关键词:
克隆测序
转基因技术
生物碱
贝母
摘要:
该论文总结了前人对贝母的研究工作,尤其是近15年来对贝母的分类、中药贝母的鉴定、贝母的组织培养、鳞茎生长发育机理、化学和药理等方面的工作.对Fritillaria属18个种及作为外类群的Lilium属一种Liliumlancifolium进行了总DNA的提取和5S-rRNA基因间区的PCR扩增和测序.以***和***为例进行了Southernblotting分析,根据所测定出的两种贝母5S-rRNA基因间区的碱基序列,分别设计了探针CB1和ZB1,CB1可以和***杂交,ZB1可以和***杂交.对蒲圻贝母进行了毛状根的诱导试验,以其鳞茎为外植体,以发根农杆菌15834进行感染诱导出了毛状根.对从***鳞茎中提取的蒲贝多糖和贝母生物碱进行了药理作用的初步研究,发现蒲贝多糖有类似NGF的作用,可以使PC12的轴突伸长,但作用效果要弱得多.通过转基因技术将M<,1>和M<,2>受体的基因分别导入HEK293细胞中构建了分子水平筛选M<,1>受体激动剂和M<,2>受体拮抗剂的细胞模型,用CytosensorMicrophysiometerSytem测定加药后细胞外环境的pH变化.