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关键词： 病原体   基因工程技术   亚单位疫苗   病毒载体疫苗   核酸疫苗  

摘要： 疫苗接种被认为是控制病原体和预防人类以及动物疾病最有效的方法之一.近年来由于病毒性疾病来势汹汹,传统疫苗如灭活或减毒活疫苗的局限性及潜在问题日益突显,而基因工程技术的进步使得疫苗设计和研发得以改进,由此衍生的病毒类基因工程疫苗作为下一代疫苗越来越受到研究者的高度关注.通过病毒类基因工程疫苗的类型,重点介绍不同疫苗的开发原理、特点及用途,探讨其应用前景和发展趋势,旨在为新发病毒类疾病疫苗的研发提供参考.

关键词： 课程标准   项目学习   生物学教学  

摘要： 根据“以课程标准为核心的项目学习”的教学方法,培养学生合作学习、创新意识等能力。以选择性必修模块3概念5“基因工程赋予生物新的遗传特性”的实验教学为例,阐明“以课程标准为核心的项目学习”的策略方法。

关键词： 造血干细胞   免疫细胞   基因工程   调控机制   综述  

摘要： 造血干细胞(HSC)具有高度自我更新、增殖和多向分化等潜能。长期以来,HSC移植一直是治疗血液性疾病和自身免疫性疾病的主要方法,而移植后免疫系统的重建能力是评价移植是否成功的关键。为了提高移植后免疫系统的重建能力,目前研究多集中于基因工程,以及利用规律间隔成簇短回文重复序列(CRISPR)基因编辑技术改造HSC作为移植细胞的来源。本文主要对HSC的生物学特性、调控机制、分化为免疫细胞的能力以及在治疗血液、免疫缺陷、癌症等相关疾病的应用及其研究进展进行总结,以期为相关疾病的研究提供参考。

关键词： 植物   抗旱   调节基因   功能基因   基因工程  

摘要： 干旱会严重影响植物生长发育,甚至降低作物产量和品质。为了应对干旱胁迫,植物体内会有大量基因被诱导表达,以适应或抵御干旱胁迫,其中功能基因是干旱胁迫调控通路的终端,直接起保护作用。功能基因主要包括渗透调节物质合成相关基因、活性氧清除相关基因、保护细胞免受水分胁迫伤害的功能蛋白基因等。本文从上述三方面综述了植物抗旱功能基因的研究进展,以期为通过基因工程技术改良植物抗旱性、培育抗旱品种提供参考。

关键词： 生物多样性   生态系统   环境伦理学   人类中心主义伦理观   非人类中心主义伦理观   环境协同主义伦理观  

摘要： 生物多样性丧失和生态系统退化日益加剧,迫使我们重新思考人与自然的关系,深刻反思人类中心主义伦理观的正当性,进而提出更有利于生物多样性和生态系统保护的非人类中心主义伦理观。生物多样性和生态系统关系到人类的可持续发展,其保护成效在很大程度上取决于人类秉持何种环境伦理观。本文对环境伦理学的主要流派进行综述,分析古典和开明的人类中心主义伦理观、动物解放和动物权利伦理观、生物中心主义伦理观、生态中心主义伦理观、环境协同主义伦理观等西方环境伦理学流派的主要观点及其对生物多样性和生态系统保护的启示意义。同时还分析了中国传统文化背景下的环境伦理观,说明儒家文化的环境伦理观属于开明的人类中心主义伦理观,而道家文化的环境伦理观更接近于环境协同主义伦理观。研究表明,生物多样性丧失和生态系统退化,表面上是经济发展与环境保护相互矛盾的产物,实质上是长期以来环境伦理观在调节人与自然关系时发生偏差的结果。唯有树立正确的环境伦理观,才能从根本上遏制生物多样性丧失和生态系统退化的势头,才能从机制上实现“天地人和”的永续发展,才能真正做到“万物各得其和以生,各得其养以成”。

关键词： 胚胎干细胞   肺祖细胞   肺纤维化   免疫缺陷小鼠  

摘要： 目的研究肺祖细胞在小鼠肺内定植的情况及其对小鼠肺纤维化的影响。方法人胚胎干细胞体外分化为肺祖细胞,经免疫荧光和细胞流式术鉴定后,移植至正常免疫缺陷小鼠肺内,观察其定植的时间以及是否在体内发生分化为成熟肺上皮细胞。免疫缺陷小鼠经气管灌注博来霉素(2μg/10 g)建立肺纤维化模型,并将肺祖细胞移植至肺纤维化的小鼠肺内,治疗后取肺组织进行切片做苏木素-伊红染色和Masson染色,同时检测肺内低α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、细胞外基质蛋白-1(ECM-1)和羟脯氨酸表达的变化,以及检测凋亡的情况。结果免疫荧光和细胞流式术显示,定型内胚层细胞阶段标志物叉头框蛋白A2和趋化因子受体4的表达率能达到90%,肺祖细胞标志物NKX2.1显示肺祖细胞的分化效率为70%;在移植后4周,在免疫缺陷小鼠肺内找到定植的肺祖细胞,但未发现肺祖细胞表达表面活性物质C;灌注肺祖细胞后,各组间反映肺纤维化程度的Aschcroft score、α-SMA、ECM-1比较,差异有统计学意义(P<0.01);各组间反映肺上皮功能的表面活性物质C荧光面积比较,差异有统计学意义(P<0.01);各组间反映胶原水平高低的羟脯氨酸浓度比较,差异有统计学意义(P<0.01);反映细胞凋亡的原位末端转移酶标记技术染色实验,各组间荧光面积比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论肺祖细胞可以在免疫缺陷小鼠肺内定植,不能分化为成熟的肺上皮细胞,但能抑制肺纤维化的进展。

关键词： 短串联重复序列   分型标准外等位基因   Penta D   DNA测序  

摘要： 目的鉴定1例新的PentaD基因座短串联重复序列(STR)分型标准外(OL)等位基因的序列构成。方法用AGCU Expressmarker 22荧光检测试剂盒和华夏TM白金PCR扩增试剂盒对一对父女进行STR分型。用Chelex-100法提取DNA,进行PentaD基因座的PCR扩增,纯化回收PCR扩增片段后进行测序。结果AGCU Expressmarker 22荧光检测试剂盒检出Penta D基因座为单峰,相邻的D10S1248基因座检出三等位基因;华夏^(TM)白金PCR扩增试剂盒检出PentaD和D10S1248基因座为双等位基因,PentaD基因座检出OL等位基因;测序结果显示该OL等位基因核心序列为[AAAGA]_(20)AAAA,是一个新的微变异等位基因。根据法医学STR基因座命名规范,将该等位基因命名为20.4。结论对于STR分型中出现的微变异等位基因或OL等位基因可进行测序鉴定,对于OL等位基因的精确分型将丰富STRBase数据库,对提高基因座个体识别和亲权鉴定能力具有重要意义。

关键词： 杜氏肌营养不良症   基因治疗   腺相关病毒载体   基因工程   肌肉靶向  

摘要： 杜氏肌营养不良症(Duchenne muscular dystrophy,DMD)是一种由抗肌萎缩蛋白(dystrophin)编码基因突变引起的进行性肌肉萎缩疾病,机体无法产生正常功能的dystrophin,最后由呼吸肌或心肌衰竭引发成年早期死亡。全身系统性基因治疗是最大程度治疗DMD的最有效方法。腺相关病毒(adeno-associated virus vector,AAV)是当前极具应用前景的基因治疗载体,在多种遗传性疾病的临床治疗中取得了前所未有的成功。然而,针对DMD的AAV载体基因治疗仍面临巨大挑战,包括无法容纳dystrophin全长编码序列,载体的肌肉靶向性不足且大量滞留在肝脏,AAV在体内大幅降解严重降低转导效率,机体对AAV衣壳蛋白产生免疫反应,AAV规模化制备的实施难度,以及安全性风险等。AAV载体优化旨在利用基因工程技术改变其相关特性以定制适用于DMD基因治疗的最佳载体。本文综述了AAV载体优化的方向及策略,以期跨越DMD基因治疗的障碍。

ISBN: (纸本)9787030771780

关键词： 转基因   筛选标记   数字PCR (dPCR)   FMV 35S   定量检测  

摘要： 以含有FMV 35S标记基因的大豆转化体MON87705为材料，利用实时荧光定量PCR(real-time fluorescent polymerase chain reaction，qPCR)和数字PCR(digital PCR，dPCR)技术，建立一种转基因作物的定量检测方法。通过实时荧光PCR法对扩增体系测试，建立的检测方法对FMV 35S标记基因具有高度特异性；利用双重微滴式数字PCR( Duplex Droplet-based digital PCR， duplex ddPCR)进行定量检测参数的测定，结果表明：在基因组DNA 0.005 ng·μL-1～20 ng·μL-1浓度范围，靶标基因的测量拷贝数与理论拷贝数具有良好的线性关系；数字PCR方法对FMV 35S标记基因的检测限可达到5 拷贝，定量限为0.1%(w/w)。利用两个数字PCR平台，对不同含量的转基因作物的盲样进行测定，内标准基因和外源特异性片段的双重、三重测定，均获得准确的定量结果，数据可靠，再现性良好。因此本研究建立的基于筛选标记基因FMV 35S的转基因数字PCR定量检测方法，可满足转基因成分定量检测标准的参数要求的同时， 进一步提高了检测效率，为转基因作物成分定量提供了一种准确、简便的检测技术。