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关键词： 胚胎干细胞   神经干细胞   诱导分化   神经前体细胞   神经元  

摘要： 目的:比较研究两种人胚胎干细胞系H8和H9在维持培养、向神经前体细胞和神经元方向分化的特性。方法:采用mTeSR1做为基本培养基,Matrigel做为基质胶,进行无滋养层的维持培养。采用白细胞抑制因子1(Smad-1)双抑制剂的神经前体细胞诱导,和含B27的Neurobasal联合脑源性神经营养因子(BDNF)、胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)的神经元诱导方案。采用免疫荧光化学染色检测胚胎干细胞标记蛋白(Nanog和OCT4)、神经前体细胞标记蛋白(Nestin、Sox2和Pax6)、神经元标记蛋白Tuj-1的表达。结果:在维持培养和神经诱导的早期:H8和H9细胞在胚胎干细胞标记蛋白表达及类胚体形成方面无显著差异。神经前体细胞阶段:诱导分化相同时间(诱导14 d),两种细胞系的玫瑰花环样结构形成,及巢蛋白(Nestin)、SRY转录因子2(Sox2)的表达均无显著差异;相对而言,更高比例的H9细胞表达神经前体细胞标记蛋白成对同源基因盒6(Pax6)。神经元阶段:诱导相同时间(诱导30 d),约89%的H9细胞表达神经元标记蛋白Tuj-1,而仅约34%的H8细胞表达Tuj-1。结论:H8、H9细胞的胚胎干细胞特性相似。与H8相比,H9细胞的神经元方向分化效率更高,更适合进行神经系统疾病机制及转化研究。

关键词： 多发性骨髓瘤   基因突变   基因过表达   DNA测序  

摘要： 目的:分析初治多发性骨髓瘤(NDMM)患者常见基因的突变及表达异常。方法:取208例NDMM患者的骨髓细胞,用DNA测序法检测6种基因的表达水平及28种基因的突变状态。应用FISH法检测多发性骨髓瘤常见的细胞遗传学异常。结果:61例(29.33%)NDMM患者检测到基因突变,≥5例患者发生突变的基因包括NRAS、PRDM1、FAM46C、MYC、CCND1、LTB、DIS3、KRAS和CRBN。83例(39.90%)患者检测到6种基因的过表达,以细胞周期调节基因的过表达为主,分别是CCND1、CCND3、BCL-2、CCND2 FGFR3和MYC。169例(81.25%)患者检测到基因单核苷酸多态性改变,主要为TP53基因P72R多态性(70.17%)。染色体结构异常与基因表达异常有一定相关性,与染色体结构正常者相比较,14q32缺失患者中CCND1基因过表达比例更高,13q14缺失患者中FGFR3过表达比例更高,而1q21扩增患者中CCND2、BCL-2、FGFR3基因过表达比例更高。结论:NDMM患者存在多种基因突变和表达异常,但是缺乏主要的单个基因突变或表达异常。累及RAS/MAPK通路的基因突变及细胞周期蛋白CCND的过表达是常见的基因异常。

关键词： 高通量   二代测序技术   乙型肝炎病毒   肝癌   基因整合位点  

摘要： 目的运用高通量二代测序技术(NGS)捕获病毒性肝癌组织中乙型肝炎病毒(HBV)DNA与宿主基因整合位点,为临床疾病诊断治疗提供可靠的依据。方法采用高通量二代测序技术对5例原发性病毒性肝癌组织DNA进行全基因组测序,使用Burrows-Wheeler Aligner(BWA)和Picard-tools生物信息学软件,采用BWA-MEM比对方法进行数据处理和分析,从宿主基因组DNA序列中筛选出HBV基因的整合位点。结果5个样品共发现3513454个单核苷酸多态性(SNP)、838846个插入缺失标记(InDel)、平均1965个结构变异(SV)和3639个拷贝数变异(CNV),其中SNP 99.48%出现在dbSNP数据库里,95.26%在千人基因组计划的数据库中,新发现的SNP有17768个;InDel 93.80%出现在dbSNP数据库里,54.23%在千人基因组计划的数据库中,新发现的InDel有51307个;SV平均包括0个插入变异、690个缺失变异、257个倒位变异、762个染色体内易位变异和255个染色体间易位变异。结论HBV-DNA与宿主基因整合位点具有随机性,且插入的核苷酸片断大小不一,导致宿主肝细胞基因组发生突变、缺失和插入等结构变异而产生致癌作用。

关键词： 基因工程   基因敲除   Red同源重组   酪氨酸  

摘要： L-酪氨酸属氨基酸的一种,可采用RED同源重组技术敲除大肠杆菌上编码分支酸变位酶/预苯酸脱水酶的pheA基因,使中心代谢由合成苯丙氨酸流向酪氨酸的生产;也可从大肠杆菌DH5α基因组中扩增到aroG和tyrA基因,把它们串联在一个质粒上,在***12 tyrA-pheA-中转化入质粒pEVC(含基因aroG、tyrA)后,酪氨酸大量生成,为基因工程改造大肠杆菌生产酪氨酸垫定了坚实的基础。

关键词： 科技论文   基因工程   原创试题  

摘要： 以一道基因工程原创试题的命制为例归纳了取材于科技论文的试题命制程序,并分享了用科技文命题的一些心得体会。

关键词： 上海交通大学   人类基因组计划   生物科学   生命科学   克隆技术   干细胞研究   生物学   好奇心  

摘要： 21世纪初期,社会上流行着一句振聋发聩的口号--“21世纪是生物学的世纪”。人类基因组计划、克隆技术和干细胞研究……生物科学领域的重大成果令这句响亮的口号影响了一批又一批学子的专业选择。来自上海交通大学的长聘教轨副教授胡泽汗就是在这样火热的氛围中,怀着懵懂的憧憬,误打误撞闯入生物学世界的。这份懵懂的憧憬后来又转化为持续不息的好奇心和热情,帮助他在一波三折的科研道路上坚定地走了下去。

关键词： 征求意见稿   中国农药   农药行业   转基因技术   转基因大豆   转基因作物   农作物品种审定   玉米品种  

摘要： 2021年11月26日,农业农村部发布了关于公开征求《转基因耐除草剂作物用除草剂登记资料要求(征求意见稿)》等意见的公告,一下引爆中国农药除草剂行业。从业者都在讨论,难道转基因作物真的要来了?2021年12月6日,农业农村部公布国家农作物品种审定委员会办公室关于国家级转基因大豆、玉米品种审定标准(征求意见稿)公开征求意见的通知,拟在《主要农作物品种审定办法》修订完成后发布实施。

关键词： 慢性肾疾病   间充质干细胞   胚胎干细胞   诱导多潜能干细胞  

摘要： 慢性肾疾病具有高发病率、高致死率的特点并且在全球范围内流行,但除了血液透析和肾移植外,迄今尚无其他有效方法治愈,因此是当前严重危害人类生命健康的重大疾病之一。干细胞是一类具有自我更新和分化为多种谱系能力的细胞,近年来研究提示,干细胞具有作为慢性肾疾病潜在治疗方法的可能。本文对间充质干细胞、胚胎干细胞和诱导多潜能干细胞三种干细胞在治疗慢性肾疾病方面的潜力进行了一个简要综述。

关键词： 法夫酵母   虾青素   热激蛋白基因  

摘要： 为筛选法夫酵母耐热菌株以实现虾青素的中温化(25~40℃)生产,构建了法夫酵母整合型表达载体pUC18-kan-18S-groes,并将嗜热菌HB8的热激蛋白基因整合到法夫酵母基因组中,构建了基因工程菌法夫酵母XD-G,成功将发酵温度提高至25℃。发酵动力学研究结果表明,25℃下法夫酵母XD-G的虾青素产量达到177.7μg/g,比野生菌株提高了26.7%。

关键词： 基因工程   思想政治教育   元素   农林专业  

摘要： 在把“立德树人”的教育理念融入专业知识授课中,基于专业知识发掘思想政治教育元素成为关键点。在调研生物相关专业课程思政元素的基础上,通过对“基因工程原理与技术”教学中的知识点进行梳理总结,挖掘和提炼出思想政治教育元素,设计了一章一主题的思想政治教育元素,将科学精神、工匠精神、情感元素、“疫情”精神、新科技和健康中国等思想政治教育元素与“基因工程原理与技术”的专业知识融合起来,激发学生的学习兴趣、创新性、责任感和使命感,将育人和育才有机结合。