教学课程资源库 更多>>

关键词： 2型糖尿病   蛋白质组学   代谢组学   中国地鼠  

摘要： 目的:通过对初步建立的中国地鼠自发性2型糖尿病(T2DM)动物模型进行血糖监测,建立稳定的中国地鼠自发性T2DM动物模型群体,然后应用蛋白质组学和代谢组学分析筛选糖尿病地鼠小肠组织中的差异表达蛋白及血清样本中的差异代谢物,从蛋白质组学层面和代谢角度分析中国地鼠自发性T2DM的分子生物学特征,为中国地鼠模型在T2DM机制研究中的应用提供科学依据。方法:在初步建立中国地鼠自发性T2DM动物模型的基础上,继续对该模型中用于扩群的地鼠进行近亲繁殖产生后代,从地鼠3月龄开始对其空腹血糖值(FBG)进行监测,将FBG≥6 mmol/L的地鼠作为糖尿病组,选择地鼠群体中FBG≤4.5 mmol/L的地鼠作为正常对照组。应用基于质谱的蛋白质组学和代谢组学分析构建糖尿病中国地鼠小肠组织差异表达蛋白谱及血清差异代谢物谱图,通过基因本论(GO)和KEGG通路富集对筛选出的差异表达蛋白进行功能富集分析,在系统水平上通过代谢通路富集分析(MPEA)对筛选出的差异代谢物进行可视化的生物学解释,然后对蛋白质组学和代谢组学结果进行联合分析,并且利用Western Blotting实验验证候选差异表达蛋白PGAM1、PHGDH、CBS、CTH和GATM在糖尿病地鼠小肠组织和正常组地鼠小肠组织中的表达水平。结果:研究结果显示,在中国地鼠糖尿病群体中,从3月龄开始糖尿病地鼠FBG值明显高于正常对照组,12月龄时糖尿病地鼠FBG值趋于稳定且葡萄糖耐量受损,但糖尿病组和正常对照组的体重值未发现显著性差异。通过蛋白质组学和代谢组学分析(P-value<0.05;FC>1.2),在小肠组织中共鉴定到213个差异表达蛋白,其中117个蛋白表达上调,96个蛋白表达下调;在血清样本中共鉴定到14种差异代谢物,包括10种氨基酸、3种有机酸和1种脂肪酸,其中除了4-Hydroxybenzoic acid这1种有机酸的代谢水平在糖尿病组下调外,样本中其余差异物质的代谢水平均为上调。差异表达蛋白的GO和KEGG功能富集显示糖尿病地鼠的代谢异常主要集中在糖脂代谢、胰岛素抵抗(IR)、氨基酸代谢紊乱及炎症等方面,差异代谢物的MPEA分析显示富集到的通路几乎均为氨基酸代谢通路,且这些通路中的氨基酸代谢物与糖尿病IR相关。对两种组学数据进行联合分析,甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢(glycine,serine and threonine metabolism)途径中富集到8个差异表达蛋白(PGAM1、PHGDH、PSAT1、CTH、CBS、GATM、GAMT和GCAT)和3个差异代谢物(Glycine、Homoserine和Tryptophan),通过对该途径及其衍生途径进行分析,发现糖尿病地鼠血清样本中鉴定到的氨基酸代谢物可作为IR的生物标志物,而上述差异表达蛋白可对这些氨基酸的代谢过程进行调控。进一步通过Western Blotting实验验证,差异蛋白PGAM1、PHGDH、CBS、CTH和GATM的表达水平在糖尿病地鼠小肠组织中显著上调。结论:本研究应用蛋白质组学和代谢组学对中国地鼠自发性T2DM动物模型小肠组织和血清样本进行了生物信息学分析,发现糖尿病地鼠的分子生物学特征主要集中在糖脂代谢、IR、氨基酸代谢紊乱和炎症等方面。更重要的是,我们对这两种组学的结果进行了联合分析,以氨基酸代谢为线索,在糖尿病地鼠小肠组织中发现了一些与IR相关的候选蛋白,这一发现对于从分子水平理解糖尿病地鼠的IR具有重要意义,为地鼠模型在糖尿病IR方面的后续深入研究奠定了基础,同时也为T2DM发病机制的研究提供了新的思路。

关键词： 病证结合动物模型   冠心病合并高血糖   气阴两虚证   血瘀证  

摘要： 目的:利用冠状动脉左前降支（LAD）结扎手术联合STZ腹腔注射建立冠心病复合高血糖大鼠疾病模型,并进行全面、动态的观察,通过采集大鼠宏观表征和微观指标对模型证候及其时间窗进行判定。在此基础上,进一步对判定的证候模型进行生物学基础特性探索。方法:1.雄性SD大鼠适应性饲养7天后,随机分成假手术组,高糖组、结扎组和高糖结扎组,高糖组给予一次性腹腔注射STZ（55mg/kg）,结扎组行LAD结扎术,高糖结扎组给与LAD手术后一次性腹腔注射STZ（55mg/kg）。分别在大鼠术后7、14、28天三个时间点取材,并采集不同时间窗的心电图、血糖、拉力实验、应激状态呼吸频率、足底图像RGB值、饮食饮水量、体质量、超声心动、心肌病理等指标以此判定模型成功与否及其证候属性。2.检测各组大鼠血中心肌损伤标志物（AST、CK、CK-MB、LDH）、血脂（TG、HDL-C、LDL-C、CHOL）、炎症因子（TNF-α、IL-1β、IL-6）、凝血（PT、APTT、TT、Fbg、Fbg-t）、纤维化（CVF）等指标,并对证候指标进行相关性分析。结果:1.高糖结扎组术后心电图出现病理性Q波,空腹血糖≥16.7mmol/L。与假手术组比较,在术后7-28天超声表现出EF、FS值显著降低（均P＜0.01）,术后28天心肌结构紊乱,证明冠心病复合高血糖疾病模型建立成功。与假手术组比较,模型组大鼠在术后7-28天拉力值显著降低（均P＜0.01）,应激状态呼吸频率显著升高（P＜0.05）,饮食、饮水量增加（P＜0.05）,体重下降明显,宏观表征出现大便干硬、小便黄等表征,符合气阴两虚证。7-28天舌、足底r 比值显著降低（P＜0.01）,耳背小血管增多,结扎线以下组织颜色变深,符合血瘀证。2.与假手术组相比:高糖结扎组模型的心肌损伤标记物,LDH和CK-MB在7至28天内水平显著升高（P＜0.01）,AST整个时间点均有差异（P＜0.01）,CK在7,28天有差异（P＜0.05）,14天无差异。总体说明,心肌损伤几乎贯穿整个观察期。血脂异常主要表现在与假手术组相比,模型组TG和LDL-C在7-28天内显著升高（P＜0.01）,HDL-C在7,14天水平低于假手术（P＜0.05）,但28天没有差异。炎症反应存在与术后7-28天以TNF-α、IL-1β及IL-6水平显著升高（P＜0.01）,同时高糖结扎组炎症水平也高于结扎组（P＜0.05）,说明高糖结扎组炎症水平相对严重。凝血异常伴随着模型组的整个病理过程,主要以Fbg值显著高于假手术组（P＜0.01）,且不断升高。高糖结扎组心肌纤维化严重,随着时间推移逐渐升高,CVF值显著增高相较其他组（P＜0.01）。相关性分析结果,有6、5个指标分别参与了气阴两虚证、血瘀证的形成,且存在交叉。结论:1.高血糖联合LAD结扎诱导的冠心病复合高血糖模型在术后7-28天属于气阴两虚兼血瘀证。2.该模型整个过程中均存在心肌损伤、脂质代谢异常、凝血异常、炎症反应,心肌纤维化,且多呈现进行性加重。6、5个指标分别参与了气阴两虚证、血瘀证的形成,且证候之间存在交叉。

关键词： 河流   大型底栖动物   群落特征   生物评价  

摘要： 城市化的快速发展在促进经济社会发展的同时已经严重威胁到河流生态系统的健康。尤其是近年来,北京市地表水中劣Ⅴ类水质河长达到总监测河长的38%,水资源紧缺和水体污染已经成为制约北京市社会经济发展的瓶颈。河流大型底栖动物的群落健康状况可以在很大程度上反映该水域生态系统的健康程度。因此,研究北京市不同区域河流大型底栖动物群落结构特征,揭示城市化背景下的大型底栖动物种类组成与水质之间的响应关系,并筛选出适宜进行水质生物学评价的方法十分必要。以北京城市化程度不同的山区、郊区和市区河流为研究对象,设置21个样点,于2019年3～11月的春季、夏季和秋季,对河流大型底栖动物进行样品采集、鉴定和分类,调查分析研究区河流大型底栖动物的种类和密度组成,同步开展采样点的水质理化指标监测,采用多种生物评价指数评价河流水质,分析比较其与水质理化评价方法结果的一致性,并采用典范对应分析(Canonical Correspondence Analysis,CCA)种群与水环境因子的相关性,为北京市河流生态修复提供数据支撑和科学依据。主要研究成果如下:(1)水质理化指标分析结果表明北京市河流水质空间差异明显,山区河流和城市上游河道水质显著优于郊区和城市下游河道,郊区河流水质最差,但时间差异较小。影响北京市河流水质的主要污染因子为TN,其次为COD和TP。(2)研究期间共采集大型底栖动物样品189个,鉴定出98个分类单元(种),分属3门6纲34科。大型底栖动物组成空间差异明显,相对密度、多样性指数和生物指数季节变化较小。大型底栖动物群落结构经聚类分析分为3个主要类群:山区河流水生昆虫相对密度最大,以具有清洁指示功能的水生昆虫(包含EPT种类)为主,主要优势种为蜉蝣科(Caenidae)、纹石蛾(Hydropsyche sp.)、角石蛾(Stenopsychidae sp.);郊区和城市下游河道以耐污性强的环节动物和摇蚊幼虫占优势,主要优势种为苏氏尾鳃蚓(Branchiura sowerbyi)、霍甫水丝蚓(Limnodrilus hoffmeisteri)苍白揺蚊(Chironomus pallidivittatus);城市上游河道大型底栖动物群落结构相对单一,以腹足刚为主,主要优势种为中华圆田螺(Cipangopaludina cahayensis)、铜锈环棱螺(Bellamya aeruginosa),其次为摇蚊幼虫。(3)应用Shannon-Wiener多样性指数、Pielou均匀度指数和Margalef丰富度指数、BPI指数、FBI指数和SIGNAL指数对研究区域内水体进行生物评价。BPI指数、FBI指数和SIGNAL指数计算结果表明山区和城市上游河道环境质量明显于优于郊区和城市下游河道。水体富营养化较严重的情况下,Shannon-Wiener多样性指数、Pielou均匀度指数和Margalef丰富度指数与理化结果会产生较大误差。BPI指数与综合水质标识指数结果一致性最为显著,北京市大多河流生态环境处于轻度污染和α-中污染之间。(4)CCA典范对应分析结果表明春季和秋季营养盐浓度是影响郊区和城市下游河道大型底栖动物群落结构的主要因素。COD和BOD等有机污染是影响夏季城市上游河道大型底栖动物群落结构的主要环境因素,水温是影响山区大型底栖动物群落结构的主要因素。

摘要： 主编:许崇任程红出版时间:2020年8月ISBN:978-7-04-053939-4定价:49.80元内容简介本书运用比较动物结构和功能的思想与方法,阐述动物早期胚胎发育的规律、动物类群的多样性及其进化地位和主要生物学特征,并介绍了动物行为和动物区系。从动物身体的保护、支撑和运动、排泄和水盐平衡、呼吸、消化、循环、淋巴及免疫、神经、

摘要： 主编:许崇任程红出版时间:2020年8月ISBN:978-7-04-053939-4定价:49.80元本书运用比较动物结构和功能的思想与方法,阐述动物早期胚胎发育的规律、动物类群的多样性及其进化地位和主要生物学特征,并介绍了动物行为和动物区系。从动物身体的保护、支撑和运动、排泄和水盐平衡、呼吸、消化、循环、淋巴及免疫、神经、

关键词： 瘢痕组织   脱细胞基质   真皮支架   生物力学   修复  

摘要： 研究背景临床上大面积瘢痕患者存在正常皮肤面积严重不足,无法通过有限面积的正常皮肤或皮瓣移植修复瘢痕切除后创面等问题。刃厚皮片具有可反复切取供皮的优势,但是如果仅用刃厚皮片覆盖创面,移植区内会因支撑力不足产生二次挛缩,且该挛缩往往比原瘢痕更严重,影响受区功能。真皮支架材料为宿主细胞提供了生长附着的微环境,指导细胞发挥功能和传导细胞间信号,抑制胶原蛋白的过度合成,减少创面瘢痕形成及色素沉着,改善创面修复后的柔韧性及粘弹性,是加快组织再生和修复的关键因素。然而,市售的真皮支架材料的缺点包括费用昂贵、免疫原性强、来源有限、材料降解过快、营养渗透性差、血管化速度慢、提取步骤繁琐、机械性能差、降解产物有细胞毒性、存在传播疾病风险、异源性病毒感染、等等,限制了其在临床上的广泛应用。大面积瘢痕患者通常会经历多次瘢痕切除术,如果能够把切除的瘢痕组织制备成脱细胞基质,将其作为一种支架材料进行瘢痕切除后的创面修复,就可能克服目前临床上应用的真皮支架材料的部分缺点,如市售脱细胞真皮基质(Acellular Dermal Matrix,以下简称ADM)带来的免疫原性,而且能更好地利用患者的自身组织,这符合废弃组织再利用的原则。瘢痕脱细胞基质(Scar Acellular Matrix,以下简称sAM)可有效扩大真皮支架材料的来源,降低商品化真皮支架成本,也可提取细胞外基质用于制备生物合成支架材料,促进皮肤组织工程学的发展。研究目的1.制备无完整细胞结构的sAM及ADM,比较成熟期sAM、增生期sAM及正常皮肤ADM的组织结构、生物相容性和生物力学特征,为创面修复的动物实验提供物质基础。2.探讨利用人sAM进行动物创面的修复作用及疗效评价,并研究创面愈合过程中相关基因的表达情况。研究方法和结果1.瘢痕脱细胞基质的制备及生物学检测方法:分别从临床上随机切取人成熟期瘢痕、增生期瘢痕和正常皮肤。利用手术刀或滚轴式手工取皮刀将所取瘢痕和正常皮肤去表皮及皮下组织后切取成大小适中,厚薄适宜的标本,利用胰蛋白酶+Triton X-100法将这些标本进行脱细胞及灭菌处理,制备成成熟期及增生期瘢痕组织的sAM及正常皮肤组织的ADM。对所取得的三组脱细胞基质材料进行:1、HE染色及扫描电子显微镜进行组织结构分析;2、DAPI、Picogreen进行材料免疫原性分析;3、将表皮干细胞和正常皮肤成纤维细胞种植于各材料中并进行培养,通过HE染色及扫描电子显微镜观察各组材料中细胞生长的能力及特点;4、利用万能拉力试验机分析各组试件的应力应变伸长比、杨氏模量、松弛量、松弛斜率、蠕变量、蠕变斜率及最大拉伸应力,并根据得出数值绘制拟合应力应变、归一化松弛及蠕变曲线。结果:1)HE染色可见三种材料中无完整细胞核存在。正常皮肤ADM组织纤维细,排列有序;增生期sAM组织纤维粗大,排列紊乱;成熟期sAM组织纤维粗细不等,排列较正常皮肤紊乱,但较增生期sAM有序,中间可见少许类似正常皮肤纤维的成分。2)DAPI显示三种材料均未见完整细胞核,Picogreen法检测三种材料内残留DNA含量均低于50ng/mg,表明胰蛋白酶+Triton X-100法制备的脱细胞材料免疫原性低,符合生物学材料标准。3)在三种材料中种植细胞后,表皮干细胞在正常皮肤ADM和成熟期sAM表面及内部聚集生长。在增生期瘢痕sAM中,表皮干细胞仅在材料表面生长。皮肤成纤维细胞在成熟期sAM及增生期sAM中生长较差,可能与培养环境相关。4)三种试件的杨氏模量、蠕变斜率未见统计学差异;增生期sAM的应力-应变伸长比、松弛量、蠕变量及最大拉伸应力小于正常皮肤ADM,松弛斜率大于正常皮肤ADM,差异有统计学意义;增生期sAM的松弛量小于成熟期sAM,差异有统计学意义;成熟期sAM中,应力-应变伸长比较正常皮肤ADM小,差异有统计学意义,其余数值未见统计学差异。2.人瘢痕脱细胞基质动物创面修复及相关基因表达的研究方法:采用约克夏猪作为体内实验动物。实验分组分为成熟期sAM组,增生期sAM组和空白对照组。随机选择制备好的成熟期sAM及增生期sAM按实验分组埋植于制备好的猪背部创面,创面面积约2cm×2cm,并于材料表面覆盖刃厚皮片后打包堆加压妥善固定,分别于术后1、2、3、6个月取材,取材时将移植物连同表皮及少许皮下组织一同切取,然后进行:1、HE染色、Masson染色观察胶原纤维排列结构及细胞浸润情况;2、免疫组化染色观察各取材时间点中新生COLA1、elastin和Fibronectin 的密度;3、实时荧光定量 PCR(qPCR)观察 TGF-β、COLA1、Vimentin、MMP-1、MMP-2、MMP-9及TIMP1的表达;4、α-SMA评价各取材时间点中移植物的血管计数,观察sAM在动物体内的修复效果。结果:1)两种sAM在

关键词： 高中生物学   PBL教学策略   教学实践  

摘要： 教学策略是课堂教书育人的艺术,制定、选择及运用合适的教学策略,可以更好的完成教学目标或任务,提高生物学教学质量。PBL教学策略旨在激发学生自主学习的动机和兴趣,学生通过小组合作形式分析和解决PBL问题并生成成果,以小组为单位汇报成果的过程中,充分体现新课程改革的理念:“以学生为中心”。本研究首先对PBL理论和教学策略的文献进行了综述,了解研究的现状,研习相关理论基础。其次,通过观察生物学课堂、访谈教师和学生学习现状问卷调查的研究方法,归纳总结在目前教学策略下存在问题:(1)课堂导入策略单一;(2)不能充分体现学生的主体性和激发学生学习生物学的兴趣;(3)忽视探究过程,学生分析和解决问题能力的提高受阻;(4)小组合作流于形式,不利于构建学习共同体;(5)不利于学生表达内心想法和提升语言表达能力。再次,针对存在问题制定基于PBL的教学策略,包括在课堂导入运用创设情境的策略,运用基于问题的探究学习策略,运用有效的合作学习策略和运用课堂对话策略等;研修教材并选择合适的内容,以高中生物教材中“动物生命调节活动”模块知识为依托,设计符合PBL教学策略的教学设计。最后,设计符合PBL教学策略内涵的教学案例,然后在自己任教的两个班级为研究对象,教学实践活动开展一学期,然后通过访谈教师和学习效果调查问卷两种方法进行效果评估。通过教学实践,PBL教学策略在一定程度上可以解决目前教学策略下存在的问题,研究结果表明:(1)大多数学生适应和喜欢PBL教学策略;(2)有利于提高学生的学习生物学的兴趣,改变学习的方式;(3)学生课堂参与程度提高了;(4)改变了学生解决问题的意愿、兴趣;(5)有利于提高学生表达能力。本研究针对教学内容在各个教学环节选择和运用的教学策略不一定是最优教学策略,需要广大一线教师不断改进和优化,进行研究。

关键词： 动物生物学   课程思政   教学实践   高等教育  

摘要： 为了加强德育工作,对专业课程进行思政改革。在《动物生物学》课程教学中,分析课程和学生特点,设计了德育目标,充分挖掘课程思政元素,形成几个主题,通过观看视频、小组汇报、专题讨论、课后拓展和实践等多种方式实施思政教育,引导学生树立社会主义价值观,实现专业课程"知识传授"与"价值引领"相统一。

关键词： 大型无脊椎动物   群落结构   环境因子   生物指数   渭河流域  

摘要： 大型无脊椎动物是淡水生态系统中非常重要的组成部分,是河流生态系统食物链中重要的一个环节,对河流生态系统物质循环、污染物迁移转化等过程具有重要意义,能够反映河流生态系统长期变化状况。本研究以渭河流域为研究区,以大型无脊椎动物为研究对象,在渭河流域的主要干支流选取55个样点,分别在2017年6月（夏季）,2017年9月（秋季）,2018年1月（冬季）和2018年4月（春季）,分别进行了大型无脊椎动物、浮游生物、固着藻类和水样的野外采集和室内实验分析等工作。通过室内鉴定、数据统计分析、差异性检验以及对比分析等方法解析了渭河流域大型无脊椎动物的时空格局;利用典范对应分析（CCA）,分析了水温、总氮（TN）、总磷（TP）、溶解氧（DO）、浮游生物生物量、固着藻类生物量等物理、化学因子和生物环境因子对大型无脊椎动物的影响;运用生物指数法,对渭河流域进行了河流水质生物学评价。主要研究结果如下:1)明确了渭河流域大型无脊椎动物群落的时空格局。在渭河流域的采样点分别使用D型网和Surber网（30*30 cm,250μm）进行大型无脊椎动物的定性和定量采集。通过室内鉴定、差异性分析、生物指数计算和比较,分析了渭河流域大型无脊椎动物群落组成、密度、生物量、生物指数和优势物种时空格局。结果表明:2017年和2018年的春季、夏季、秋季和冬季一共采集大型无脊椎动物208种,隶属于7纲18目63科,包括3大门类:环节动物门、软体动物门和节肢动物门。渭河流域的大型无脊椎动物群落物种组成具有明显的季节变化特征;夏季物种数最高,物种密度最大,冬季物种数最低;这主要是由于夏季温度高,河流生境稳定,利于物种繁殖生长。本次调查期间发现整个流域内优势物种以耐污类颤蚓科、摇蚊科为主,占优势物种物种数的75%,数量多,且在流域内分布范围广泛,而代表水质清洁指示物种EPT类较少,这表明当前渭河流域水质状况还是不容乐观。生物多样性指数呈现一定的时空变化趋势,泾河的Margalef丰富度指数（D）、Pielou均匀度指数（J）和Shannon-Wiener多样性指数在三条河流中都较高,表明泾河相比渭河干流和北洛河,生物群落结构最为稳定,物种多样性最丰富。2)揭示了渭河流域大型无脊椎动物对环境因子的响应关系。使用环境因子和群落结构时空格局数据,采用相关分析和典范对应分析（CCA）,解析了环境因子对大型无脊椎动物的影响效应。结果表明:河宽是大型无脊椎动物4个季节的共同影响因子;浮游动物生物量是春季和冬季的共同影响因子;固着藻类生物量是春季和夏季的共同影响因子。大型无脊椎动物对环境因子的响应结果表明:对于大型无脊椎动物影响最显著的是物理环境因子,其次是生物环境因子,最后是化学环境因子。摇蚊科、颤蚓科等优势物种通常受到水温、TN、DO等因素的影响,这是由于颤蚓科和摇蚊科都属于耐污类物种,通常在水温高,污染严重,氮磷含量高的地区大量繁殖。3)采用Shannon-Wiener指数、Simpson指数、BMWP指数和ASPT指数等4个生物学指数,对渭河流域进行了河流水质生物学评价。评价结果表明:渭河流域水质大部分样点处于一般状态,也存在差、极差的状态。这表明渭河流域水质近年来的状况趋于变好,但水质状况整体表现较为一般,这主要得益于陕西省政府采取的针对渭河流域水质污染防控措施。基于水质生物学评价研究可为渭河流域今后河流污染防控和生态修复提供科学支撑,可为黄河流域实现高质量发展提供强有力保障。

关键词： 鼋   繁育   种质资源保护   全基因组   亲子鉴定  

摘要： 龟鳖类是爬行动物中较为古老的类群与恐龙同代,最早出现在晚三叠纪,至今已有2.5亿多年的历史,龟鳖类动物在漫长的地史演变和物种进化方面具有重要的参考价值。鼋（Pelochelys cantorii）是我国内陆体型最大的水生龟鳖动物之一。历史上广泛分布在东南亚各国,近现代由于不正当贸易及人类的滥捕导致鼋栖息地生境不断恶化,分布区逐渐缩小,种群数量锐减,鼋已经处于极度濒危状态,在一些地域甚至已经灭绝,于1989年被列入国家一级重点水生野生保护动物,2000年被世界自然保护联盟（IUCN）认定为濒危动物,2003年列入濒临绝种野生动植物国际贸易公约（CITES）附录Ⅱ名单。我国虽然成立了一些以鼋为保护对象自然保护区,但到目前为止这种与大熊猫和扬子鳄齐名的珍稀濒危物种根本没有得到应有的重视,相关的研究报道极少,近10年也基本上没有关于鼋野外个体的报道。鉴于此,本研究通过调查我国鼋自然保护区以及人工驯养基地,总结了我国鼋保护现状;通过人工驯养的6只亲鼋,研究了鼋的产卵时间、产卵行为、产卵特性、孵化和生长等繁殖生物学特性;基于二代基因组测序开展了物种进化等相关分析;进行了形态、DNA含量、细胞核型等种质特性研究;建立了鼋微卫星多重PCR体系的亲子鉴定技术;最后根据鼋生物学特性以及资源分布现状,对鼋种质资源的管理与保护提出合理性建议。本论文主要研究结果如下:1. 通过对鼋自然保护区资源状况半结构式访谈法,发现浙江省丽水市青田县鼋自然保护区（全国唯一一个鼋省级自然保护区）和广东省肇庆市广宁县自然保护区（县级自然保护区）的保护管理工作方面做得较好,指标分数为3.75和3.0（总分4分）,但鼋栖息地环境情况依然不容乐观。尤其有3处保护区保护状况指数仅为1.25,保护区管理基本上形同虚设。其它一些县市的保护管理工作很薄弱,鼋赖以生存的栖息地环境基本上均破坏严重。全国目前有鼋人工驯养基地5处,其中有2处成功进行了鼋人工繁育。通过对我国成功开展鼋人工繁育保护区的河段沿岸村民进行问卷调查,结果表明63.6%的沿岸村民不认识鼋,仅有15.2%的渔民见过鼋,并且大部分发生在前10～20年。77.3%的渔民认为河段建立的水坝导致河段鱼的种类和数量变少,同时72.7%渔民认为沿岸建立的工厂排污导致该河段水质污染。总的来说,虽然历史上鼋分布广泛,但由于近年来的人类活动干扰,鼋在空间分布上越来越碎片化,目前数量稀少,处于濒危状态。可见,我国鼋的保护情况不容乐观。2.2014～2019年,分别对初次性成熟2只广宁的鼋（1雌1雄）以及产卵多年4只高明的鼋（2雌2雄）开展了繁育生物学研究。人工驯养鼋的产卵期集中在5～8月,夜间产卵,无护卵行为。通过视频观察分析,鼋产卵过程可分为Ⅳ个阶段。初次产卵的广宁鼋和已产卵多年的高明鼋在产卵特征方面具有显著差异:广宁鼋2014年产3窝卵,平均每窝22.0±3.0枚,卵平均重13.27±0.97 g,卵直径2.90±0.12cm,刚孵出稚鼋体重为10.00±0.56 g。高明雌鼋年产卵5～6窝,平均每窝43.6±8.2枚,卵平均重为17.31±1.99 g,卵直径为3.13±0.25 cm,刚孵出稚鼋重13.31±1.03 g。每窝卵的产卵用时（T,min）与每窝卵数量（N）具有正相关关系,N=4.3863 T-0.9059（r=0.872,P<0.01）,平均13.67 s产1枚卵。平均产卵间隔天数为16.49±4.32d,中位数为15 d。鼋卵重（We,g）和卵直径（De,cm）间有显著相关性We=8.3362De-8.8494（r=0.861,P<0.01）。在温度28.8℃±1.5℃,介质湿度59.9±4.9%RH条件下,鼋卵孵化期为64.94±3.47 d。高明2只雌鼋每窝产卵量无明显差异,但体重大的雌鼋产的卵均重显著大于体重轻的雌鼋,卵大,孵出的稚鼋也大,且差异显著。孵出的稚鼋以活鱼苗为饵料,在温室内人工养殖周年,均重可以达510.30±82.77 g。建立的生长公式为Y=1.4993 t+58.521（R2=0.991,t为此阶段培育天数d,Y为体重g）。高明鼋2019年孵化率为78.39%,苗种培育成活率达到93.33%,5年共成功繁育出鼋子代群体700余只。这些研究实现了鼋人工保种,丰富了繁育生物学基础数据,为其保护提供了物质和理论基础。3. 为了更好的认识和保护鼋,开展了鼋种质特性研究。鼋雌雄个体在尾巴长度、泄殖孔颜色方面有明显区别,另外,稚幼鼋和成鼋在体表斑纹方面也有明显不同。在形态可量性状方面,鼋和中华鳖在背甲长/背甲宽、吻长/背甲长、吻突长/背甲长、眼间距/背甲长、体高/背甲长等性状比值方面均有明显差异。164只新生到3龄鼋的体长（SCL）-体重（TW）关系为log TW=log 0.148+2.858×log