关键词:
细菌素
猪链球菌
全基因组测序
基因簇
植物乳杆菌
摘要:
研究基于猪链球菌(Streptococcus suis,***)耐药性加剧现状,分析植物乳杆菌细菌素抗菌生物学特性及其编码基因簇,旨在探究植物乳杆菌细菌素作为猪链球菌替抗产品的潜力。通过16S rRNA基因测序方法对分离获得的乳酸菌菌株进行鉴定,建立并分析菌株生长曲线及其发酵上清液抑菌动力学曲线,确定菌株最佳培养时间,并测定发酵上清液蛋白酶稳定性、热稳定性、酸碱稳定性及紫外线稳定性。通过全基因组测序技术分析菌株基因组信息及细菌素编码基因簇。结果显示:分离得到植物乳杆菌(Lactiplantibacillus plantarum,***)一株(W-1),其发酵上清液对猪链球菌有较好的抗菌活性。植物乳杆菌W-1的对数生长期为发酵4~6 h,24 h内其最佳培养时间约为18 h,此时其发酵上清液抗菌活性最强。植物乳杆菌W-1发酵上清液对胰蛋白酶敏感性较高,推测其中产生的抗菌活性的物质细菌素。该细菌素具有优异的热稳定性、酸碱稳定性及紫外线稳定性,于40~100℃、pH 2.0~10.0、紫外线处理30~120 min后均能保持较强的抗菌活性。全基因组测序结果表明,植物乳杆菌W-1染色体基因组大小为3297581 bp,GC占比44.47%。细菌素编码基因簇结果中,由结构基因编码参与合成ClassⅡb类细菌素PlnJK、PlnEF的核心肽起重要抗菌作用。植物乳杆菌W-1所产植物乳杆菌素对猪链球菌具有良好且稳定的抗菌效果,有作为猪链球菌替抗品的潜质。