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关键词： 胚胎干细胞   内胚层细胞   诱导  

摘要： 目的比较不同诱导方法将人类胚胎干细胞(hESCs)诱导分化为纯度较高的人类内胚层细胞的分化效率,探寻最佳的分化体系。方法用两种不同诱导方法培养人类胚胎干细胞(hESCs)H9细胞株,第1组采用最新改进的体外传代诱导方法,用IV型胶原酶消化成团的hESCs为单个hESC细胞后,使用含有100 ng/ml的胚胎干细胞诱导因子活化素A(activin A)的分化诱导液体外诱导hESCs 3 d(改良组);第2组采用传统方法,直接在未经消化hESCs培养液中添加诱导因子activin A(传统组)。分化完毕后免疫荧光检测两组细胞中内胚层标志物SOX17和叉头框A2(FOXA2)表达水平。结果改良组的分化细胞具有类似内胚层细胞的形态结构,细胞体积变大,细胞之间界限清晰,形态呈现多角形,而传统组的细胞呈团状聚集生长,彼此紧密排列,细胞与细胞之间界限不清楚,细胞形态没有明显的变化。细胞免疫荧光化学检测结果显示改良组的细胞中内胚层标志物SOX17和FOXA2的表达率较传统组显著升高(P<0.05)。结论采用最新改进的体外传代诱导法,activin A可诱导hESCs分化为高纯度的内胚层细胞,与传统方法相比较,此种新方法诱导内胚层细胞的效率明显升高。

摘要： The author argues that an authentic racial reckoning in the U.S. and in its bioethics cannot be done without accounting for whiteness in 2021. Topics discussed include the latter's referral to the established ideology that advantages white-identified persons and groups and disadvantages others, and its related hierarchical allocation of resources and opportunities. Also noted is the need for bioethics to draw on racial equity and antiracism material to become a racially equitable field.

关键词： 高考命题   专题内容   高考真题   模型制作   基因工程   高考题   动手操作   从容应对  

摘要： 近十年,基因工程一直是全国各地高考命题的热点。因此讲授完基因工程专题内容后,笔者为学生提供了若干道高考题,学生做题后大呼"太难了"。经了解,大部分学生虽然能听懂课堂上的知识,也能应对基础的练习,但是因为没有直观的感受,当遇见高考真题时,涉及"切"与"连"的问题还是底气不足。为了帮助师生更好地理解"切"与"连",从容应对高考,笔者与学生一起动手操作,体验了"切"与"连"的过程,并对产生的结果进行了分析与研究。

关键词： 基因治疗   γ-逆转录病毒载体   慢病毒载体   腺病毒载体   基因编辑   嵌合抗原受体修饰的T细胞  

摘要： 基因治疗最初用于治疗遗传性疾病,随着基因工程技术的发展,它在恶性肿瘤、神经退行性疾病、心血管疾病等获得性疾病的治疗中取得良好的临床效果,多种治疗方法获得监管部门的批准上市。基因治疗的优势在于特异性强、靶向性高、效果显著。基因治疗所涉及的基因工程技术包括病毒载体技术、基因编辑技术以及细胞改造的嵌合抗原受体修饰的T细胞技术。本篇综述将探讨基因工程技术在基因治疗中的应用以及基因治疗在国内外的研究进展。

关键词： Gene engineering   Antiporter   Cofactor   Biosynthesis   Cadaverine  

摘要： Several approaches for efficient production of cadaverine, a bio-based diaminewith broad industrial applications have been explored. Here, Serratia marcescens lysine decarboxylase (SmcadA) was expressed in E. coli;mild surfactants added in biotransformation reactions;the E. coli native lysine/cadaverine antiporter cadB, E. coli pyridoxal kinases pdxK and pdxY overexpressed and synthetic RBS libraries screened. Addition of mild surfactants and overexpression of antiporter cadB increased cadaverine biosynthesis of SmcadA. Moreover, expression of pdxY gene yielded 19.82 g/L in a reaction mixture containing added cofactor precursor pyridoxal (PL), without adding exogenous PLP. The screened synthetic RBS1, applied to fully exploit pdxY gene expression, ultimately resulted in PLP self-sufficiency, producing 27.02 g/L cadaverine using strain T7R1_PL. To boost SmcadA catalytic activity, the designed mutants Arg595Lys and Ser512Ala had significantly improved cumulative cadaverine production of 219.54 and 201.79 g/L respectively compared to the wild-typeWT(181.62 g/L), after 20 h reaction. Finally, molecular dynamics simulations for WT and variants indicated that increased flexibility at the binding sites of the protein enhanced residue-ligand interactions, contributing to high cadaverine synthesis. This work demonstrates potential of harnessing different pull factors through integrated gene engineering of efficient biocatalysts and gaining insight into the mechanisms involved through MD simulations. (C) 2020 Published by Elsevier B.V.

关键词： 环介导等温扩增技术   转基因作物   成分检测   标准化  

摘要： 转基因作物成分检测为农业转基因生物安全管理提供了重要技术支撑。环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术操作简便、灵敏度高、特异性强,在转基因作物成分检测中得到了广泛应用。本文针对近年来LAMP技术在转基因大豆、玉米和油菜成分检测中的应用情况进行了分析和总结,以期为LAMP技术在转基因作物成分检测中的应用和标准化提供科学参考。

关键词： 聚羟基脂肪酸酯   基因工程   廉价碳源   高密度发酵   开放式发酵  

摘要： 聚羟基脂肪酸酯(Polyhydroxyalkanoates,PHAs)是一类由羟基脂肪酸单体通过酯化聚合得到的高分子化合物,因具有传统石油基塑料类似的力学特征、100%生物降解性和生物相容性而被认为是最有潜力的绿色环保材料之一。受限于其高昂的生产成本,PHAs作为绿色环保材料的应用推广困难。文中分别从细胞形态调控、代谢途径构建、廉价碳源利用和开放式发酵技术开发等方面详细介绍了目前有效降低PHAs生产成本的方法。尽管大部分研究成果还局限于实验室阶段,但是研究方法和方向为实现低成本PHAs的工业化生产提供了理论指导。

摘要： The article proposes three approaches for bioethicists to encourage structural change, institutional moral ethos and practice, and national moral metrics at healthcare institutions in 2021. Topics discussed include the need for bioethics to expand its moral reach and identify overlooked ethical controversies, to focus on increasing local health equity, and to study current health systems' metrics of quality and performance. Also noted are these approaches' address of health inequity and racism.

摘要： The article discusses the need to integrate race and racism topics within bioethics in 2021. Topics covered include racism's corruption of knowledge production in medicine, the suggested use of a race consciousness framework based in Critical Race Theory (CRT) in interrogating research participants, and the identification of ways in which bioethicists perpetuate racism. Also noted is the need for bioethicists to look inward and find ways to center racism in their clinical work.

关键词： 纳米材料   遗传转化   基因工程   农作物  

摘要： 植物细胞壁是植物遗传转化过程中外源生物分子传递的主要限制因素。传统植物遗传转化方法需要外力辅助或生物介导。基于纳米材料构建的核酸载体无需外力即可转染,并具有生物相容性好、保护外源核酸免受破坏和转染效率高等突出优点,为植物遗传工程技术提供了新的途径。本文在阐述植物遗传转化瓶颈、常用遗传转化技术的缺陷、纳米材料在植物遗传转化中的应用与优势的基础上,重点探讨纳米材料介导的植物遗传转化的关键技术和研究进展。最后分析了该技术的优缺点,并对其发展方向以及目前需要解决的重点问题做了展望。