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关键词： 不同动物   E.coli O157:H7   毒力基因   耐药   PFGE   WGS  

摘要： 目的:对新疆不同动物源*** O157:H7进行分离鉴定,研究其生物学特性及流行传播规律,为新疆各地区*** O157:H7的污染状况评估提供科学依据,为控制不同动物*** O157:H7的传播提供参考,以期从源头保障畜牧业的健康发展。方法:（1）从新疆不同地区采集不同动物的样本（粪便、肛拭子和胴体拭子）,先用EC肉汤增菌,经免疫磁珠富集后,再用CT-SMAC与MUG选择性培养,最后用PCR法检测rfb E和fli C基因;（2）对已鉴定为*** O157:H7的菌株,用PCR法检测5种毒力基因（stx1,stx2,eae A,Tccp和Hly）;用小鼠攻毒试验检测其致病性。（3）采用K-B法,对分离株进行药物敏感性检测,用PCR法检测13种耐药基因;（4）用PFGE和WGS技术研究不同动物源菌株之间的基因相关性。结果:（1）从新疆12个地区采集了7 149份不同动物的样本,分离到38株*** O157:H7,其中牛源、羊源、骆驼源、驴源和人源的检出率分别为0.3%（13/3788）、0.5%（5/966）、1.0%（17/1792）、2.4%（1/42）和0.4%（2/561）;乌鲁木齐、伊犁、哈密、阿克苏、克拉玛依、吐鲁番、阿勒泰和克州的*** O157:H7检出率分别为0.3%（9/3618）、2.0%（7/358）、1.1%（4/381）、0.3%（1/295）、3.0%（1/34）、2.4%（4/167）、0.8%（11/1381）和4.4%（1/23）。（2）38株*** O157:H7中27株（71.1%）携带毒力基因,stx1,stx2,eae A,Tccp和Hly基因的携带率分别为18.4%（7/38）、23.7%（9/38）、55.3%（21/38）、50.0%（19/38）和26.3%（10/38）,7株*** O157:H7（18.4%）携带所有被检测基因;攻毒试验结果显示,无小鼠死亡。（3）22株*** O157:H7对2～15种抗生素耐药,21株*** O157:H7（52.6%）对哌拉西林耐药,1株*** O157:H7（2.6%）对多黏菌素B耐药;共检测到10种耐药基因:bla CTX-M、bla CTX-M-1、bla TEM、bla SHV、tet G、tet E、aac、aad A1、sul1和cml A1,未检出bla CTX-M-2、bla CTX-M-9和tet A。（4）PFGE结果表明,38株*** O157:H7分为16个不同的簇,其中有人源、牛源和骆驼源*** O157:H7在同一簇。全基因组测序注释到74种耐药基因和273种毒力基因。结论:新疆牛、羊、骆驼、驴和人均携带*** O157:H7,骆驼、驴和人源检出率相对较高;分离株普遍携带1～5毒力基因,攻毒试验中无死亡现象,说明*** O157:H7对小鼠的致病性不强;不同动物源*** O157:H7存在多重耐药现象,检测到10种耐药基因,对哌拉西林耐药最严重。PFGE和WGS的结果表明不同地区不同动物源*** O157:H7同源性很高,应加强传播途径的预防和控制。

关键词： 亲水润滑涂层   透明质酸   鼻胃管   润滑性   粘膜损伤   抗炎性能   NF-κB信号通路  

摘要： 目的: 安置鼻胃管是消化道管理的常规护理措施。安置鼻胃管的过程中,由于导管外壁和鼻咽食道粘膜之间存在较大的摩擦,患者往往会出现鼻咽部疼痛、恶心和呛咳等应激和不适症状,且容易引起鼻出血、鼻中隔创伤、鼻窦炎和咽部粘膜溃疡等鼻咽食道粘膜损伤和继发的炎症反应。本研究尝试使用亲水润滑涂层技术来实现高疏水的鼻胃管材料表面的润滑改性,首先对透明质酸(Hyaluronic Acid,HA)亲水润滑涂层鼻胃管进行生物学评价,研究HA亲水润滑涂层鼻胃管的抗蛋白吸附性、细胞相容性以及对皮肤是否产生刺激反应。并进一步在动物置管实验中探讨HA亲水润滑涂层鼻胃管对改善置管效率、降低应激不适反应、减少粘膜损伤和继发炎症反应的功效,以及评估安置HA亲水润滑涂层鼻胃管是否对机体肝肾功能和免疫功能造成不良影响。 材料和方法: 本课题利用导管表面改性技术,通过透明质酸(HA)和泊洛沙姆(Pluronic,F127)的分子间相互作用,简单而高效地在高疏水的聚氨酯鼻胃管表面制备了一层HA亲水润滑涂层。本研究首先通过蛋白吸附实验、细胞毒性实验和皮肤刺激实验对HA亲水润滑涂层鼻胃管进行生物学评价,其中蛋白吸附实验是通过蛋白定量试剂盒和蛋白荧光染色实验分别定量和定性的评估HA亲水润滑涂层鼻胃管表面对人纤维蛋白原(FB蛋白)、牛血清白蛋白(BSA蛋白)和异硫氰酸荧光素标记牛血清白蛋白(BSA-FITC蛋白)的吸附情况,细胞毒性实验是通过CCK8试剂盒和活死细胞荧光染色实验定量和定性的检测HA亲水润滑涂层对小鼠成纤维细胞(L929细胞)增殖和凋亡的影响,皮肤刺激实验是通过观察在新西兰兔脊柱两侧皮肤皮内注射HA亲水润滑涂层鼻胃管浸提液后,观察在注射后24 h、48 h和72 h后皮肤是否出现红斑、水肿和溃疡等情况,以反映HA亲水润滑涂层对皮肤的刺激性。对于动物置管实验,本研究将72只新西兰兔分3批使用,每批次将实验动物按性别配对后采用计算机随机数字表法随机分组,分为4组,包括空白组(不进行置管)、未润滑组(未润滑的鼻胃管)、石蜡油组(鼻胃管表面涂覆石蜡油的鼻胃管)和涂层组(鼻胃管表面涂覆HA亲水润滑涂层),每组各6只。通过构建麻醉状态下的新西兰兔置管模型,并在麻醉完全清醒后再留置1 h拔除鼻胃管,记录了安置鼻胃管时各组置管时间、心率和呼吸频率的波动、喷嚏次数和拔管后1 h内的进食量和饮水量,并在置管后6 h对鼻咽食道粘膜进行了喉镜拍摄和HE染色,进一步通过血液细胞分析仪检测置管后第6 h、3 d和5 d血清中的白细胞数,置管后6 h用酶联免疫吸附实验检测置管侧鼻粘膜组织匀浆中的炎症介质(CRP)与炎症因子(TNF-α、IL-1β和IL-6)的水平,置管后6 h通过免疫印迹法定量分析置管侧鼻粘膜组织的NF-κB炎症通路中关键分子TLR4、IKBα、pIKBα、p65和pp65的表达情况,最后通过生化分析和酶联免疫吸附实验检测了置管后第6 h、3 d和5 d实验动物血清中的肝肾功能指标(ALT、AST、CREA和UREA)及免疫球蛋白(Ig A、Ig G和Ig M)的水平。 结果: 1.蛋白吸附的定量实验结果表明,涂层组吸附的FB蛋白含量低于未润滑组,吸附的BSA蛋白含量低于未润滑组和石蜡油组;蛋白吸附的定性实验表明涂层组吸附的BSA-FITC蛋白的荧光面积低于未润滑组和石蜡油组。 2.细胞毒性实验的定量和定性实验的结果表明涂层组浸提液对L929细胞增殖和凋亡无明显影响。 3.经皮肤刺激实验观察可知,涂层组浸提液的注射区皮肤未出现红斑、水肿和溃疡等皮肤刺激症状。 4.在动物置管实验中,相比于未润滑组与石蜡油组,涂层组在鼻胃管安置过程中引起的呼吸频率波动更小和喷嚏次数更少;相比于未润滑组,涂层组置管时间更短并且拔管后1 h内的进食量更多。 5.喉镜拍摄观察到相比未润滑组和石蜡油组,涂层组置管后鼻粘膜损伤程度较轻,仅引起粘膜轻度充血,无明显的粘膜损伤,并且涂层组咽喉粘膜的损伤程度较未润滑组轻。HE染色进一步表明涂层组对鼻咽部粘膜的损伤程度轻于未润滑组,尤其表现在减轻了鼻粘膜充血水肿、炎细胞浸润和粘膜上皮细胞脱落。 ***实验结果表明相比于未润滑组,涂层组鼻粘膜组织匀浆中炎症介质与炎症因子(CRP、TNF-α和IL-1β)水平降低;WB实验结果表明涂层组相比于未润滑组与石蜡油组,抑制了置管损伤所致的TLR4-NF-κB炎症信号通路中关键分子(TLR4、pIKBα和pp65)的激活。 7.最后,生化分析和Elisa实验表明相比于空白组,涂层组的肝肾功能和免疫球蛋白指标无异常增高。 结论: 1.在生物学评价方面,HA亲水润滑涂层鼻胃管具有良好的抗蛋白吸附性和细胞相容性,不会对皮肤造成刺激反应。 2.通过动物置管实验发现,HA亲水润滑涂层鼻胃管缩短了置管时间,

关键词： 自主探究   动物分子生物学   独立实验  

摘要： 为提升分子生物学在本科学生中的关注度,推动学生创新及加强基础实践能力,该文使用创新研究方法,即全方面利用当前大数据教学资源,由专业教师团队旁站指导,分配学生成立课题小组,让其发挥自身主观能动性寻找、收集匹配自身已积累知识的相关材料,并进行组内讨论及分析。结果显示:采用此教学模式,学生的知识主动吸纳度、对所得材料的分析及总结能力都有较大提高;学生的学习主观能动性(知识汲取、情报收集、分析、汇总)也得到了提高,并且促进了学生彼此之间分享知识的意愿,提高了学生学习的兴趣。

关键词： 超级增强子   转录调控   启动子   增强子   相变   非编码RNA  

摘要： 超级增强子是一类包含多个普通增强子的大簇,主要富集高密度的转录因子、辅助因子及增强子相关表观修饰位点。与普通增强子相比,超级增强子具有更高的转录激活能力,在细胞类型特异性发育、分化以及肿瘤的发展进程中发挥关键作用。研究超级增强子在基因转录过程中的作用机制,对于揭示哺乳动物表型性状的分子机理具有十分重要的生物学意义。本文概述了超级增强子的概念、特性及鉴定方法,总结了超级增强子发挥作用的主要机制,最后对超级增强子调控动物重要表型的研究进展进行综述,并且结合超级增强子在哺乳动物方面的最新研究进展,讨论了其在哺乳类动物中的应用前景,旨在为超级增强子在动物重要性状表型研究中提供参考。

关键词： 植物多酚   提取工艺   动物生产   生物学功能  

摘要： 植物多酚具有抗氧化、抗菌消炎、抗病毒等多种功效,可以提高动物的生产性能,改善胃肠道功能,抑制脂质过氧化,改善畜产品品质。文章综述植物多酚的提取工艺、生物学功能及其在动物生产中的应用,为促进植物多酚在畜禽生产中的应用提供参考。

关键词： 数轴法   植物类群   动物类群   生物科学史   概念教学  

摘要： 数轴法是一种线性思维模型,有着明晰、直观、易懂、顺序明确且呈线性关联等特征。其在概念习得方法上有着整体视域,能促进学生对整体学科知识框架的把握。采用数轴法进行生物学教学,可以串联重要概念形成大概念、凸显概念达成过程,可以聚焦学科思想、助力学科本质理解,可以清晰地呈现生物学的多样性内在美,帮助学生形成跨学科思维,提升学生运用数学思维解决生物学问题的能力。

关键词： 葡萄糖氧化酶   理化性质   生物学功能   动物生产  

摘要： 葡萄糖氧化酶(GOD)是一种无毒害作用的需氧脱氢酶,具有高度特异性及高效率等特点。GOD具有抑制有害微生物生长繁殖、改善动物肠道健康、提高动物生产性能的作用。文章综述葡萄糖氧化酶的生物学功能及其对动物生产性能的影响,旨在为葡萄糖氧化酶在动物生产中的应用提供参考。

关键词： 课程思政   动物微生物   教学改革  

摘要： 高校课程思政是施行专业课程改革和立德树人功能的新理念模式。现以高职院校畜牧兽医专业动物微生物课程为载体,分析课程思政在高职院校动物微生物学课堂教学中开展的重要性和有效构建课程思政实施路径进行探索,希望能为广大教育教学工作者探索课程思政,提升育人功能提供参考和借鉴。

关键词： 动物模型   表观指标   生化指标   病理指标   分子生物学   动态模式  

摘要： 目的:建立一个能够准确评价动物模型复制成功与否,指导动物模型研究及科研实验的动物模型评价体系。方法:本文参照河南中医大学药理实验室苗明三教授等人起草的多项动物模型制备规范草案以及中国知网、维普、万方的多个数据库中随机筛选的100篇各类疾病动物实验文献,就动物模型常见的表观指标、生化指标、病理指标、分子生物学指标,进行数理统计分析。借助SPSS 24.0,对各指标数值的平均值、标准差,进行整合,对所得数据进行分层,对实验动物的各项指标进行动态统计分析,并进行合理的赋值加权,以求对动物模型进行合理的评价。结果:得出了动物模型表观-生化-病理-分子生物学的动态模式分析的体系:表观指标:N_(1)=γ_(1)/α_(1)×β_(1);生化指标:N_(2)=γ_(2)/α_(2)×β_(2);病理指标:N_(3)=γ_(3)/α_(3)×β_(3);分子生物学指标:N_(4)=γ_(4)/α_(4)×β_(4);动物模型表观-生化-病理-分子生物学指标的动态得分:N=N_(1)+N_(2)+N_(3)+N_(4)。结论:该体系能够准确评价动物模型复制成功与否,对动物模型研究、科研实验的开展、新药开发均有一定的指导意义。