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关键词： 基因工程   斑节对虾   抗菌肽   crustin家族   carcininPm3基因   原核表达   重组蛋白   亲和层析  

摘要： crustin是对虾中重要的抗菌肽,本研究获得的carcinin Pm3属于斑节对虾crustin家族,是一种新型抗菌肽,成熟肽含有92个氨基酸,与其他对虾抗菌肽的同源性小于45%.根据其氨基酸序列和大肠杆菌(Escherichia coli,***)的密码子偏好性设计carcinin Pm3的基因序列,将carcinin Pm3连接到原核表达载体pSmartI-SUMO上,构建重组表达载体p SmartI-SUMO-carcinin Pm3,再转化至原核表达菌株*** BL21(DE3)中,通过异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropylβ-D-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导SUMOcarcinin Pm3的融合表达,进一步优化其表达条件,获得表达量大、可溶性高的重组蛋白.通过亲和层析纯化得到重组蛋白,蛋白的质量浓度达到195μg/m L.利用SUMO酶去除SUMO融合标签,获得没有外源标签的carcinin Pm3抗菌肽,可用于蛋白功能分析、抗体制备等研究.研究结果为carcinin Pm3功能的分析及应用提供参考.

关键词： 科学思维   纸片模型   限制酶  

摘要： 在课堂教学中创设情境和任务,引导学生利用纸片模型模拟筛选含目的基因受体细胞的过程,通过层层递进的问题培养学生的科学思维能力,总结归纳限制酶的选择依据。

关键词： “互联网+”教学平台   基因工程   实验过程评价   师生互动  

摘要： 借助“互联网+”,搭建基因工程实验教学平台,“课前”“课中”“课后”三环节紧密衔接,发挥“互联网+”优势,拓宽师生交流的时间和空间,确保教学质量.统计发现,“互联网+”下基因工程教学平台人均使用率为77.3次/学期,学生使用积极性高;使用教学平台学生的实验报告、实验技能测试和期末总成绩分别为91.8±2.2、89.5±10.3、91.0±6.2(N=68),与未使用平台的学生成绩相比有极显著提高,由此可见,借助“互联网+”,搭建基因工程实验教学平台辅助教学可提高基因工程实验教学质量.

关键词： 抗生素   生物工程   异源表达   益生菌  

摘要： 采用肠道益生菌重构肠道生态平衡,治疗各种代谢相关慢性疾病,是当前保健和医疗行业的热门研究领域。由于人群个体差异,益生菌的治疗效果并不稳定。采用合成生物学手段,将具有特殊治疗作用的功能片段导入益生菌中,创造具有靶向治疗效果的细菌活体药物,对医药发展具有重要影响。本文阐述以各种细菌为治疗载体的活体药物研究进展,包括用于疾病治疗的细菌种类优势、封存技术以及所携带效应物的表达调控。

关键词： 人多能干细胞   Repsox   肝细胞   albumin   TGFβ1  

摘要： 目的在肝细胞诱导分化后期加入Repsox,探究其对肝细胞分化效率的影响。方法在人胚胎干细胞定向诱导为肝细胞过程中,从分化第13天开始,在实验组中添加Repsox,对照组中加入等量的DMSO,收集分化至第21天的细胞样品和培养液上清进行检测。通过实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和酶联免疫吸附(ELISA)测定整个分化过程中TGFβ1的表达量和分泌量变化;测定对照组与实验组细胞中TGFβ1分泌量、白蛋白(albumin)分泌量和尿素(urea)合成量。结果在整个肝细胞分化过程中,TGFβ1先明显上调然后逐渐下调;加入Repsox后,TGFβ1后期下调更为显著。实验组表达白蛋白的细胞数量多于对照组,其白蛋白分泌量以及尿素合成量也明显高于对照组(P<0.05)。结论Repsox能够有效促进人多能干细胞转变为肝细胞。

关键词： 巴基斯坦   转基因作物   研究   商业化   政策  

摘要： 近年来,发展中国家在转基因技术与商业化发展上取得了巨大进展。巴基斯坦是同中国有着深厚友谊的国家,是"一带一路"政策亚欧非大陆的重要一站。本文介绍了巴基斯坦转基因技术发展现状及转基因商业化情况,研究其管理框架及政策变化等,分析其在政策、监管、知识产权、消费者认知度等方面存在的问题。研究结果对中国转基因政策的制定具有借鉴意义。

关键词： 耐碳青霉烯酶   肺炎克雷伯菌   耐药性   同源性   重症医学科   DNA测序  

摘要： 目的重症医学科染KPC-2肺炎克雷伯菌的耐药及同源性情况。方法从2018年4月至2019年2月于我院重症医学科室治疗的患者中提取40例耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKPN)菌株,对待测菌株进行药敏性试验、mCIM(改良碳青霉烯灭活试验)和eCIM(EDTA改良碳青霉烯灭活试验)联合试验,采用PCR扩增法检测待测菌的耐药基因并进行基因序列检测,采用PFGE对待测菌进行同源性分析。结果在16种抗菌药中,待测菌仅对阿米卡星(27.50%)、庆大霉素(17.50%)、妥布霉素(25.00%)、替加环素(100.00%)以及复方新诺明(55.00%)有敏感性;mCIM和eCIM试验结果显示40株CRKPN均产丝氨酸碳青霉烯酶;PCR试验结果显示待测菌株携带KPC基因阳性率为100%;选择ICU分离的17株CRKPN做PFGE,同源性结果分析显示该病区存在耐碳青霉烯肺炎克雷伯的克隆传播。结论我院重症医学科分离的CRKPN细菌的耐药机制是产丝氨酸碳青霉烯酶,酶基因为KPC-2型,PFGE结果分析显示我院重症医学科存在耐碳青霉烯肺炎克雷伯的克隆传播,需要加强院感监控工作。

关键词： 武汉协和医院   中源协和   间充质干细胞   注册登记   肺炎患者   合作方   王福生   基因工程  

摘要： 传闻1为王福生院士的新冠病毒临床研究提供了部分间充质干细胞制品。求证:属实。近日,有网友在上证e 互动向中源协和(600645)询问:“ 近日,一项名为《间充质干细胞治疗2019 年新型冠状病毒感染的肺炎患者的安全性和有效性》的临床研究已经注册登记, 该项研究由北京302 医院开展,合作方包括IPM 、武汉市金银潭医院、天津市海河医院、中源协和细胞基因工程股份有限公司、武汉协和医院。北京302 医院王福生院士负责此项研究。是否属实?”

关键词： 基因工程实验   数字化教学游戏   教学实践   生物类专业  

摘要： 针对基因工程实验学习中的各种问题,尝试将“游戏化”的元素与虚拟技术相融合,开发出了基因工程实验教学游戏软件。相比于虚拟实验平台,基因工程实验教学游戏软件侧重于实现以游戏闯关的方式训练学生调动高阶思维解决问题的教育功能。教学实践结果表明,该软件在帮助学习者建立宏观操作和微观结果之间的联系,促进想象,增强知识运用等方面起到了积极作用。这种尝试为促进高等教育生物类专业的数字化游戏教学提供了思路。

关键词： 基因工程学   实验教学   基因表达   实验设计  

摘要： 基因工程学实验课是生物技术专业的主要实践课程之一,为培养大学生的创新意识和科研能力,以新孢子虫NcAMA1基因的扩增、克隆及真核表达为例,开展基因工程学实验教学设计。实践表明,通过对基因组DNA提取、目的基因扩增、克隆载体与表达载体构建、以及目的基因表达等实验步骤的实践操作,激发了学生的科研兴趣和创造力,培养了学生分析问题和解决问题的能力,提升了学生的实验技能、创新意识和综合素质。