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关键词： 教育管理   管理模式   课程   运用  

摘要： 将研究性教育管理模式运用在基因工程实验课程中,教师将教学工作中自己遇到的实际问题当作研究课题,运用研究性教育管理模式解决教育实践问题,促进教育发展,探索管理规律。在实际工作中采用系统分析法,从现实研究、目标研究、实验研究和可行性研究等方面对基因工程实验中的问题进行了分析并采取了相应的解决方案,并对教学实践问题进行了反思,探讨研究性教育管理模式在教育实践中的运用。

关键词： 枯草芽孢杆菌   优化基因   目的蛋白   工程菌   β-丙氨酸  

摘要： 将β-丙氨酸转入枯草芽孢杆菌,构建基因表达载体,优化了β-丙氨酸的密码子基因,构建出3种新型工程菌。通过比较工程菌的表达效果和可溶解性,优选出最适合菌种。

关键词： 树突状细胞   器官移植   免疫耐受   免疫应答   免疫调节   免疫抑制剂   细胞因子   基因工程  

摘要： 树突状细胞(DC)是具有特异性功能的专职抗原提呈细胞,可特异性吞噬抗原、加工并提呈给效应性T细胞,在免疫耐受与免疫应答方面发挥重要作用。耐受性DC(tol-DC)是一群具有负向免疫调控功能的DC亚群,可通过中枢与外周机制诱导器官移植免疫耐受状态。本文拟对DC的表型与功能特征、DC诱导移植免疫耐受机制、tol-DC在器官移植领域的应用进行总结,旨在为临床转化医学研究提供基础理论支持。

关键词： 人胚胎干细胞   晶状体小体   Wnt5a   高通量测序  

摘要： 目的探讨人胚胎干细胞(hESCs)定向分化为晶状体小体(LB)过程中非经典Wnt信号通路配体Wnt5a对晶状体发育的作用。方法选取人H9胚胎干细胞系,采用mTeSR培养基进行干细胞培养。“三阶段法”诱导hESCs分化为LB。培养至18 d,将细胞分为对照组和Wnt5a处理组,其中Wnt5a处理组培养基中添加500 ng/ml Wnt5a。培养至35 d,在倒置显微镜下观察细胞形态变化和LB的大小并提取对照组和Wnt5a处理组的总RNA进行转录组测序(RNA-Sequence)检测,表达差异大于1.5倍且P≤0.05被定义为差异表达基因(DEGs),进行生物信息学分析。结果培养结束时发现,与对照组相比,Wnt5a处理组细胞形成的LB面积明显变大。转录组测序结果显示,与对照组相比,Wnt5a处理组中478个基因表达下调,201个基因表达上调,其中Wnt5a可使晶状体细胞分化及晶状体特异基因的表达上调。生物信息学分析结果显示,Wnt5a主要参与了细胞外基质(ECM)改变的过程,提示在晶状体细胞分化中,Wnt5a可改变ECM;同时,富集结果还显示经Wnt5a处理,上皮-间充质转化过程相关过程受抑制,提示Wnt5a还可抑制晶状体细胞,特别是晶状体上皮细胞的异常分化;此外,Wnt5a还可影响晶状体细胞骨架重塑。结论Wnt5a可能通过上调MAPK/ERK级联信号调整ECM的结构成分,影响晶状体细胞骨架重塑,从而促进晶状体细胞的分化。

关键词： 计量学   高通量测序   文库定量   基因测序   质量控制   标准物质   数字PCR  

摘要： DNA文库定量的准确与否直接影响测序数据质量的好坏,因此,开展文库定量质控技术研究非常重要。针对Illumina高通量测序平台的DNA文库定量,建立了基于SYBR Green荧光染料嵌合的高特异性数字PCR绝对定量方法,用于DNA文库定量标准物质的定值;并对制备的文库定量标准物质的适用性进行了验证。结果表明制备的5个水平的文库定量标准物质线性良好,可以作为Illumina平台DNA文库定量的标准曲线。

关键词： 植物   MYB转录因子   耐盐   基因工程  

摘要： 盐胁迫是影响植物生长、发育及作物产量的重要环境因子。耐盐育种是保障农业生产的重要措施,利用基因工程技术提高植物耐盐性是优于传统育种的有效途径。MYB转录因子是植物中最大的转录因子家族之一,在包括盐胁迫在内的植物非生物胁迫调控中有重要作用。本文系统阐述了MYB转录因子的基本结构及其在拟南芥、烟草及水稻、大豆、番茄等植物耐盐基因工程中应用的研究进展,为MYB转录因子的利用及植物耐盐遗传改良及育种提供参考。

关键词： Heritable genome editing   CRISPR   Cas9   Autonomy   Justice   Beneficence and non-maleficence  

摘要： Prior to their announcement of the birth of gene-edited twins in China, Dr. He Jiankui and colleagues published a set of draft ethical principles for discussing the legal, social, and ethical aspects of heritable genome interventions. Within this document, He and colleagues made it clear that their goal with these principles was to "clarify for the public the clinical future of early-in-life genetic surgeries" or heritable genome editing. In light of He's widely criticized gene editing experiments it is of interest to place these draft principles in the larger ethical debate surrounding heritable genome editing. Here we examine the principles proposed by He and colleagues through the lens of Beauchamp and Childress'Principles of Biomedical Ethics. We also analyze the stated goal that the "clinical future" of heritable genome editing was clarified by He and colleagues' proposed principles. Finally, we highlight what might be done to help prevent individual actors from pushing forward ahead of broad societal consensus on heritable genome editing.

关键词： 混合教学模式   基因工程   课程建设   教学改革  

摘要： 随着信息技术的逐渐发展,“在互联网+”背景下,基因工程教学模式不再单一地进行线下讲授,而是采用线上线下混合式授课方式,这种混合式学习方式不仅有助于教学资源的利用和共享,弥补一些教育模式的不足,还可以促进学生的全面发展。本文主要从“基因工程课程现状”,“混合式教学模式内涵”和“混合式教学改革的主要措施”三个方面探讨了混合式教学模式下基因工程课程的改革方向,以期为新形势下相关课程的改革提供新思路。

关键词： 公式推导   半保留复制   DNA聚合酶   PCR技术   循环过程   PCR反应   基因工程   模板链  

摘要： 基因工程中,可利用PCR技术来扩增和获取目的基因.PCR技术依据的原理是DNA的半保留复制.PCR的循环过程分为三部分:模板变性、引物退火、热稳定DNA聚合酶在适当温度下催化DNA链延伸合成.PCR过程和细胞内DNA复制的比较见表1.一、扩增目的基因数公式推导例1现有目的基因"X基因",它是DNA分子上一个有遗传效应的片段,若要用PCR技术特异性地拷贝"X基因",需在PCR反应中加入两种引物,两种引物及其与模板链的结合位置如图1所示.

关键词： 多囊卵巢综合征   高雄激素   人胚胎干细胞   诱导分化   下丘脑神经祖细胞  

摘要： 目的:研究体外诱导人胚胎干细胞(human embryonic stem cell,hESC)向下丘脑神经祖细胞分化,并以此为细胞模型,观察不同浓度雄激素对下丘脑神经祖细胞分化的影响。方法:鉴定hESC细胞株CCRM22,体外诱导CCRM22向下丘脑神经祖细胞分化,对其进行初步的细胞生物学鉴定;在分化培养基中添加1×10-8mol/L、1×10-7mol/L睾酮(以无水乙醇为助溶剂对照),收集不同分化时期细胞,比较分化效率;利用RT-qPCR、流式细胞术、免疫荧光检测等方法鉴定分化细胞,并检测生殖功能调控相关基因的表达。结果:CCRM22分化为下丘脑神经祖细胞的效率超过85%,但睾酮处理降低其分化效率;分化细胞表达神经细胞标志物NESTIN以及下丘脑神经祖细胞特异性标志物NKX2.1,同时表达KISS1和雄激素受体(androgen receptor,AR),且AR的表达水平与睾酮浓度呈正相关。结论:成功诱导hESC分化形成下丘脑神经祖细胞,高浓度睾酮处理抑制hESC向下丘脑神经祖细胞分化,该细胞模型可应用于后续体外研究多囊卵巢综合征女性孕早期高雄激素环境对后代下丘脑神经细胞分化和发育的影响。