关键词:
胃癌前病变
NF-κB
NLRP3炎症小体
胃复春胶囊
炎-癌转化
摘要:
探讨核因子-κB(NF-κB)/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体信号通路在胃癌前病变中的发病机制,并进一步探讨胃复春胶囊治疗胃癌前病变的潜在分子机制。将90只SPF级Wistar雄性大鼠随机分为正常饲养组和造模组,正常饲养组常规饮食;造模组采用N-甲基-N′-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)综合造模法建立胃癌前病变病证结合动物模型:120μg·mL-1MNNG自由饮用、0.05%雷尼替丁饲料联合饥饱失常。15周后,正常饲养组随机分为空白组、空白-NF-κB激活剂组(C-BA组)和空白-NF-κB抑制剂组(C-PDTC组);造模组继续造模并随机分为模型组、胃复春胶囊组(WFC组)、模型-NF-κB激活剂组(M-BA组)和模型-NF-κB抑制剂组(M-PDTC组)。空白组和模型组予无菌水灌胃,每日1次;WFC组按照成人等效剂量(体质量60 kg)的6倍(432 mg·kg^(-1))给药,每日1次;C-BA组和M-BA组予NF-κB激活剂桦木酸(BA)腹腔注射,10 mg·kg^(-1),每周2次;C-PDTC组和M-PDTC组予NF-κB抑制剂吡咯烷二硫代甲酸铵(PDTC)腹腔注射,50 mg·kg^(-1),每周2次;干预4周后取材。苏木素-伊红(HE)和过碘酸雪夫(AB-PAS)染色法观察胃黏膜病理组织学变化并评分,酶联免疫吸附法(ELISA)测定胃组织中炎性细胞因子白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-18、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-10的水平,蛋白免疫印迹法检测胃黏膜中NF-κB/NLRP3炎症小体相关蛋白的表达水平,免疫组化法检测胃黏膜中NF-κB/NLRP3炎症小体相关蛋白的阳性表达面积。结果显示,与空白组相比,模型组、C-BA组和M-BA组黏膜炎症、炎症活动程度、腺体萎缩及肠上皮化生评分显著升高,模型组和M-BA组异型增生评分显著升高。与模型组相比,WFC组黏膜炎症、炎症活动程度及腺体萎缩评分显著降低,肠上皮化生及异型增生评分降低。与空白组相比,模型组和C-BA组胃组织中IL-1β、IL-6、IL-18、TNF-α水平显著升高;模型组IL-10水平显著升高;模型组和C-BA组胃黏膜中NF-κB p65、NLRP3、半胱氨酸蛋白酶-1(caspase-1)、含有CARD结构域的凋亡相关斑点样蛋白(ASC)表达均显著升高,NF-κB p65、NLRP3和ASC阳性表达面积均显著升高。与模型组相比,WFC组胃组织中IL-1β、IL-6、IL-18、TNF-α、IL-10水平显著降低,M-PDTC组胃黏膜中IL-1β、IL-18、TNF-α水平显著降低;WFC组和M-PDTC组胃黏膜中NF-κB p65、磷酸化核因子-κB p65(p-NF-κB p65)、NLRP3、caspase-1表达显著降低,NF-κB p65、NLRP3和ASC阳性表达面积显著降低。综上,胃癌前病变的发生与NF-κB/NLRP3炎症小体信号通路的激活密切相关,胃复春胶囊能够缓解黏膜炎症、改善腺体萎缩、部分逆转肠上皮化生、减轻异型增生,延缓“炎-癌转化”进程,并且能有效下调胃内炎性细胞因子的水平及通路相关蛋白的表达,故其作用机制可能与抑制NF-κB/NLRP3炎症小体信号通路有关。