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关键词： 系统古生物学   生物地层学   笔石动物   辐射演化  

摘要： 弗洛阶是奥陶系第二个阶，其顶、底界线分别被定义为牙形石Baltoniodustriangularis和笔石Tetragraptus approximatus的首现层，层型剖面分别位于我国湖北省宜昌黄花场和瑞典西南部Hunneberg的Diabasbrottet采石场。弗洛期是均分笔石动物群辐射演化的重要时期，大量均分笔石类群在这一时期起源并迅速分异演化，成为该时期生物类群的主体，同时也是弗洛阶内部生物地层划分的主要依据。\n 目前，相对完整的弗洛阶笔石带序列已经在底界GSSP所在地区(斯堪的纳维亚)及北美(加拿大纽芬兰、美国)等地建立。但是，全球弗洛阶生物地层研究中普遍存在一个问题，即缺乏弗洛阶底界上下连续的含笔石地层，弗洛阶底界的位置不明确。作为弗洛阶底界GSSP的Diabasbrottet剖面，其弗洛阶地层发育不甚好，与下伏特马道克阶地层间可能存在间断，弗洛阶底界在剖面中的具体位置没有得到很好的控制。曾是候选GSSP的纽芬兰Cow Head半岛Ledge剖面也存在类似情况，其弗洛阶底界附近可能存在地层缺失。因此目前已建立的笔石带序列并不连续，很大程度上影响了弗洛阶笔石地层全球对比的精度。我国弗洛阶笔石生物地层研究工作开展较早，在扬子区和江南区都建立了相对完整的弗洛阶笔石带序列，但是这些笔石带序列是依据不同剖面资料所建，缺乏笔石分异度高、层位连续、完整的剖面作为支撑。此外，长期以来，我国在Tetragraptus approximatus带之下一直没有发现上特马道克阶最顶部的笔石带Hunnegraptus copiosus带，对弗洛阶底界(即宁国阶底界或阿伦尼格阶底界)的确切界定造成相当大的困难。\n 湖南益阳南坝剖面弗洛期笔石的分异度高、产出丰富、保存完好，而且笔石地层发育良好，与下伏特马道克期笔石地层连续，是进行弗洛阶笔石生物地层研究的理想剖面。为解决弗洛阶笔石带划分和对比中存在的问题，本文选择南坝剖面对弗洛阶的笔石古生物学及生物地层学进行了详细研究。通过三年的悉心研究，本文取得了如下重要进展：\n 1.发现并描述了弗洛期笔石13属28种，其中反称笔石类1属1种，均分笔石类12属27种，包含具有重要生物地层意义的笔石8属10种：Acrograptus gracilis、Baltograptus geometricus、Corymbograptus deflexus、Didymograptellus bifidus、Didymograptus demissus、Expansograptus constrictus、Pendeograptus fruticosus、Pendeograptus pendens、Tetragraptus akzharensis、Tetragraptus approximatus。这是对湖南弗洛阶笔石动物群的首次系统研究，同时也为华南(尤其是江南区)弗洛阶笔石古生物学研究提供了新材料。\n 2.在弗洛阶地层中，自下而上确立了4个笔石带，即Tetragraptus approximatus带、Pendeograptus fruticosus带、Didymograptellus bifidus带、Corymbograptus deflexus带。首次在湖南弗洛阶中建立了较为完整、可全球对比的笔石带序列。这是目前我国同期地层中首个层位连续的笔石带序列，可与GSSPs地区(斯堪的纳维亚、湖北宜昌黄花场)以及其他弗洛期笔石地层发育较好地区的笔石序列进行对比，大大提高了我国弗洛期与国际同期笔石生物地层对比的精度。\n 3.在弗洛阶底界之下识别出特马道克阶最项部关键的笔石带--Hunnegraptuscopiosus带。这一笔石带的识别，说明特马道克阶/弗洛阶界线附近的地层是连续的，弗洛阶底界被严格地控制在了Tetragraptus approximatus带底界。南坝剖面是目前已知可以确切界定弗洛阶底界的唯一剖面，它弥补了Diabasbrottet剖面的缺陷，具有成为弗洛阶底界GSSP辅助剖面的潜力。

关键词： 农产品   分析   饲料   化学分析和测试   菌落计数技术   定义   测定   含量测定   食品化学   食品检验   食品   试验研究   微生物分析   微生物学   微菌落计数   微生物   霉菌   基准方法   抽样方法   测试   酵母目  

标准号: ISO 21527-1-2008

摘要： This part of ISO 21527 specifies a horizontal method for the enumeration of viable yeasts and moulds inproducts intended for human consumption or feeding of animals that have a water activity greater than 0,95[eggs, meat, dairy products (except milk powder), fruits, vegetables, fresh pastes, etc], by means of thecolony count technique at 25 ℃ ±1 ℃ (References [1], [2]).This part of ISO 21527 does not allow the enumeration of mould spores. Neither the identification of fungalflora nor the examination of foods for mycotoxins lie within the scope of this part of ISO 21527 The methodspecified in this part of ISO21527 is not suitable for enumeration of heat resistant fungi, such asByssochlamys fulva or Byssochlamys nivea, in canned or bottled frud and vegetables

关键词： 主题词:动物学:生物学-实验-教学参考资料-动物学:生理学-实验-教学参考资料  

ISBN: (纸本)9787811067408

关键词： 乙酰胆碱酯酶   正电子发射电子断层扫描   放射合成   活体显像  

摘要： 第一部分<br>　　 乙酰胆碱酯酶活性的PET显像剂-[11C]MP4A的制备<br>　　 目的:合成能反映脑乙酰胆碱酯酶活性的PET显像剂[11C]4-乙酰氧基-N-甲基哌啶(11C]MP4A)的前体4-乙酰氧基哌啶(P4A);制备[11C]MP4A。方法:合成前体P4A。利用[11C]碘代甲烷合成模块合成的[11C]碘代甲烷([11C]CH3I)直接与P4A反应制备[11C]MP4A,或将[11C]CH3I通过三氟甲基磺酸银柱转化为[11C]-三氟甲基磺酸甲烷([11C]-Triflate-CH4)后再与P4A反应制备[11C]MP4A。结果:P4A化学纯度达99％以上。采用[11C]-Triflate-CH3制备的[11C]MP4A放化纯＞98％,轰击结束后(EOB)放射合成时间为20分钟,校正衰变后产率为40％-55％。<br>　　 结论:采用[11C]-Triflate-CH3制备的[11C]MP4A放化纯度高,产率高。<br>　　 第二部分<br>　　 脑乙酰胆碱酯酶活性的PET显像剂-[11C]MP4A在大鼠体内分布的研究<br>　　 目的:研究脑乙酰胆碱酯酶活性的正电子断层扫描(PET)诊断显像剂[11C]4-乙酰氧基-N-甲基哌啶([11C]MP4A)在大鼠体内的摄取和分布。方法:正常雌性SD大鼠按注射后5、15、25、35、45、60分钟时间点分组,尾静脉注射[11C]MP4A后断头处死动物,迅速取血,分离脏器和脑(大脑皮层、小脑和脑干),用自动γ放射性计数仪测定11C计数后称重。计算经衰变校正后不同时间点各脏器放射性摄取率,以％ID/g表示。结果:一次剂量的[11C]MP4A静脉注射后,血中的放射性活性在5分钟时％ID/g为13.44±1.88,清除迅速,60分钟时接近于基线水平。各脏器组织[11C]MP4A的摄取15-25分钟达到稳态。注射[11C]MP4A5分钟时大脑皮层放射性活性％ID/g为2.26±0.29。脑内各区域的摄取在注射后15-25分钟达到稳态。皮层的平均％ID/g大于小脑,两者比值范围为1.13-2.08。60分钟时小脑、脑干和皮层的％ID/g与其最高峰摄取的％ID/g相比分别下降了77％、8096和40％,皮层放射活清除最慢。结论:[11C]MP4A血中清除迅速。脑中各区域摄取在短时达到稳态,提示[11C]MP4A有较好的脂溶性透过血脑屏障。皮层摄取相对小脑高,清除慢,因此[11C]MP4A能更好反映皮层乙酰胆碱酯酶活性,适合作为脑乙酰胆碱酯酶活性的PET诊断显像剂。<br>　　 第三部分<br>　　 [11C]MP4A的临床前评估-PET活体显像转基因痴呆小鼠、老龄小鼠及猕猴的脑乙酰胆碱酯酶活性<br>　　 目的:用脑乙酰胆碱酯酶活性的正电子断层扫描(PET)诊断显像剂[11C]4-乙酰氧基-N-甲基哌啶([11C]MP4A)对转基因痴呆小鼠、老龄小鼠及猕猴进行活体PET显像研究。方法:小鼠于尾静脉注射[11C]MP4A后,腹腔内麻醉小鼠;猕猴经一侧肘静脉麻醉后,于另侧肘静脉静脉注射[11C]MP4A。固定试验动物于扫描床,进行PET/CT扫描并采集图像。测量各感兴趣区域放射性浓度,计算各感兴趣区域放射总量占全身放射总量的百分比值,用％ID表示,比较两组小鼠间及猕猴的PET显像特点。扫描结束后将小鼠断头处死,分离脑(大脑、小脑和脑干),测定11C计数后称重。计算放射性摄取率,用％ID/g表示,比较两组小鼠脑放射性摄取分布特点。结果:PET扫描图像显示两组小鼠脑放射性聚集均对称分布,转基因痴呆鼠脑中放射性聚集较老龄鼠稀疏。转基因小鼠大脑放射性活性平均％ID/g值为1.49,老龄鼠大脑平均％ID/g值为2.62,p=0.025,两组差别有意义。猕猴[11C]MP4A显像脑内皮层下摄取最明显,对称分布,皮层也有中等度放射聚集,放射显像清晰。结论:[11C]肝4A在小鼠和正常猕猴脑放射显像图像清晰,对称分布浓聚于皮层下,与脑乙酰胆碱酯酶活性的组化分布一致。[11C]MP4APET可以活体显像脑乙酰胆碱酯酶的活性。

ISBN: (纸本)9787030200631

关键词： 野生动物   隐孢子虫   18S rRNA   HSP70   actin   COW   种系发育关系  

摘要： 野生动物是指生存于自然状态下,非人工驯养的各种哺乳动物、鸟类、爬行动物、两栖动物、鱼类、软体动物、昆虫及其他动物。野生动物是多数自然界病原体的天然宿主,野生动物重大疫病与人类公共卫生问题息息相关。寄生虫病是野生动物的常见疾病之一,由于寄生虫病病原种类繁和分布广泛,以及野生动物感染数量大等因素,寄生虫病常造成野生动物机体消瘦,机体防御能力下降,甚至造成动物的死亡。因此,寄生虫病是造成野生动物种群数量下降的重要因素之一。 分别采集17种鸟类,18种草食动物和23种肉、杂食动物的粪便样品162,140,162份,应用饱和蔗糖溶液漂浮法对其寄生虫感染情况进行调查。结果显示:鸟类寄生虫总感染率为19.75%(32/162),主要感染球虫、线虫。草食动物的寄生虫平均感染率为25.71%(36/140)。其中,球虫感染率为14.29%(20/140);线虫总感染率为9.29%(13/140),其中鞭虫和蛔虫感染率分别为7.86%(11/140),1.43%(2/140)。11份云豹的粪便样品中,毛首线虫感染率高达36.4%(4/11);黑豹球虫感染率为100%(1/1),金钱豹球虫感染率为50%(1/2);虎球虫感染率高达100%(4/4),而在三色犬粪便样品中未发现寄生虫虫卵。90份猕猴的粪便样品中,寄生虫感染率高达37.8%(34/90),其中球虫感染5份,鞭虫感染27份,蛔虫感染1份;在采集的其他品种的猴子粪便样品中,寄生虫感染情况也不相同,金丝猴感染鞭虫2份,感染率40%(2/5):食蟹猴球虫感染1份,感染率20%(1/5)。 应用饱和蔗糖溶液漂浮法和改良抗酸染色法,对上海地区野生和圈养的部分爬行类及两栖类动物的隐孢子虫流行情况进行调查。结果显示:改良抗酸染色法检测31份野生蛇胃内容物样品,隐孢子虫感染率为45.2%(14/31);改良抗酸染色法检测44份圈养蛇粪便样品,总感染率为13.6%(6/44),蜥蜴感染率为30%(3/9),乌龟感染率为100%(1/1),巨龟感染率为100%(1/1),蟒蛇感染率为25%(1/4);而饱和蔗糖溶液漂浮法检测,仅发现2份蜥蜴样品感染,感染率为22.2%(2/9)。本调查表明,来自野外蛇的隐孢子虫感染率要显著高于动物园驯养的爬行动物,对喜食野生蛇类的陋习提出了严重的警示。 利用巢式PCR扩增1个蛇源隐孢子虫分离株18S rRNA基因部分片段,PCR产物经过连接转化,挑选阳性克隆进行测序,产物序列长度均为845bp;用限制性内切酶SspI对PCR产物进行消化酶切确定种类和基因型。SspI酶切结果显示:该隐孢子虫分离株酶切后产生383bp、414bp二个片段。根据酶切片段,初步确定这个隐孢子虫分离株为蛇隐孢子虫***。为从分子种系发育关系确定蛇源隐孢子分离株的种类或基因型,利用巢式PCR对这个隐孢子虫分离株进行18S rRNA基因特定片段扩增,并对扩增片段进行测序,获得的序列用Blast和Fasta在NCBI、EMBL和DDBJ三大核酸序列数据库搜索同源序列,然后利用Clustal X1.81、Phylip3.64和DNAstar4.0等生物学软件对序列进行多重比对、构建分子进化树以及同源性分析。根据在18S rRNA基因位点种系进化关系分析,表明该蛇源隐孢子虫分离株为蛇隐孢子虫C. serpentis。 采集郑州地区4个鹿场499份鹿粪便样品,应用饱和蔗糖溶液漂浮法和改良抗酸染色法,对其进行隐孢子虫病的检测,获得2个鹿源隐孢子虫分离株。对其中一个分离株进行巢式PCR检测,基于核糖体小亚基(18S rRNA)基因、70kDa热休克蛋白(HSP70)基因、肌动蛋白(actin)基因和隐孢子虫卵囊壁蛋白(COWP)基因的种类与基因型分析,鉴定郑州地区鹿源隐孢子虫分离株种类、基因型,确定本地区鹿源隐孢子虫分离株和其它种类隐孢子虫之间的分子种系进化关系,为预防和控制鹿隐孢子虫病提供理论依据。 对河南省郑州市动物园,野生动物保护站,邙山鹿场等鹿养殖区进行了的隐孢子虫病感染情况调查。在2份1岁的梅花鹿粪便样品中发现有隐孢子虫感染,总感染率为0.40%(2/499)。低感染率初步揭示了鹿群不是隐孢子虫的重要储藏宿主。更重要的是,这些养殖场远离城市的饮水供应系统。因此,鹿群可能不是郑州地区人隐孢子虫病的重要感染来源。测序获得的序列用邻接法构建进化树进行种系发育分析。结果显示,四个基因位点有相似的拓扑结构,梅花鹿分离株的序列与其他的隐孢子虫鹿基因型序列属于一个群中,该分离株和隐孢子虫鹿基因型在18S rRNA , HSP70 , actin ,COWP基因位点上的相似性分别为99.1%-99.8%, 99.8%, 99.7%和100%。尽管在三个位点上有微小的

关键词： 株树桥水库   浮游动物   群落生态   水质评价   环境保护  

摘要： 对株树桥水库进行为期一周年的浮游动物群落结构特征研究,以期利用浮游动物群落结构变化,并结合理化指标对株树桥水库进行水质综合评价,进而为水库的合理、有效地利用提供基础资料。2007年5月至2001年4月,在水库的主要干道设置10个采样点,对浮游动物进行定性和定量的采集,同步进行温度、PH值和电导率三项物理指标以及氨氮、总磷、总氮、COD和溶解氧五项化学指标的测定。　　 通过浮游动物的种类鉴定,确定了常见种和优势种,同时分析研究了浮游动物群落变化以及温度、pH值、溶解氧和氨氮对浮游动物群落的影响。主要结果如下:　　 株树桥水库共鉴定出浮游动物184种。其中原生动物95种,轮虫71种,枝角类10种,桡足类8种。夏季和秋季的种类数较多,分别达120和138种;春季和冬季次之,种类数分别为72种和64种;而全年均出现的种类有36种。　　 株树桥水库10个采样点的浮游动物数量和生物量的年际变化趋势基本一致,全年浮游动物数量的变动幅度为712-4190ind./L,生物量变动幅度为0.347-2.783mg/L。　　 在水平分布上,上游入口的年均数量最多,生物量最多在升平口,数量和生物量大坝1均最少;在季节分布上,株树桥水库浮游动物数量和生物量在不同季节波动较大,数量表现为秋季>夏季>春季>冬季。生物量表现为夏季>秋季>春季>冬季。　　 浮游动物多样性指数、丰富度指数、均匀度指数大致都是9月,11月较高,1月份最低,优势集中性指数则相反。　　 浮游动物种类数有随着温度的升高而增加的趋势;种类数的年际变化与水体PH的变化关系不明显;浮游动物数量在夏、秋季节与溶解氧含量有显著的相关性;氨氮量高的冬春季,浮游动物种类较少,氨氮量低的夏秋季,浮游动物种类反而较高。　　 通过理化指标的测定,采用化学评价指数(Pb/n)和评分法对内河水质进行评价。同时利用浮游生物现存量、指示生物法、三种多样性指数即Simpson多样性指数、Shannon-Wearer多样性指数和Margalef多样性指数,分别对水库进行水质生物学评价。最后,结合理化指标,对水库进行了营养型评价。　　 综合各种评价方法,测定水库的水质大多处于寡污至乙型中污之间,营养型主要为中营养型。最后结合目前水库水质状况,提出合理开发利用的意见和建议。

关键词： 丙型肝炎病毒   感染   动物模型  

摘要： 丙型肝炎病毒HCV是对全球公众健康影响较为严重的一种病原,目前尚缺乏有效疫苗及针对性强的药物对其进行防控,究其原因是缺少有效的动物模型,使其致病机理研究较为薄弱.因此,建立一种有效的HCV感染动物模型是HCV研究工作中的重要环节.简要介绍了迄今为止国内外已建立的HCV感染动物模型的特点及其应用前景.

关键词： 体表特征   血瘀证   伊文思蓝   证候模型  

摘要： 目的 以“证候表征”理论为指导,按照证候模型“因-脉-证-治”的研究思路,探讨血瘀证证候模型的生物表征变化规律以及血瘀证的生物学基础,为血瘀证证候模型的建立及评价提供新思路。 方法 1.采用Wistar大鼠,静脉注射大分子右旋糖酐(HMWD)造成血瘀模型,用伊文思蓝(EB)标记,观察其不同时间、不同剂量下体表特征变化,检测局部组织及血浆中伊文思蓝的含量,血液流变学相关指标及细胞因子IL-1β、IL-6β、TNF-α、TXB2、6-keto-PGF1α的含量。 2.采用Wistar大鼠,静脉注射细菌内毒素(LPS)/角叉菜胶(CAR),造成热毒血瘀模型,用伊文思蓝(EB)标记,观察其不同时间、不同剂量体表特征变化、检测局部组织及血浆中伊文思蓝的含量、血液流变学相关指标及细胞因子IL-1β、IL-6β、TNF-α、TXB2、6-keto-PGF1α的含量。 3.采用ICR小鼠,腹腔注射活血化瘀药盐酸川芎嗪注射液、复方丹参滴丸溶液,连续3天给药后静脉注射大分子右旋糖酐(HMWD)造成血瘀模型,并用伊文思蓝(EB)标记,观察其体表特征变化、检测耳廓组织中伊文思蓝的含量。 结果 1.注射HMWD大鼠可见明显的血瘀证体表特征,耳廓及舌体出现蓝色的瘀斑瘀点,并随着HMWD剂量增加及注射时间延长,蓝色瘀斑瘀点加重,血浆中EB含量下降,耳廓提取液EB含量增加,(P<0.01);全血粘度(切变率:150/s、38/s、10/s、5/s)、血浆粘度增高,红细胞压积增加,聚集指数、聚集指数积分面积增高,(P<0.01/P<0.05),变形指数、变形指数积分面积有下降趋势;血浆TXB2升高,6-keto-PGF1α下降,TXB2/6-keto-PGF1α增高,( P<0.01);IL-1β, IL-6β与对照组相比无明显变化, TNF-α增高(P<0.01/P<0.05)。 2. LPS/CAR联合造模致热毒血瘀大鼠可见明显的血瘀证体表特征,耳廓及舌体出现蓝色的瘀斑瘀点,并随着LPS剂量增加及注射时间延长,蓝色瘀斑瘀点加重,血浆中EB含量下降,耳廓提取液EB含量增加,(P<0.01)全血粘度、血浆粘度增高,红细胞压积增加,聚集指数、聚集指数积分面积增高,(P<0.01/P<0.05),变形指数、变形指数积分面积有下降趋势;TXB2升高,6-keto-PGF1α下降,TXB2/6-keto-PGF1α增高,(P<0.01/P<0.05);IL-β、IL-6β、TNF-α皆增高(P<0.01/P<0.05)。 3.活血化瘀药干预组小鼠耳廓及舌体蓝色瘀斑范围及程度明显小于模型组,耳廓提取液EB含量明显小于模型组,(P<0.01)。 结论 1.采用尾静脉注射大分子右旋糖酐合用伊文思蓝的方法造成的Wistar大鼠血瘀模型,血瘀体表特征表达与HMWD注射浓度及时间呈明显的时效及量效关系。 2. Wistar大鼠尾静脉注射HMWD后,血液流变学呈“浓”、“粘”、“凝”、“聚”状态,TXB2升高,6-Keto-PGF1α下降。IL-1β、IL-6β虽有一定的变化,但未见明显差异。大鼠血瘀程度与TNF-α呈现明显的相关性。 3.采用LPS/CAR造成的Wistar大鼠热毒血瘀模型,并用伊文思蓝染色,可观察到血瘀体表特征表达与LPS注射浓度及时间呈明显的时效及量效关系。 4. LPS/CAR造成的Wistar大鼠热毒血瘀模型,血液流变学呈“浓”、“粘”、“凝”、“聚”状态,血浆TXB2升高,6-Keto-PGF1α下降,IL-1β、IL-6β、TNF-α升高,说明炎症介导是LPS/CAR血瘀模型关键的发病机制。 5.活血化瘀药川芎嗪注射液、复方丹参滴丸对于尾静脉注射大分子右旋糖酐的模型小鼠有较明显的治疗作用,可使模型小鼠血瘀体表特征明显减轻,从而以方测证,表明伊文思蓝在某种程度上可以表达血瘀证模型动物体表特征变化。 本研究首次采用伊文思蓝作为血瘀模型的染色剂,按照证候模型“因-脉-证-治”的研究思路,观察血瘀模型的体表特征变化,探讨血瘀证证候模型的评价方法以及不同血瘀证模型之间的差异,取得较理想的实验结果,具有首创性。