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关键词： 肿瘤流行病学   肿瘤病理学   仁济医院   顾绥岳   核心期刊   细胞生物学   学术交流   胆胰  

摘要： 《肿瘤》创刊于1981年,由我国肿瘤病理学泰斗顾绥岳教授发起创办,并担任第一任主编。此后,我国著名的免疫学与细胞生物学专家余新生教授、国际著名的肿瘤流行病学专家高玉堂教授,先后担任杂志主编。2021年12月起,由我国著名的胆胰外科专家刘颖斌教授担任杂志主编。《肿瘤》杂志由中华人民共和国教育部主管,上海交通大学医学院附属仁济医院和上海市肿瘤研究所主办,长期位列国内核心期刊,是北大核心期刊、中国科技论文核心期刊(统计源)、中国科学引文数据库(CSCD)期刊,同时被许多国际重要数据库收录,包括Embase、Scopus、DOAJ、CA、JST、CSA、VINITI、Index Copemicus、WPRIM等。《肿瘤》杂志是国内肿瘤学术交流的重要平台,为肿瘤学术交流做出了贡献。

关键词： 细胞生物学   现代生物技术   生物化学   基因工程   计算机科学   抵御能力   发酵技术   物质原料  

摘要： 生物技术即人类通过微生物或动植物等生命体对物质原料进行加工制作,从而获得目标产品为社会服务的综合性科技手段。发酵技术与现代生物技术是其主要内容,包括基因工程、生物化学、细胞生物学、计算机科学等在内的现代生物技术为生命活动的深入钻研与深化应用提供了理论支撑,极大地提升了人类面对疾病与灾害的抵御能力。法律视角下,生物技术对生命的根本决定性与对社会的普遍影响力,使其发展面临着全方位的挑战。

关键词： 间充质干细胞   体外培养   免疫   细胞治疗  

摘要： 间充质干细胞是目前应用前景最广泛的优质再生医学资源,由于其没有配型、排异等问题,极其适合于临床研究和应用。为满足临床应用的大量需求,间充质干细胞的体外大规模扩增是必需的。然而体外培养的间充质干细胞随着传代次数的增加,会产生许多生物学变化。该文对在体外连续传代的间充质干细胞的细胞和分子水平上的特征和功能变化作一综述,旨在为进一步优化细胞治疗方案做出理论参考,力求为推动干细胞产业的标准化作出贡献。

关键词： PAQR4   肝细胞癌   增殖   侵袭   迁移   凋亡  

摘要： 目的探究PAQR4在肝细胞癌(HCC)中的表达、预后及其对HepG2细胞的增殖、侵袭、迁移和凋亡的影响。方法利用TCGA数据库中HCC的数据分析PAQR4 mRNA在HCC组织中的表达及对患者的预后意义。构建pcDNA3.1-PAQR4实验组与pcDNA3.1-vector对照组的HepG2细胞株。采用CCK-8法检测过表达PAQR4对HepG2细胞增殖的影响。通过细胞划痕实验和Transwell侵袭实验分别检测过表达PAQR4对HepG2细胞迁移和侵袭能力的影响。利用PI和Annexin V双染实验观察过表达PAQR4对HepG2细胞凋亡的影响。结果TCGA数据库数据分析结果显示PAQR4 mRNA在HCC组织中的表达高于癌旁组织(P<0.05),且PAQR4 mRNA高表达组HCC患者的总体生存率低于低表达组(P=0.012)。单因素回归分析显示PAQR4 mRNA表达水平(HR:1.104,95%CI:1.051~1.160,P<0.001)、T分期(HR:1.816,95%CI:1.442~2.287,P<0.001)、M分期(HR:3.924,95%CI:1.230~12.519,P=0.021)、病理分期(HR:1.879,95%CI:1.466~2.408,P<0.001)对HCC患者的预后存在显著影响。多因素回归分析显示PAQR4 mRNA表达水平(HR:1.396,95%CI:1.081~1.804,P=0.011)是HCC患者预后的独立危险因素。CCK-8实验、划痕实验和Transwell侵袭实验结果表明,与对照组相比,实验组中HepG2细胞的增殖、迁移、侵袭能力均明显得到促进(P<0.05)。细胞凋亡实验结果显示过表达PAQR4可以抑制HepG2细胞凋亡(P<0.05)。结论PAQR4在HCC组织中高表达且与预后相关,过表达PAQR4促进HepG2细胞的增殖、侵袭、迁移并抑制HepG2细胞的凋亡。PAQR4有可能成为HCC诊断和预后的新标志物。

关键词： 细胞生物学  

ISBN: (纸本)9787309160628

摘要： 本教材由复旦大学生命科学学院细胞教学组牵头，组织国内多年从事细胞和分子生物学科研及教学的教授和专家改编完成。在系统阐述细胞各部分的结构和功能的基础上，重点介绍细胞内外的物质运输、信息传递、能量转换、周期调控、分化发育、癌变、免疫、衰老与凋亡等细胞的重大生命活动。全书用英文撰写，语言简练、通俗，知识体系精确、先进，既介绍细胞生物学的基本概念和基本原理，又反映各领域的发展前沿。各章结尾附有思考题，附录为细胞生物学常用词汇的中文解释，便于读者自学，同时掌握中英文专业知识。本教材为英文教材，可供综合性大学、师范院校、医学院校、农林院校的研究生使用，也可供教师、科研人员与科教管理人员参考。

关键词： 细胞生物学   研究  

ISBN: (纸本)9787313259226

摘要： 本书是一本介绍细胞来龙去脉的科普读物，讲述了细胞的基本知识、细胞发现背后的故事，以及备受关注的细胞治疗和基因编辑的科学原理及其相关领域的重要事件。本书图文并茂，通过一个个科学家的小故事，理清了细胞生物学的发展脉络，更见微知著、以小写大，引起读者对细胞科学发展的思考和审视。本书可供中学生、大学生参考学习，也可供对细胞感兴趣的读者阅读。

关键词： B7-H3   类风湿关节炎   成纤维样滑膜细胞   生物学功能  

摘要： 类风湿关节炎(Rheumatoid Arthritis,RA)是一种以侵蚀性、对称性多关节炎为主要临床特征的慢性、全身性自身免疫病。RA的基本病理改变是滑膜增生、炎症细胞浸润、关节翳形成以及关节软骨和骨基质破坏。成纤维样滑膜细胞(Fibroblast-like synoviocytes,FLS)是炎症性滑膜炎中组织损伤和基质重塑的直接效应细胞,在RA疾病发生发展过程中发挥了重要的作用。 B7-H3(CD276)是一种重要的共刺激分子。研究表明,B7-H3在多种恶性肿瘤和自身免疫性疾病中异常表达,并与患者预后不良和疾病进展密切相关。此外,B7-H3在细胞增殖、迁移侵袭和细胞凋亡等多种生物学功能中发挥了重要的调节作用。由于B7-H3的受体尚未鉴定,其调控生物学功能的确切机制尚待进一步探讨。 研究目的: 本课题以B7-H3在RA患者滑膜组织FLS中的异常表达为切入点,旨在探讨B7-H3分子在FLS中的生物学功能及其可能的作用机制,为RA临床诊断和治疗提供新的分子靶点。 研究方法: 1.B7-H3分子在RA患者滑膜组织FLS中的表达及细胞定位:(1)通过流式细胞术检测RA滑膜组织中多种共刺激分子的表达;(2)通过western blot、real time-PCR分析B7-H3分子在滑膜组织中mRNA和蛋白水平的表达;(3)结合单细胞测序数据分析B7-H3分子在RA滑膜组织中的细胞定位;(4)通过免疫组织化学染色、流式细胞术检测B7-H3在炎性滑膜组织中的表达。 2.B7-H3分子在RA-FLS中的生物学功能:(1)以原代培养的人RA-FLS细胞系为研究对象,通过siRNA沉默B7-H3表达并鉴定干扰效率;(2)通过cck8法检测B7-H3对细胞增殖的影响;(2)通过AnnexinV-PE/7AAD凋亡检测试剂盒分析B7-H3敲减后RA-FLS凋亡能力、细胞周期的变化;(3)通过CBA法检测B7-H3信号改变后FLS中炎性因子和趋化因子表达变化;(4)通过Transwell法检测RA-FLS对THP-1、PBMC的趋化能力的影响;(5)通过迁移实验、划痕实验和侵袭实验观察细胞体外迁移和侵袭的能力;(6)通过FN、matrix铺板法观察细胞体外黏附能力的变化。 3.B7-H3分子调控FLS生物学功能的分子机制:(1)蛋白芯片分析B7-H3对RA-FLS蛋白表达的影响;(2)通过Western blot方法检测B7-H3对RA-FLS信号通路蛋白分子表达的影响。 研究结果: 1.B7-H3分子在RA患者滑膜组织FLS中的表达及细胞定位:(1)共刺激分子PD-L2和B7-H3在RA-FLS中上调表达;(2)RA滑膜组织中的B7-H3分子在mRNA水平的表达显著高于健康对照组(P<0.05);在蛋白水平的表达OA和健康对照组(P<0.05);(3)在RA滑膜组织中,B7-H3分子主要在FLS、单核巨噬细胞上异常高表达。 2.B7-H3分子在FLS中的生物学功能:(1)成功建立并鉴定了 10株原代培养的RA-FLS并利用siRNA成功敲减细胞中B7-H3分子的表达;(2)B7-H3敲减后,与对照组相比,si1041组在48h(P<0.01)、72h(P<0.001)和96h(P<0.001)时,FLS的细胞增殖水平显著降低;(3)B7-H3敲减后,与对照组相比,si996组和si1041组凋亡水平和细胞周期无明显改变;(4)B7-H3敲减后,与对照组相比,si996组FLS分泌的细胞因子IL-6(P<0.01)和IL-8(P<0.001)显著降低,趋化因子 CXCL8(P<0.001)、CCL5(P<0.01)、CCL2(P<0.01)和CXCL10(P<0.05)显著降低,而si1041组仅趋化因子CCL2降低(P<0.05);(5)B7-H3敲减后,与对照组相比,si996组和si1041组FLS细胞招募的THP-1(P<0.05)和PBMC(P<0.001)细胞数量显著减少,即B7-H3下调后,RA-FLS对THP-1和PBMC的趋化能力降低;(6)细胞迁移和侵袭实验结果表明,B7-H3敲减后,与对照组相比,si996和si1041组中 RA-FLS 的细胞迁移显著降低(P<0.01);si996(P<0.05)和 si1041 组(P<0.01)侵袭能力均降低;(6)B7-H3敲低后,与对照组相比,si996和si1041组中FLS对FN的粘附能力显著降低(P<0.01和P<0.001),si996和si1041组中FLS对matrix胶的粘附能力显著降低(P<0.001)。 3.B7-H3分子调控FLS生物学功能的分子机制:(1)差异基因KEGG pathway富集分析结果表明,与对照组细胞相比,si996组RA-FLS中负责细胞间粘

关键词： LI-cadherin   Wnt/β-catenin信号通路   结肠癌   增殖、侵袭和转移  

摘要： 背景:结肠癌是我国最常见的恶性肿瘤之一,在癌症相关死因中占第四位。尽管手术切除、化学治疗、免疫治疗等方案能改善患者的生存状况,但治疗后部分患者仍出现复发或远处转移,整体预后不甚理想。因此,深入探讨结肠癌的侵袭转移机制,对结肠癌的防治具有重要的临床意义和实践价值。肝肠钙粘连蛋白(Liver-Intestine cadherin,LI-cadherin,cadherin-17)是一种结构独特的钙粘连蛋白家族成员,具有钙离子(Ca2+)依赖性细胞黏附功能,而不依赖于细胞骨架的相互作用。研究发现LI-cadherin在结肠癌中的异常表达与细胞侵袭转移有关,且具体的分子机制并不明确。本课题组前期实验发现结肠癌细胞中Wnt信号通路三条途径中相关基因的表达均受到LI-cadherin影响。基于此,本研究将聚焦Wnt/β-catenin经典通路,进一步探索LI-cadherin对Wnt/β-catenin经典通路的具体调控机制,及其与LI-cadherin调控结肠癌肿瘤生物学行为的关联性。目的:明确LI-cadherin对Wnt/β-catenin信号通路的具体调控机制,并研究LI-cadherin 对 Wnt/β-catenin 信号通路的调控作用与其影响的结肠癌肿瘤生物学行为之间的关联性。方法:1.构建慢病毒沉默包装载体和腺病毒过表达包装载体,分别转染结肠癌LoVo细胞,建立上调和下调LI-cadherin的细胞模型。***实验和Transwell实验分别检测干扰LI-cadherin基因的表达对结肠癌细胞增殖能力和迁移侵袭能力的影响。*** Blot检测LoVo细胞内Wnt/β-catenin通路相关蛋白的表达水平,细胞核及细胞浆内β-catenin的表达情况。4.应用双荧光素报告基因检测技术测定Lo Vo细胞内TCF/LEF启动子活性。5.免疫共沉淀实验分析LoVo细胞内与LI-cadherin相互作用的蛋白。结果:1.过表达LI-cadherin可抑制结肠癌细胞的增殖、迁移侵袭能力(P<0.01)。敲减LI-cadherin则产生相反的效应(P<0.01)。2.过表达 LI-cadherin 可促进 LoVo 细胞 FZD3、APC、GSK3β、β-catenin、p-β-catenin、MYC、CyclinD1、PPARD 等蛋白分子表达量上升(P<0.05),p-GSK3β表达量下降(P<0.01),细胞核中β-catenin蛋白表达量显著上升(P<0.01)。沉默LI-cadherin则导致上述相关蛋白分子的表达呈现相反的结果(P<0.01)。3.下调LI-cadherin可使LoVo细胞内TCF/LEF启动子活性显著减弱(P<0.001)。但过表达LI-cadherin后,细胞内启动子活性未出现显著变化(P>0.05)。4.经LI-cadherin抗体免疫共沉淀的蛋白复合物中可检测到β-catenin、GSK3β蛋白,且它们的表达量与LI-cadherin表达量成正比。5.在过表达LI-cadherin的细胞中添加经典Wnt信号通路抑制剂XAV939可以逆转β-catenin总量和核内量的上调(P<0.05)。在敲减了 LI-cadherin的细胞中添加经典Wnt信号通路激动剂LiCl可逆转β-catenin总蛋白和核内蛋白水平的下降(P<0.01)。***可以抵消LI-cadherin过表达对LoVo细胞生物学功能的抑制作用,XAV939可以抵消LI-cadherin沉默对LoVo细胞生物学功能的促进作用。结论:***-cadherin抑制结肠癌LoVo细胞的增殖、侵袭转移等肿瘤生物学发展进程;***-cadherin对Wnt/β-catenin信号通路有激活作用;***-cadherin对Wnt/β-catenin信号通路的调控作用在结肠癌的发生发展进程中并非起到决定性作用。

关键词： SRPX2   CRISPR-Cas9   基因敲除   肺腺癌  

摘要： 背景肺癌是世界上发病率最高的恶性肿瘤,其中肺腺癌是最常见的病理类型之一。肺癌因缺乏早期诊断的分子标志物,半数以上的患者初诊时已是中晚期,失去手术根治机会,五年生存率不足20%。在肺癌中,对肺腺癌的突变基因研究较多,肺腺癌缺陷基因研究成为目前的前沿课题,靶向药物也相应增多,为此类基因突变患者带来了生存获益。近年来,SRPX2是肿瘤相关分子生物学研究的热点,大量研究表明SRPX2在许多癌症细胞中都过度表达,与其迁移和侵袭紧密相关。然而,它在肺腺癌的生物学特性和功能仍不清楚。目的探索敲除SRPX2基因后对肺腺癌A549细胞生物学特性和功能的影响,为肺腺癌开发新的治疗靶点或预后标志物提供依据。方法（1）构建SRPX2基因敲除（SRPX2-KO）肺腺癌细胞系。通过使用CRISPR-Cas9基因编辑技术来沉默A549细胞中的SRPX2基因。使用CRISPR-UTM表达质粒（Ubigene）,通过电转法将sg RNA和Cas9转入A549细胞中后进行pool筛选与单克隆化。随后使用DNA测序技术来验证SRPX2基因敲除的效果。（2）通过进行细胞周期检测实验、Transwell细胞迁移实验、CCK-8法检测细胞增殖实验,分析敲除SRPX2对肺腺癌A549细胞生物学特性的影响。结果（1）敲除A549细胞的SRPX2基因后,通过DNA测序技术检测到A549细胞的SR PX2基因的表达几乎消失,SRPX2-KO细胞中缺失68bp,为AGATGAGATGCCACG CACTACCATTCATCAC(（?）)GCTACCACCTGGAAGGTGATCGC AGCCGAATCTGCATGGAAGATGGGAGATGGAGTGGAGGCGAGCCTGTATGTGT AG。（2）SRPX2基因的敲除对A549细胞周期进程产生明显影响,细胞S期比例显著下降,G2/M期细胞比例增加。A549细胞的迁移能力因SRPX2的敲除而显著降低。SRPX2基因的敲除对A549细胞5天内的增殖无显著影响。结论本研究结果表明SRPX2在肺腺癌细胞的生长和迁移过程中发挥重要作用,可做为肺腺癌的新治疗靶点或预后标志物。

关键词： 黄芩素   miR-7   胃癌细胞   自噬   MAPK/ERK信号通路  

摘要： 研究背景:胃癌(Gastric Cancer,GC)是全球第五大常见恶性肿瘤,其死亡率高居全球第三。微小RNA(micro RNAs)是一类由内源基因编码的长度约为22个核苷酸的非编码单链RNA分子,miRNA在细胞生长和发育的调节过程中起多种作用。虽然在人类胃癌组织中观察到了miR-7的低表达,但是miR-7在胃癌中的作用还没有得到充分的研究。黄芩素(baicalein,BAI)是中草药黄芩的有效成分,具有抗癌作用,常用于胃癌、肺癌等抗肿瘤的研究。课题组的前期研究发现,BAI具有有效抑制胃癌细胞的增殖和迁移等生物学特性。有趣的是,我们发现BAI处理胃癌SGC-7901和BGC-823细胞可上调其miR-7的表达水平。BAI是否通过上调miR-7的表达发挥抑癌作用尚未见报道。因此,本文研究了人胃癌细胞SGC-7901和BGC-823细胞经BAI处理和高表达miR-7处理对其生物学特性的影响和作用机制。目的:探讨BAI上调miR-7介导MAPK/ERK信号通路对胃癌细胞增殖、侵袭、迁移、自噬和血管形成等生物学功能的影响,初步阐释其分子机制。材料与方法:1.材料:人胃癌SGC-7901、BGC-823细胞株和人脐静脉内皮细胞HUVEC均来自延边大学肿瘤研究中心。2.方法:(1)采用MTT法检测BAI对SGC-7901、BGC-823细胞增殖的影响,筛选BAI的适宜用药浓度和作用时间;(2)应用q RT-PCR法检测BAI处理SGC-7901、BGC-823细胞后的miR-7表达量;(3)采用病毒转染法稳定转染miR-7 mimic,制备高表达miR-7的胃癌细胞株SGC-7901/miR-7 mimic和BGC-823/miR-7 mimic,用嘌呤霉素对细胞株进行筛选,并用q RT-PCR法验证转染效果;(4)采用MTT、平板克隆及Ed U实验检测高表达miR-7和联合应用BAI处理对胃癌细胞增殖的影响;(5)应用细胞划痕实验和Transwell迁移和侵袭实验检测高表达miR-7和联合应用BAI处理对胃癌细胞迁移和侵袭能力的影响;(6)应用免疫荧光检测高表达miR-7和联合应用BAI处理对胃癌细胞EMT相关标记物自噬相关标志物表达水平的影响;(7)采用血管形成实验检测高表达miR-7和联合应用BAI处理对胃癌细胞体外微管生成能力的影响;(8)应用Western blot实验检测高表达miR-7和联合应用BAI处理对MAPK/ERK信号通路蛋白、EMT相关蛋白、MMP家族蛋白、自噬相关蛋白和血管形成相关蛋白的表达水平;(9)构建裸鼠皮下移植瘤模型,比较高表达miR-7和联合应用BAI处理对移植瘤形成的影响;构建裸鼠腹腔种植瘤模型,比较高表达miR-7和联合应用BAI处理对腹腔种植瘤形成的影响。结果:***实验结果显示,BAI可显著抑制SGC-7901和BGC-823细胞的增殖能力(P<0.05或P<0.01),48h的IC值分别为68.92μmol/L和47.54μmol/L,选用50μmol/L进行接下来的实验;2.q RT-PCR结果:SGC-7901和BGC-823细胞经BAI处理后,与未用药组相比,miR-7的表达显著上调(均P<0.01);SGC-7901/miR-7 mimic和BGC-823/miR-7 mimic的miR-7表达显著增加(均P<0.01);***、平板克隆以及Ed U实验结果显示:高表达miR-7可明显抑制SGC-7901和BGC-823细胞的细胞活力、克隆形成和DNA合成能力,而高表达miR-7细胞用BAI处理可以促进高表达miR-7的抑制作用进一步降低胃癌细胞的细胞活性、克隆形成、DNA合成能力(P<0.05或P<0.01);4.划痕愈合和Transwell迁移和侵袭实验结果显示:高表达miR-7可明显抑制SGC-7901和BGC-823细胞的横向、纵向迁移能力和侵袭能力,而高表达miR-7细胞用BAI处理可以促进高表达miR-7的抑制作用进一步降低其横向、纵向迁移能力和侵袭能力(P<0.05或P<0.01);5.免疫荧光结果显示:(1)高表达miR-7可明显促进SGC-7901和BGC-823细胞EMT标志物中E-cadherin蛋白的表达水平,而抑制Vimentin蛋白的表达水平,而高表达miR-7细胞用BAI处理可以促进高表达miR-7的作用进一步促进E-cadherin蛋白的表达水平,而降低Vimentin蛋白的表达水平;(2)高表达miR-7可明显促进SGC-7901和BGC-823细胞自噬相关标志物中LC3蛋白的表达水平,而高表达miR-7细胞用BAI处理可以促进高表达miR-7的作用进一步促进LC3蛋白的表达水平;6.血管形成实验结果表明:高表达miR-7可明显抑制SGC-