑制CD43^+造血干/祖细胞的产生,并且在APLNR^+侧板中胚层生成、CD34^+CD31^+生血内皮产生及内皮细胞生血转化3个阶段添加I-BET 151对CD43^+造血干/祖细胞的产生均有显著抑制作用。结论:人胚胎干细胞造血分化过程中添加BET bromodomain蛋白抑制剂I-BET 151,能够抑制CD43^+造血干/祖细胞的产生,并进一步证实BET

关键词： T279   基因敲除   打靶载体   同源重组   小鼠  

摘要： 目的:利用打靶载体技术构建小鼠T279基因敲除胚胎干细胞模型。方法:订购含小鼠T279基因的129BAC质粒和PL452,PCR扩增Retrieving同源臂及loxp-neo-loxp片段,利用PL253质粒进行目的片段的连接,并在EL350大肠杆菌中进行同源重组,构建T279打靶载体,将其电转染小鼠胚胎干细胞,利用Southern blot方法鉴定同源重组的阳性克隆。结果:经限制性内切酶酶切鉴定及DNA测序鉴定,T279打靶载体构建成功。Southern blot结果显示成功筛选到同源重组的敲除T279基因的胚胎干细胞克隆。结论:T279基因敲除打靶载体构建成功并筛选到了同源重组阳性的胚胎干细胞克隆。

关键词： 胚胎干细胞   分化   Wnt/β-catenin信号   EMT   肝脏组织  

摘要： 目的在前期体外诱导小鼠胚胎干细胞（ESC）向肝系细胞分化基础上，从细胞上皮间质转化（EMT）角度研究ESC分化为肝脏组织结构的可行性。方法选用Balb/c小鼠ESC，首先利用肝细胞生长因子（HGF）、成纤维细胞生长因子（FGF）等体外诱导ESC向肝系细胞方向分化，然后在分化中期（13 d）、成熟期（17 d）两个时间点动态抑制细胞Wnt/β－catenin信号以降低其EMT水平。最后在分化系统中观察分化细胞保持三维组织结构生长情况，检测其中肝系细胞和血管标志物白蛋白（ALB）、血管内皮生长因子（VEGFR）等表达情况，综合判断有无肝脏组织形成，并研究该过程中EMT水平变化的规律和机制。结果ESC分化过程中，分化前期实验组EMT水平与对照组差别不明显，分化中、后期实验组EMT水平较对照组明显降低，分化第18天和20天，实验组上皮钙黏蛋白（E－cad）基因mRNA相对表达水平分别为0.61±0.15和0.47±0.05，对照组分别为0.07±0.05和0；实验组的ALB/AFP/CK8/CK19表达水平在同期内较对照组普遍偏高，标志物CD31/VEGFR1在分化中后期较对照组下降缓慢。在ESC培养上清液中，实验组ALB于第11天可检测到，浓度为（0.32±0.02）mg/L，而对照组ALB为（0.19±0.05）mg/L；实验组尿素于第13天开始检测到，浓度为（8.7±1.0）μmol/L，对照组尿素浓度为（3.1±1.2）μmol/L。ALB和尿素合成在ESC分化系统培养上清中浓度随分化时间延长而明显升高，并且实验组的ALB、尿素浓度值在相同的时间段内明显多于对照组。另外，实验组分化细胞可保持三维组织状态生长，对照组分化细胞最终呈单细胞状态。实验组可检测到肝系细胞标志物以及血管细胞标志物的表达，免疫荧光结果显示类肝细胞和血管结构紧密层状排列，HE染色提示有类肝小叶结构形成，而对照组无血管成分标志物表达。结论ESC向肝系细胞分化中，在分化中、后期降低EMT水平，可有效促进ESC向肝脏组织结构分化。

关键词： 国际科技合作   转基因作物   立项   研发中心   名单   科学技术委员会   南美   联合实验室  

摘要： 2018年7月31日,北京市科学技术委员会完成了2018年度国际科技合作专项国际优秀项目成果落户北京、推动企业走出去开展海外布局、共建联合实验室、企业走出去专业服务支撑、适用技术培训班共5类工作任务的评审工作,并拟对以上5类工作任务的共78项具体任务给予立项支持,同时北京市科学技术委员也发布了《2018年度拟立项国际科技合作专项工作任务名单》。

关键词： TSC21   基因敲除   打靶载体   同源重组   小鼠  

摘要： 目的:构建小鼠TSC21基因敲除打靶载体,电转胚胎干细胞(ES细胞)并筛选同源重组阳性克隆。方法:订购含TSC21基因的129 BAC克隆,PCR扩增2对同源臂,利用PL253、PL452质粒进行目的片段的连接和同源重组,构建打靶载体并电转ES细胞,利用Southern blot方法鉴定同源重组阳性ES细胞克隆。结果:构建了TSC21基因敲除打靶载体,经过限制性内切酶鉴定及DNA测序鉴定,TSC21基因敲除打靶载体构建成功。Southern blot结果显示成功筛选到打靶序列同源重组阳性ES细胞克隆。结论:TSC21基因敲除打靶载体构建成功并筛选到同源重组阳性ES细胞克隆。

关键词： 实时荧光PCR探针法   DNA测序法   CYP2C9   VKORC1  

摘要： 目的:比较实时荧光PCR探针法和DNA测序法检测细胞色素氧化酶P450(CYP2C9)和维生素K环氧化物还原酶复合体1(VKORC1)基因多态性的一致性,建立适用于临床推广的华法林基因多态性检测的方法。方法:本研究随机收集清远市人民医院20例就诊患者的全血标本,应用实时荧光PCR探针法和DNA测序法检测其CYP2C9和VKORC1基因的多态性,结果运用Excel软件统计并进行比较分析。结果:两种方法对CYP2C9和VKORC1基因多态性的检测结果一致,且实时荧光PCR探针法比DNA测序法更简易、经济、快捷。结论:与DNA测序法相比,应用实时荧光PCR探针法检测CYP2C9和VKORC1基因的突变具有较高的临床应用价值,比较适用于临床检测。

关键词： 疫苗   免疫系统   病原微生物   代谢产物   基因工程   病原菌   物体   传染病  

摘要： 疫苗的定义疫苗是将病原微生物（如细菌、病毒等）及镇代谢产物，经过人工减毒、灭活或利用基因工程等方法制成的用于预防传染病的自动免疫制剂疫苗保留了病原菌刺激动物体免疫系统的特性。当动物体接触到这种不具伤害力的病原菌后．免疫系统便会产生一定的保护物质，如免疫激素、活性生理物质、特殊抗体等：当动物再次接触到这种病麒苗时，动物体的免疫系统便会依循其原有的记忆，制造更多的保护物质来阻止痛原菌的伤害。

关键词： T-DNA插入位点   重测序技术   转基因植物  

摘要： T-DNA插入位点的获得对于植物功能基因组学研究及转基因植物的筛选鉴定非常重要,但是目前常用的方法如反向PCR、半随机引物PCR等,除了操作复杂、消耗时间长外,特异性较差,效率也很低。本研究利用全基因组重测序技术,将3份转基因材料基因组DNA打包后进行重测序,利用转基因载体序列作为参考序列进行比对分析,得到4个T-DNA插入位点。对3份转基因材料进行PCR和Southern blot验证分析,成功获得了3份转基因材料全部T-DNA插入位点,其中1份材料为2拷贝插入。本文利用重测序技术建立了一种简单、可靠、高效的获取转基因植物T-DNA插入位点的方法,以期为植物功能基因组学及转基因研究奠定基础。

关键词： 生物纳米孔   DNA测序  

摘要： 本文从生物纳米孔的-HL纳米孔、Aerolysin纳米孔、MspA纳米孔、噬菌体phi29连接器的四种分类出发,对生物纳米孔分析技术的应用与发展进行了分析,纳米孔分析技术的发展,特别是近年来在DNA测序得到了广泛应用。