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关键词： 胚胎干细胞/细胞学   肌细胞,心脏/细胞学   哺乳动物雷帕霉素靶蛋白   钙信号   内质网   线粒体  

摘要： 目的:探索Rictor在小鼠胚胎干细胞来源心肌细胞(ESC-CM)中的表达、定位及其对线粒体钙信号的调控作用。方法:通过经典“悬滴一悬浮一贴壁”三步法建立ESC-CM模型。利用免疫荧光法及蛋白质印迹法观察Rictor在ESC-CM中的定位。慢病毒技术干扰小鼠胚胎干细胞Rictor表达后,采用免疫荧光法考察ESC-CM内质网与线粒体的叠加情况;通过透射电镜观察ESC-CM的超微结构;活细胞工作站测定分化后心肌细胞线粒体钙瞬变;免疫共沉淀法检测ESC-CM中1,4,5-三磷酸肌醇受体(IP3R)、葡萄糖调节蛋白75(Grp75)、线粒体外膜的电压依赖性阴离子通道1(VDAC1)间的相互作用;蛋白质印迹法检测线粒体融合蛋白2(Mfn2)的表达情况。结果:Rictor在ESC-CM中主要定位于内质网及线粒体一内质网结构偶联(MAM)域,且其表达定位与线粒体及内质网有很好的叠加。干扰Rictor后,心肌细胞线粒体部分呈散点状,线粒体与内质网的叠加率降低(P<0.01);ESC-CM超微MAM形成减少;ATP刺激引起的ESC-CM线粒体钙瞬变幅度下降,其中钙瞬变斜率和上升峰值均降低(均P<0.01);MAM中IP3R、GTp75、VDAC1相互作用明显减弱,且Mfn2蛋白表达降低(P<0.01)。结论:干扰小鼠胚胎干细胞中Rictor表达可降低ESC-CM中钙从内质网到线粒体的释放,这可能是通过影响IP3R、Grp75、VDAC1间相互作用,减少Mfn2表达,进而破坏MAM来实现的。

关键词： 重组胶原蛋白   交联   创面止血   胶原蛋白海绵   基因工程   宿主菌   基因工程菌   胶原   止血   交联试剂   组织工程  

摘要： 背景:重组胶原蛋白具有良好的亲水性及生物相容性,但其存在溶解性强及机械强度不足等缺点。化学交联可显著提高材料的韧性、力学强度及耐降解性。目的:制备重组胶原蛋白海绵,并对其理化性质及安全性进行评价。方法:采用微生物发酵法获得重组胶原蛋白,经戊二醛交联后,将其置于模具中冷冻干燥,获得多孔重组胶原蛋白海绵,检测交联后重组胶原海绵的吸水率与孔隙率,采用扫描电镜观察交联前后重组胶原海绵的表面形态,红外光谱仪对比交联前后重组胶原海绵结构的变化。采用交联重组胶原海绵浸提液培养L929细胞,培养第68小时,采用MTT法检测细胞相对增殖率,评估交联重组胶原海绵的细胞毒性。结果与结论:(1)交联后重组胶原海绵的吸水率为(2 903.83±47.90)%,平均孔隙率在85%以上;(2)扫描电镜显示,交联前,重组胶原海绵的孔隙呈蜂窝状,致密;交联后,重组胶原海绵的孔隙较大,呈板层结构,可看到板层间桥键连接,纵向可看到较大褶皱;(3)红外光谱显示,交联后的重组胶原海绵特征性化学结构特征无明显变化;(4)交联重组胶原海绵浸提液培养L929细胞的相对增殖率为84%,细胞毒性为1级,生物安全性良好;(5)结果表明采用戊二醛交联制备的重组胶原海绵,理化性质稳定,生物相容性良好。

关键词： 自由粒子   谐振子   布朗运动   胚胎干细胞   何泽慧  

摘要： 国际劳动妇女节全称'联合国妇女权益和国际和平日'或'联合国女权和国际和平日',在中国又称'国际妇女节'、'三八节'和'三八妇女节',是在每年的3月8日为庆祝妇女在经济、政治和社会等领域做出的重要贡献和取得的巨大成就而设立的节日。在女性权利日益被关注的今天,女性工作者在越来越多的领域展露才能,以毫不逊色于男性的卓越成就推动着社会的发展。一直以来,科学研究是一个公认的男性占据主导地位的领域。然而,这并不能阻挡女性科学家在该领域占得一席之地。特别是,随着中国科研环境不断改善和提高,从事科学研究的女性越发活跃。尽管女性相对男性来说容易精力分散,但关注细节也是女性科研人员的一大优势。联合国教科文组织总干事阿祖莱就曾表示:'我们正生活在不断创新的科技时代,解决面临的问题要依靠人类共同的智慧,需要女性科学家的才能和创造力。'她同时强调,目前科研领域的女性比例仍然较低,性别平等不仅需要集体意识和建立规章制度,更需要每个人都行动起来。显然,在中国乃至世界范围内,科学领域的性别比例失衡是长期存在的。'在我国科技创新的伟大征程中,3600多万女科技工作者在科学技术重大、前沿领域发挥着越来越重要的作用,成为建设创新型国家和世界科技强国的重要力量和宝贵财富。同时,当前我国女性科技工作者还存在‘高位缺席’现象,在高层次科学家、科技领军人才队伍中,越往象牙塔的顶端,女性越少。数据显示,中国科学院800名院士中女性仅占6%,中国工程院877名院士中女性仅占5.1%,这表明我国女性科技工作者蕴藏着巨大的科研潜力。'中国科学院院士怀进鹏表示。同样最新的国际调查报告指出,尽管多个国家的女性大学生和研究生数量皆高于男性,但女性教授却相对较少,且雇佣、薪资、资助、满意度和专利等方面都存在着性别不平等。对于此,美国印第安纳大学布卢明顿分校信息与计算学院的助理教授***和同事开展了一项全球化且跨学科的文献计量分析,其内容包括:性别与研究产出之间的关系、合作程度,以及从2008年到2012年期间发表且可以在汤森路透科学数据库网站索引到的所有文章的科学影响。分析发现,在研究产出最多的国家,所有主要作者为女性的文章被引用的次数要低于男性为主要作者的文章,而且与男性相比,女性作者的文章更多发表在国内,从而由国际合作所产生的额外引用量更少。数据还表明,由于合作是科研产出和科学影响的主要动力之一,推进女性研究人员参与国际合作的项目某种程度上可以促使科学界的性别比例更加公平。女性的权益不容被剥夺,女性的智慧也不容被忽视。多年来,女性科学家不再是凤毛麟角的存在,她们凭借自身的卓越才能和努力,在各科学领域成为佼佼者,绽放出独一无二的光芒。在中国近现代史上,有哪些投身科学的女性,以非凡的毅力、创造力和智慧撑起了科技发展的一片天?

关键词： 遗传转化   基因型   真空   农杆菌   miRNA  

摘要： 柳枝稷(Panicum virgatum)是C4暖季草本植物。具有许多优良的农艺性状,如广泛的地理适应性,耐贫瘠,生产成本低,水利用率高,生物质产量高,易于收获,因此被认为是重要的生物能源作物。通过生物技术对柳枝稷进行遗传改良,对于充分开发柳枝稷的生物质潜能,利用柳枝稷生产生物燃料具有重要意义。本文从柳枝稷遗传转化技术及改良性状的角度综述了柳枝稷的基因工程进展,为培育优良柳枝稷新品种提供参考。

关键词： 自然分材教学   高中生物   教学实例   基因工程  

摘要： 自然分材教学是教师让教学内容随学生的学力差异自然分化并指导学生研究和解决自己学习中存在的问题的教学理论与实践形态,课例以自然分材教学理论为指导,课堂分为感情调节、自学、互帮、释疑、合作交流与检测等环节,体现了以学生为主体的理念,落实了课堂教学效果检测,培养了学生的生物学核心素养。

关键词： 基因编辑婴儿   生命伦理学   生物医学  

摘要： “基因编辑婴儿”事件反映了我国现代生物学的发展在负责任研究、伦理审查和法律监管等方面的不足。要实现我国伦理、法律与现代生物学的共同演进,达到科技研究和应用所追求的公众利益最大化与风险最小化的目标,必须加强科学家与生命伦理学家的合作,避免触碰伦理准则和法律法规的红线。

关键词： DNA指纹图谱   教案   制作   密码   发现过程   亲子鉴定   实验操作   基因工程  

摘要： 教学背景DNA指纹图谱技术是1985年英国莱斯特大学的Jeffreys首次报道的,目前已具有广泛的应用,从基础研究到DNA亲子鉴定及法医刑侦分析等。一方面,该技术背后涉及遗传学的基本理论,另一方面,也贯通了多个基因工程实验操作。教师们在讲授这门课程时,往往注重其原理及应用,但忽略了这一技术本身的发现过程及其背后蕴含的严谨逻辑。更重要的是,这一技术的发现过程体现了科学家的探索精神和强烈的责任感。因此,本微课设计了师生对谈的形式,通过真实的案例,创造身临其境的场景,引导学生通过自主探究的方式寻求问题的答案,让学生们体会到科学发现的艰辛与美好。

关键词： 实验室自适应进化   连续定向进化   微生物细胞工厂   基因工程  

摘要： 当前,微生物细胞工厂的构建逐渐成为工业上生产大宗和精细化学品的重要手段。然而,微生物遗传背景的复杂性及表型间相互影响的不可预测性限制了人们对微生物的理性改造。因此,在缺乏遗传背景基础上仍能获得目标表型的微生物实验室进化手段逐渐成为当今生物化工领域的研究热点。近年来,随着微生物连续培养技术及体内连续进化策略的深入研究,微生物实验室进化取得了较大进展。本文中,笔者将对近年来微生物实验室进化策略进行综述,为其后续研究及应用提供借鉴。

关键词： 翻转课堂   高中生物  

摘要： 利用翻转课堂模式设计"基因工程的应用"一节教学,分析其在教材中的作用及学情,详细阐明教学设计意图,教学提供参考。

关键词： 法医遗传学   微变异等位基因   短串联重复序列   DNA测序   Penta   E基因座  

摘要： 目的鉴定一例Penta E基因座的罕见大片段短串联重复序列(short tandem repeat,STR)分型标准外(off ladder,OL)等位基因的序列构成。方法用PowerPlex■21检测系统对一对父女进行STR分型。用Chelex-100法提取其DNA,进行Penta E基因座的PCR扩增,纯化回收扩增片段后进行克隆测序。结果Penta E基因座检出OL等位基因,根据其片段大小,推测为26等位基因。Penta E基因座中的OL等位基因含有26个[AAAGA]重复,是一个新的等位基因,涉及重复单元完整的重复。结论对于STR分型中出现的分型标准外的等位基因或微变异等位基因宜进行测序分析,对于OL等位基因的正确分型将丰富STRBase数据库,对提高基因座个体识别和亲权鉴定能力具有十分重要的意义。