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关键词： miR-574   子痫前期   细胞生物学功能   上皮-间充质转化  

摘要： 目的探讨微小RNA-574(miR-574)在子痫前期(PE)孕妇胎盘组织中的表达及其在子痫前期发病机制中的意义。方法收集2021年3月至2023年6月承德市妇幼保健院产科收治的35例PE孕妇(PE组)和20例正常孕妇(正常组)的胎盘组织标本,采用qRT-PCR检测miR-574在不同胎盘组织中的表达。体外培养滋养细胞HTR8/Svneo,分为过表达组、抑制组、对照组,分别转染miR-574 mimics、miR-574 inhibitor、miR-NC。采用CCK-8实验检测各组细胞增殖能力;流式细胞术检测各组细胞凋亡率;Transwell小室实验检测各组细胞侵袭能力;Western blot检测各组细胞EMT相关蛋白表达。结果与正常组比较,PE组孕妇胎盘组织中miR-574表达明显升高(P<0.05),并且重度PE孕妇的miR-574表达明显高于轻度PE孕妇(P<0.05)。与对照组比较,过表达组细胞miR-574表达升高(P<0.05),增殖能力下降(P<0.05),凋亡率升高(P<0.05),侵袭细胞数减少(P<0.05),E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05),MMP9和N-cadherin蛋白表达降低(P<0.05)。与对照组比较,抑制组细胞miR-574表达降低(P<0.05),增殖能力升高(P<0.05),凋亡率下降(P<0.05),侵袭细胞数增多(P<0.05),E-cadherin蛋白表达降低(P<0.05),MMP9和N-cadherin蛋白表达升高(P<0.05)。结论PE患者胎盘组织中miR-574表达增高,其能够通过影响滋养细胞增殖、凋亡、侵袭及EMT参与PE的发病过程。

关键词： 罗盘山猪   成纤维细胞   细胞冷冻保存   细胞凋亡   核型  

摘要： 以濒危品种罗盘山猪(Sus scrofa domestica)耳缘组织为材料,利用组织块贴壁法建立罗盘山猪耳缘成纤维细胞系,并对低代次(第3代)及高代次(第9代)成纤维细胞冻存前与复苏后相关生长特性进行分析。研究结果表明:罗盘山猪耳缘成纤维细胞生长状态良好,第3代成纤维细胞纯化程度高于98%;细胞遗传学分析显示细胞具有18对常染色体和1对性染色体,证明该细胞系为稳定二倍体细胞系;细胞支原体检测为阴性,表明该细胞系无支原体污染;第3代及第9代细胞冻存前与复苏后生长曲线均呈现“S”型;第3代细胞冻存前与复苏后活率分别为92.56%±1.23%和90.36%±1.29%,复苏后细胞周期中DNA合成前期(G1)细胞比例显著增加,但DNA合成后期(G2)期和DNA合成期(S)细胞占比、细胞凋亡率、活性氧水平与衰老水平与冻存前差异不显著;第9代细胞冻存前与复苏后活率分别为83.66%±3.18%和72.83%±0.59%,复苏后细胞周期中G2期细胞比例未出现显著变化,而G1期与S期细胞占比、细胞凋亡率、活性氧水平与衰老水平与冻存前差异均显著。本研究成功建立了罗盘山猪耳缘成纤维细胞系,通过测定第3代与第9代细胞冻存前与复苏后相关生长特性,证明低代次的罗盘山猪耳缘成纤维细胞在经过冻存后的生长特性更加稳定,更适合长期超低温保存,为后续遗传学等研究提供稳定和优良的材料。

关键词： 胃肠道间质肿瘤   HDL脂质转运蛋白ATP结合盒转运体A1   p21激活激酶4   增殖   迁移   侵袭  

摘要： 目的探讨ATP结合盒转运体A1(ABCA1)和p21激活激酶4(PAK4)的相互作用及其对胃肠道间质瘤细胞系(GIST-T1)生物学的影响。方法选取秦皇岛市第一医院在2021年3月至2022年11月手术切除的胃肠道间质瘤病人的肿瘤组织和正常胃黏膜组织,免疫组化和免疫荧光检测ABCA1和PAK4在胃肠道间质瘤病人肿瘤组织和正常胃黏膜组织表达;实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测ABCA1和PAK4在胃肠道间质瘤细胞系GIST-T1和人正常肠上皮细胞NCM-460中表达;qRT-PCR确定ABCA1和PAK4在GIST-T1的相互作用;免疫荧光确定ABCA1和PAK4在GIST-T1内的表达;CCK-8研究ABCA1和PAK4对GISTT1细胞增殖能力影响;Trans-well小室探究过表达ABCA1和PAK4对GIST-T1细胞迁移和侵袭能力影响;划痕愈合观察ABCA1和PAK4对GIST-T1细胞划痕愈合能力影响。结果ABCA1在肿瘤组织(29.15±3.98)中染色阳性面积显著高于正常胃黏膜组织(3.89±0.87);PAK4在肿瘤组织(16.90±2.85)中染色阳性面积显著高于正常胃黏膜组织(3.95±0.73);ABCA1在GIST-T1的阳性细胞数(48.00±6.35)显著高于NCM-460(13.070±5.38);PAK4在GIST-T1的阳性细胞数(42.00±5.03)显著高于NCM-460(13.67±3.74);ABCA1过表达细胞株细胞48h后增殖能力(1.09±0.03)显著高于空白对照组细胞增殖能力(0.75±0.01);PAK4过表达细胞株细胞48h后增殖能力(1.03±0.06)显著高于空白对照组细胞增殖能力(0.62±0.04);PAK4随着ABCA1过表达而增加(pcDNA3.1-NC比pcDNA3.1-ABCA1为1.03±0.01比3.63±0.74);ABCA1随着PAK4过表达而增加(pcDNA3.1-NC比pcDNA3.1-PAK4为0.98±0.01比2.52±0.03)。结论ABCA1和PAK4相互作用促进胃肠道间质瘤细胞的恶性生物学行为。

关键词： 肺癌   和厚朴酚   细胞增殖   细胞迁移   细胞侵袭   细胞凋亡   细胞自噬   核因子E2相关因子2/血红素氧合酶1信号通路  

摘要： 目的:探讨和厚朴酚(HNK)对肺癌细胞(A549细胞)生物学活性的调控作用机制。方法:将处于对数生长期的A549细胞分别用0、10、20、40、80μmol/L的HNK处理0、24、48 h,用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力及筛选HNK实验浓度、时间。细胞克隆形成实验检测HNK对A549增殖能力的影响,划痕实验和细胞迁移或侵袭实验检测HNK对A549细胞迁移和侵袭能力的影响,不同荧光染色法检测细胞活性氧(ROS)含量、细胞自噬、线粒体膜电位的变化和细胞凋亡情况;用蛋白质印迹法(Western Blotting)检测细胞相关蛋白表达。结果:根据MTT法测得细胞抑制率曲线,选取40、80μmol/L的HNK,作用时间为48 h进行后续实验。与0μmol/L比较,40、80μmol/L的HNK能够显著抑制A549细胞增殖、克隆形成、迁移和侵袭能力,并使细胞内ROS含量升高,促进细胞自噬和凋亡,且呈浓度依赖性。与0μmol/L比较,40、80μmol/L的HNK抑制A549细胞内B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)蛋白、泛素结合蛋白(p62)、波形蛋白(Vimentin)、神经钙黏素(N-cadherin)、核因子E2相关因子2(Nrf2)和血红素氧合酶1(HO-1)相关蛋白表达,促进Beclin蛋白复合物-1(Beclin1)、微管相关蛋白1轻链3(LC3)和细胞中上皮钙黏素(E-cadherin)表达,且差异有统计学意义(P<0.05)。结论:HNK可抑制肺癌细胞增殖、迁移及上皮间质转化(EMT),并促进其自噬和凋亡,其作用机制可能与抑制Nrf2/HO-1信号通路激活有关。

关键词： 卷烟烟气   转录组测序   BEAS-2B细胞   差异表达基因(DEGs)   信号通路  

摘要： 为了研究卷烟全烟气诱导BEAS-2B细胞生物学效应的分子机制,采用CCK-8法测试卷烟全烟气暴露下的细胞存活率,利用高通量测序技术对暴露后的细胞进行转录组测序,并利用实时定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)技术对测序结果进行验证,对测序数据进行差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)分析、GO和KEGG通路分析以及基因共表达网络分析。结果显示,随着卷烟全烟气染毒剂量增加,细胞存活率呈现逐渐降低的趋势,并且具有明显的剂量-效应关系;与细胞对照组相比,卷烟全烟气暴露组共获得239个DEGs,其中126个上调,113个下调;所选的7个DEGs的RT-qPCR结果与转录组测序数据一致;GO和KEGG分析结果显示,DEGs主要参与了细胞因子介导的信号通路、对外源性刺激的反应、炎症反应、细胞凋亡过程、细胞凋亡过程的正向调控和细胞间信号传递等多个生物学过程。DEGs主要富集在TNF信号通路、程序性坏死、铁死亡、PI3K-Akt信号通路、MAPK信号通路等炎症和氧化应激相关的信号通路。HMOX1、IL1A、MMP1、CXCL1、SOCS3、CSF1、NQO1、CYP1A1、CYP1B1、FOSL1和AREG等为卷烟全烟气诱导细胞生物学效应的枢纽基因。这些结果为揭示卷烟烟气诱导细胞生物学效应的分子机制提供了理论依据。

关键词： 教学设计   细胞生物学   融合模式   实践  

摘要： 混合式教学为学生创造了一种既能有效激发自主学习的能力,又能提升课堂参与度的学习体验。该教学模式的核心在于对课程内容进行重新设计,以更好地满足学生的学习需求。然而,目前关于混合式教学的实证研究仍然相对不足。基于对细胞生物学课程特征和学生学习状况的深入分析,该文以“第四章物质的跨膜运输”为例,对细胞生物学课程的混合式教学进行了创新设计与实践研究。该课程设计以OBE教育理念为指导,依托BOPPPS教学模式,构建知识明线与思政暗线双线并进的混合式教学体系,以有效提升教学质量,助力学生综合素质发展。

关键词： 硫酸软骨素蛋白多糖4假基因12   免疫浸润   遗传变异   细胞生物学功能   小细胞肺癌  

摘要： 目的:探讨硫酸软骨素蛋白聚糖4假基因12(CSPG4P12)在小细胞肺癌(SCLC)组织中的表达、与免疫浸润的关系及其对细胞生物学功能的影响,阐明其在SCLC发生发展中的作用。方法:通过ArrayExpress数据库检索获得的SCLC的E-GEOD-60052队列数据,利用R语言Bioconductor包完成数据过滤标准化,并获得63例SCLC肿瘤组织和7例正常组织样本,使用Mann-Whitney U检验分析2组样本中CSPG4P12表达水平差异情况,使用Pearson相关性分析评估CSPG4P12表达水平与47种免疫检查点基因之间的关联。使用ESTIMATE算法和CIBERSORT算法评估CSPG4P12表达与肿瘤免疫细胞浸润之间的关联。采用病例对照研究分析临床资料,选取230例SCLC患者为病例组,230名健康体检者为对照组。采用TaqMan-MGB荧光探针标记法进行CSPG4P12 rs2880765、rs6496932和rs8040855位点基因分型实验,通过非条件Logistic回归模型计算比值比(OR)和95%置信区间(CI),分析CSPG4P12基因多态遗传变异与SCLC发病风险的关联。SCLC DMS114细胞分别转染pUC-57质粒(对照组)和CSPG4P12过表达质粒(OV-CPG4P12组),采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法验证2组细胞中CSPG4P12过表达效率。采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测2组细胞增殖活性,Transwell小室实验检测2组迁移细胞数和侵袭细胞数,Hoechst 33342荧光染色法观察2组细胞凋亡情况。结果:ArrayExpress数据库E-GEOD-60052队列分析,与正常组织比较,SCLC肿瘤组织中CSPG4P12 mRNA表达水平明显降低(P<0.001)。CSPG4P12表达与免疫检查点基因白细胞相关免疫球蛋白样受体1(LAIR1)(r=0.47,P<0.001)、肿瘤坏死因子(TNF)受体超家族成员9(TNFRSF9)(r=0.38,P<0.01)和TNF超家族成员9(TNFSF9)(r=0.44,P<0.001)均呈正相关关系。ESTIMATE算法,CSPG4P12低表达组患者基质评分、免疫评分和ESTIMATE综合评分均低于CSPG4P12高表达组(P<0.01)。CIBERSORT算法,与CSPG4P12高表达组比较,CSPG4P12低表达组中M0型巨噬细胞浸润增加(P<0.05),静息肥大细胞浸润降低(P<0.05)。CSPG4P12表达水平与静息肥大细胞浸润(r=0.35,P=0.030)和单核细胞浸润(r=0.34,P=0.034)呈正相关关系。病例对照研究,与AA基因型比较,CSPG4P12 rs2880765位点AT和TT基因型携带者患SCLC风险增加(OR=1.68,95%CI=1.15~2.45,P<0.01)。分层分析,在男性、低年龄(≤60岁)及吸烟亚组人群中,rs2880765 A>T遗传变异可增加SCLC发病风险(男性:OR=1.86,95%CI=1.18~2.93,P<0.01;≤60岁:OR=1.73,95%CI=1.11~2.68,P<0.01;吸烟:OR=2.76,95%CI=1.49~5.13,P=0.001)。细胞生物学实验,与对照组比较,在48和72 h时,OV-CSPG4P12组细胞增殖活性明显降低(P<0.01);24 h时迁移细胞数明显减少(P<0.01),凋亡细胞数明显增加(P<0.05),48 h时侵袭细胞数明显减少(P<0.01)。结论:CSPG4P12在SCLC肿瘤组织中低表达,与免疫浸润有关联。CSPG4P12 rs2880765 A>T遗传变异可以增加SCLC发病风险,其过表达能抑制细胞增殖、迁移和侵袭,促进细胞凋亡。

关键词： DNA双螺旋结构   遗传奥秘   细胞生物学   细胞多样性  

摘要： 从宏观世界到微观世界,生物学的复杂性逐渐被细胞生物学揭示出来。如何认识生物体这种看似神奇的生命现象?本文试从细胞的概念出发,探索细胞多样性的奥秘,并通过经典的实验予以验证。在此基础上,进一步介绍生物学中的一个重要概念——DNA双螺旋结构,阐述其生物学意义,并结合具体例子,帮助大家更好地理解遗传学对生物世界产生的深远影响。

关键词： 脐带间充质干细胞   多分化潜能   移植治疗   肺损伤   修复效应  

摘要： 目的探究鸡脐带间充质干细胞(umbilical cord mesenchymal stem cells,UMSC)的多向分化潜能等生物学特征以及对博来霉素(bleomycin,BLM)介导的肺损伤小鼠的修复效应。方法向小鼠肺支气管注射BLM,构建小鼠急性肺损伤模型,通过尾静脉移植UMSC,病理学切片的观察、移植细胞在小鼠体内存活及分化、羟脯氨酸(Hydroxyproline,HYP)含量等检测指标,评估分析UMSC对小鼠肺损伤的修复效应。结果本研究成功分离的UMSCs,阳性表达特异性表面标记物CD29、CD44、CD90和CD166,而CD34与CD45的表达呈阴性,且诱导培养的UMSC可以向脂肪、成骨、软骨和肺泡上皮细胞分化;动物实验发现,经BLM处理的小鼠肺泡结构受损,肺泡内炎症细胞浸润、异常的胶原蛋白沉积,移植UMSC治疗后,小鼠肺部受损的面积和程度降低,肺组织HYP含量下降但高于对照组。结论UMSC在体外培养条件下可以持续扩增、保持其生物学特性,并具有定向迁移至受损部位、定向分化的能力,对BLM诱导的急性肺损伤小鼠有一定的修复效应。

关键词： 细胞生物学   互联网+教育   混合式教学   教学改革  

摘要： 在“互联网+教育”的时代背景下,如何运用信息技术构建智慧课堂,将学生的兴趣偏好与教学内容相结合,推动教学重心从“教”向“学”转变,已然成为细胞生物学教学实践中必须面对和解决的问题。细胞生物学课程团队采用混合式智慧课堂教学模式,围绕学生的个性化、差异化学习需求,不断激发学生的学习兴趣,培养学生的主动性和创造性。