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关键词： 谷胱甘肽乙酯   糖尿病性白内障   谷胱甘肽   糖基化终产物   过氧化氢酶   谷胱甘肽还原酶   肌肽   凋亡  

摘要： 目的: 1.建立大鼠糖尿病性白内障动物模型,探讨糖尿病大鼠晶状体混浊的发生机制。 2.探讨谷胱甘肽乙酯滴眼液(glutathione ethyl ester,GSH-EE)对链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导的大鼠糖尿病性白内障的作用及其机制。 3.初步探讨肌肽(carnosine,Car)对高浓度葡萄糖(high glucose,HG)诱导人晶状体上皮细胞凋亡的作用及其机制。 方法:对66只大鼠行裂隙灯检查,排除晶状体病变。随机抽取10只大鼠作为正常对照组(A组),腹腔注射0.02 mol/L枸橼酸缓冲液(65 mg/kg,pH 4.5)。56只大鼠完全随机分为谷胱甘肽乙酯治疗组(B组)和糖尿病未治疗组(C组),腹腔注射1%链脲佐菌素(65 mg/kg)枸橼酸缓冲液,血糖>14 mmol/L的大鼠作为糖尿病大鼠,注射STZ前5d正常组和糖尿病未治疗组给予25 mmol/L磷酸钠缓冲液(pH 7.4)、治疗组大鼠给予0.1%谷胱甘肽乙酯磷酸钠缓冲液,滴双眼,2/d。每4wk监测大鼠血糖,每周监测大鼠尿糖和体重的变化。通过裂隙灯观察并记录大鼠晶状体混浊的进展。晶状体混浊分级标准采用英国牛津大学眼科实验室方法。4、8、13wk时处死大鼠,取出晶状体,测定其中水溶性蛋白质、谷胱甘肽(glutathione,GSH)和糖基化终产物含量(advanced glycation end products,AGEs)以及谷胱甘肽还原酶(glutathione reductase,GR)、过氧化氢酶(catalase,CAT)活性。 在高糖诱导人晶状体细胞凋亡的基础上,加入不同浓度的肌肽作用于细胞,采用MTT比色法确定高糖和肌肽作用浓度。晶状体上皮细胞分为三组,并在体外培养:正常组(DMEM)、高糖组(DMEM+120 mmol/L高糖),肌肽治疗组(DMEM+120 mmol/L高糖+25 mmo1/L肌肽)。高糖孵育24、48、72、96h时分别取各组晶状体上皮细胞裂解上清液,用分光光度法测定测定晶状体上皮细胞中的凋亡相关酶Caspase-3的活性变化。同时在光学显微镜利用细胞凋亡原位法(TUNEL)检测凋亡的晶体上皮细胞,并计算上皮细胞凋亡率。 结果: 1.注射链脲佐菌素后72 h,糖尿病大鼠血糖(C组29.43±5.23 mmol/L)较正常大鼠血糖(A组6.99±0.42 mmol/L)显著升高(P<0.05),在实验各个时间点,糖尿病大鼠始终保持高血糖和较低体重。 2.糖尿病未治疗组大鼠链脲佐菌素注射后第3 wk晶状体开始出现混浊,其混浊表现为两阶段进展,链脲佐菌素注射后第3～6 wk晶状体混浊进展缓慢,第7～13 wk晶状体混浊进展迅速。 3.谷胱甘肽乙酯治疗组大鼠链脲佐菌素注射后第4 wk晶状体开始出现混浊,第4 wk时谷胱甘肽乙酯治疗组大鼠晶状体混浊程度显著低于糖尿病未治疗组,差异有统计学意义(P<0.05);在注射STZ后5wk,各糖尿病组的晶状体混浊程度明显加重,并且各组之间进展程度没有明显差异。 4.以正常组大鼠为标准,糖尿病治疗组大鼠晶状体中GSH含量及CAT,GR活性显著下降(P<0.05)。注射链脲佐菌素后第4、8 wk,谷胱甘肽乙酯治疗组与糖尿病未治疗组大鼠晶状体中谷胱甘肽的含量(mg/gprot,4 wk: 80.32±10.02 vs 68.44±9.05;8 wk: 56.62±9.82vs 50.27±8.43)相比,分别增加了17.5%和12.6%,但无统计学差异(P>0.05)。各个时间点,谷胱甘肽乙酯治疗组与糖尿病未治疗组大鼠晶状体中过氧化氢酶、谷胱甘肽还原酶和糖基化终产物比较,差异无统计学意义。这提示谷胱甘肽乙酯可以抑制晶状体中GSH含量下降。 5.肌肽对高糖诱导人晶状体上皮细胞系SRA01-04的存活率有显著的提高作用,选取晶状体上皮细胞的存活率为50%时肌肽浓度(25 mmol /L)作为实验药物浓度。 6. 25 mmo1/ L的肌肽作用于人晶状体上皮细胞可降低其Caspase-3活性。高糖孵育48、72、96 h后肌肽治疗组Caspase-3活性分别比高糖组低11%(P>0.05)、22% (P<0. 05)和8%(P>0.05)。 7. TUNEL检测结果显示肌肽可抑制晶状体上皮细胞凋亡率。晶状体上皮细胞凋亡率随高糖孵育时间延长而增高。高糖孵育48、72、96 h后肌肽治疗组晶状体上皮细胞凋亡率分别比高糖组低4%(P>0.05)、13%(P<0. 05)和5%(P

关键词： 农产品   饲料   细菌纲   生物测定   生物试验   清洁处理   饮食   消毒   设备   检验(质量保证)   食品检验   食品   卫生学   说明书   仪器   调查   实验室   实验室设备   实验室装备   实验室取样   实验室试验   实验室器皿   维修   测量仪器   微生物分析   微生物学   微生物   真菌学   人员   质量保证   质量控制   安全要求   抽样方法   规范(验收)   试样制备   绝育(出生控制)   储存   试验室   测试   证实   验证   外观检查(测试)   工作场所   工作地点  

标准号: EN ISO 7218-2007

关键词： 动物生物学   野外实践   教学改革   综合能力  

摘要： 介绍了动物生物学野外实习教学的改革,包括制订出可行的实习计划、动物野外实习教学模式的改革、改革野外实习考核方法等措施,以促进野外实习教学效果,提高学生综合素质。

关键词： 农产品   动物饲料   细菌纲   生物测定   生物试验   清洁处理   饮食   消毒   设备   检验(质量保证)   食品检验   食品   卫生学   说明书   仪器   调查   实验室   实验室设备   实验室装备   实验室取样   实验室试验   实验室器皿   维修   测量仪器   微生物分析   微生物学   微生物   真菌学   人员   质量保证   质量控制   安全要求   抽样方法   规范(验收)   试样制备   绝育(出生控制)   储存   试验室   测试   证实   验证   外观检查(测试)   工作场所   工作地点  

标准号: ISO 7218-2007

摘要： This International Standard gives general requirements and guidance/options intended for three main uses:- implementation of ISO/TC 34/SC 9 or ISO/TC 34/SC 5 standards for detection or enumeration ofmicroorganisms, named hereafter “specific standards”;- good laboratory practice for food microbiological laboratories (the purpose is not to detail them in thisInternational Standard, manuals are available for that purpose);- guidance for accreditation of food microbiological laboratories (this International Standard describes thetechnical requirements according to Annex B of ISO/IEC 17025:2005 for the accreditation of amicrobiological laboratory by national organizations).The requirements of this International Standard supersede the corresponding ones of existing *** instructions in the field of molecular biology examinations are specified in ISO *** International Standard covers examination for bacteria, yeasts and moulds and can be used ifsupplemented with specific guidance for prions, parasites and viruses. It does not cover the examination fortoxins or other metabolites (e.g. amines) from *** International Standard applies to the microbiology of food, animal feeding stuffs, the food productionenvironment and the primary production *** purpose of this International Standard is to help to ensure the validity of food microbiology examinations,to assist in ensuring that the general techniques used for conducting these examinations are the same in alllaboratories, to help achieve homogeneous results in different laboratories, and to contribute towards thesafety of the laboratory personnel by preventing risks of infection.

摘要： This article has no abstract.

关键词： 农产品   饲料   细菌纲   细菌计数方法   细菌培养   计数   测定   肠杆菌科   食品检验   食品   一般条件   水平的   方法   微生物分析   微生物学   微生物   试样制备   测试   验证  

标准号: DIN EN ISO 10273 Berichtigung 1-2007

关键词： 博尔纳病病毒   感染   荧光定量PCR   家兔   博尔纳病病毒   感染   荧光定量PCR   狗   博尔纳病病毒   感染   荧光定量PCR   鸽子  

摘要： 第一部分重庆地区家兔博尔纳病病毒自然感染状况研究 目的:检测重庆地区家兔博尔纳病病毒(Borna Disease Virus ,BDV)隐性带毒情况。分析该BDV的可能种系来源及其与标准株strain V/FR、strain He/80/FR和strain H1766的同源性。 方法:采用巢式逆转录酶PCR结合荧光定量PCR(Real-time nRT-PCR)检测重庆地区60例健康家兔脑组织BDV P24基因片段,并对其中的阳性产物进行基因序列测定,然后用BLAST软件以及DNAstar V6.13 EditSeq软件对测序结果进行分析。 结果:2例家兔为阳性。该BDV P24片段的核苷酸序列与马源BDV strain H1766株同源性最高,为97.67%,与标准株strain V/FR和strain He/80/FR同源性均为96.51%,但是它们编码的氨基酸相同。 结论:重庆地区家兔中存在动物源性BDV隐性感染,该BDV P24核苷酸序列与strain V/FR和strain He/80/FR具有高度同源性。但是与马源的strain H1766同源性最高。 第二部分重庆地区狗博尔纳病病毒自然感染状况的初步探讨 目的:初步了解重庆地区狗BDV的隐性感染情况,对检测到的阳性片段进行核苷酸序列比对,探讨其可能的种系来源及其与国外公认的标准株strain V/FR、strain He/80/FR和strain H1766的同源性。 方法:采用Real-time nRT-PCR检测重庆地区40例健康狗脑组织(右侧前额叶)BDV P24基因片段,并对其中的阳性产物进行基因序列测定,然后用BLAST软件以及DNAstar V6.13 EditSeq软件对测序结果进行分析。 结果:5例狗为阳性。该BDV P24片段的核苷酸序列与标准株strain H1766和strain V/FR同源性最高,为97.67%。与strain He/80/FR的同源性为94.19%,与已有报道的奥地利狗源BDV同源性为95.35%。但是它们编码的氨基酸相同。 结论:重庆地区狗中存在动物源性BDV的隐性感染,该BDV P24核苷酸序列与strain H1766、strain V/FR和strain He/80/FR具有高度同源性。 第三部分重庆地区鸽子博尔纳病病毒自然感染状况的研究 目的:初步了解重庆地区鸽子博尔纳病病毒(Borna DiseaseVirus,BDV)隐性感染状况,对其感染的病毒株进行核苷酸序列比对,探讨其可能的种系来源以及与国外公认的标准株strain V/FR、strain He/80/FR和strain H1766的同源性 方法:本研究采用Real-time nRT-PCR技术对重庆地区60只鸽子的外周血单核细胞(PBMCs)中的BDV P24基因片段进行了检测,并且对阳性PCR产物进行测序。然后用BLAST软件以及DNAstar V6.13 EditSeq软件对该片段进行核苷酸比对及序列分析。 结果:四例样本为阳性。该BDV P24片段的核苷酸序列与法国狐狸分离的BDV同源性最高,为97.67%。与标准株strain V/FR和strain He/80/FR的同源性都是96.51%,与strain H1766同源性仅为95.35%。但是它们编码的氨基酸相同。 结论:本研究表明重庆地区鸽子存在博尔纳病病毒的隐性感染,其感染病毒的P24核苷酸片段与strain V/FR、strain He/80/FR以及strain H1766等国际公认的标准病毒株存在高度同源性。变异程度均小于4.65%,且其编码的氨基酸无差别。

关键词： 浮游动物   群落结构   多样性指数  

摘要： 浮游动物是海洋生态系统的重要组成部分,在海洋物质循环中起着承上启下的“泵”作用。此外,浮游动物群落结构的变化与生态环境之间关系密切,其分布变化对海洋水质环境有明显的指示作用。 本文以渤海湾浮游动物为研究对象,以2003年～2004年的四个航次实际出海调查采样为基础,通过统计分析,结果表明:渤海湾浮游动物中的中桡足类在各航次中占据大多数,是数量主要构成者。全年平均丰度为2651.5个/m3,最大7047.2个/m3,最小328.9个/m3,呈现出明显的季节演替。主要的高峰期出现在春季,此外,夏、秋两季各有一个小高峰。春季峰主要是由小拟哲水蚤、太平洋纺锤水蚤和长腹剑水蚤等优势种大量繁殖造成,夏季峰是由于小拟哲水蚤﹑强额拟哲水蚤﹑拟长腹剑水蚤等优势种和一些幼虫大量繁殖造成,秋季峰主要是由小拟哲水蚤、强额拟水蚤和长腹剑水蚤等优势种构成。 本文又以浮游动物在2003年～2004年各站位不同季节的实测丰度为基础,通过sufer和excel工具作图分析,结果表明:渤海湾浮游动物分布呈现明显的空间分布,近岸及其排污口丰度高,远岸低,由近岸向远岸逐渐递减。 浮游动物分布与环境因子密切相关。本文结合渤海湾浮游动物调查分析数据,利用sufer和excel作出图形,结果表明:大体上枯水期,浮游动物分布与温度、盐度变化趋势相反;丰水期分布与温度变化趋势相同,而与盐度变化趋势相反。此外,浮游动物分布与pH值密切相关,在7.9～8.0之间分布集中,丰度较大。 此外,本文结合渤海湾浮游动物调查分析数据,利用多样性指数Shannon-Weaver指数和生物多样性指数Goodnight指数的分析方法对渤海湾水质进行评价。通过计算,多样性指数小于2(污染范围)的站位在近岸和养殖区,而生物多样性指数较大的站位也是近岸和养殖区,说明为水体由于陆源排放和养殖业的发展水体受到相当程度污染。