教学课程资源库 更多>>

关键词： 牙周炎   干细胞   牙周膜干细胞   外泌体   细胞增殖   成骨分化   组织工程  

摘要： 背景:近年来牙周膜干细胞外泌体在牙周组织再生工程中的应用得到了广泛研究,但其对于炎症环境来源牙周膜干细胞的影响尚不清楚。目的:探讨健康和炎症环境来源牙周膜干细胞所分泌的外泌体对炎症环境来源牙周膜干细胞增殖及分化能力的影响。方法:采用酶消化法分离培养健康牙周组织与牙周炎组织来源的人牙周膜干细胞,采用超速离心法提取两种来源人牙周膜干细胞的外泌体。选取生长状态良好的第3代炎症组织来源牙周膜干细胞,分3组培养:空白组常规培养,健康外泌体组加入健康组织来源外周膜干细胞分泌的外泌体,炎症外泌体组加入炎症组织来源人牙周膜干细胞分泌的外泌体,检测细胞增殖与克隆形成;在成骨诱导分化条件下,检测细胞碱性磷酸酶表达与矿化结节形成、成骨相关基因mRNA与蛋白的表达。结果与结论:①CCK-8检测与克隆形成实验显示,与空白组相比,两种来源外泌体均可促进炎症组织来源牙周膜干细胞的增殖与细胞集落形成(P<0.05),并且健康外泌体组的作用强于炎症外泌体组(P<0.05);②碱性磷酸酶与茜素红染色显示,与空白组相比,两种来源外泌体均可促进炎症组织来源牙周膜干细胞碱性磷酸酶的表达与矿化结节形成,并且健康外泌体组的促进作用强于炎症外泌体组;RT-PCR与Western Blot检测显示,与空白组相比,两种来源外泌体均可促进炎症组织来源牙周膜干细胞碱性磷酸酶、RUNX2、Ⅰ型胶原mRNA与蛋白的表达(P<0.05),并且健康外泌体组的促进作用强于炎症外泌体组(P<0.05);③结果表明,人牙周膜干细胞分泌的外泌体能够促进炎症环境来源牙周膜干细胞的增殖及成骨分化能力,并且健康组织来源人牙周膜干细胞分泌外泌体的促进作用优于炎症组织来源人牙周膜干细胞分泌的外泌体。

关键词： 线上线下混合式教学   医学细胞生物学   MOOC   SPOC  

摘要： “医学细胞生物学”作为医学类相关专业的基础专业课程,在专业构成中具有重要地位。但由于课程自身的特点,传统教学往往难以达到理想的教学效果。随着“互联网+教育”的飞速发展,线上线下混合式教学成为目前高校备受青睐的一种新型教育模式。以医学细胞生物学为例,介绍了如何将MOOC和SPOC与翻转课堂教学相融合,实现线上线下结合、课内课外互补的混合教学模式,最终达到引导学生自主学习、提升教学质量的目的。

关键词： 细胞生物学   知识图谱   个性化学习   超星学习通   教学实践  

摘要： 知识图谱在医学教育领域的应用倍受关注。文章聚焦细胞生物学课程知识图谱的建设与实践,以细胞分化、细胞衰老章节为例,通过提炼章节知识点,优化教学设计,整合教材、多媒体视频、教学PPT、科研文献等多元教学资源,设计有效的测评方式,基于超星学习通完成细胞生物学知识图谱的构建,实现个性化学习路径。这有利于医学新生建立扎实的理论知识基础,为后续学习提供有力支撑,更好地满足中国特色社会主义建设对医学人才的培养要求。

关键词： 食管肿瘤   癌   鳞状细胞   细胞增殖   肿瘤侵润   SAPCD2  

摘要： 目的探讨SAPCD2在食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中的表达及其体外对ESCC细胞生物学功能的影响和可能的分子机制。方法利用基因表达谱交互分析(GEPIA)平台,分析癌症基因组图谱(TCGA)数据库和基因型-组织表达(GTEx)数据库中182例ESCC样本和286例正常食管组织样本SAPCD2转录水平表达情况。对ESCC患者临床组织芯片进行免疫组织化学(IHC)染色并进行染色评分,比较临床资料完整的61例癌组织及配对癌旁组织SAPCD2蛋白表达差异以及各临床病理特征分层中癌组织SAPCD2高表达患者分布。向ESCC细胞株KYSE-150中分别转染载有SAPCD2序列质粒和载有靶向SAPCD2的短发夹RNA序列的质粒,分别为SAPCD2过表达组和SAPCD2敲减组,并相应以转染空载质粒和转染载有阴性RNA序列质粒的细胞分别为过表达对照组和敲减对照组;CCK-8法(以吸光度值表示)和平板克隆形成实验检测细胞增殖能力,通过细胞划痕实验和Transwell细胞迁移实验检测细胞迁移能力;采用反转录-实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)法检测各组细胞SAPCD2及基质金属蛋白酶9(MMP9)、增殖细胞核抗原(PCNA)、波形蛋白(Vimentin)mRNA水平;采用蛋白质印迹法检测SAPCD2蛋白和与细胞增殖、侵袭、转移相关及与AKT信号通路相关蛋白的表达水平。结果通过GEPIA平台分析显示,ESCC组织SAPCD2转录水平表达量高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.01)。IHC染色显示,癌组织SAPCD2蛋白染色评分高于癌旁组织[(8.2±2.8)分比(2.2±1.7)分],癌组织中SAPCD2蛋白阳性(染色评分>0分)患者比例高于癌旁组织[95.1%(58/61)比57.4%(35/61)],差异均有统计学意义(均P<0.001),但在性别、年龄、肿瘤大小、病理分级、T分期、N分期、M分期分层间癌组织SAPCD2蛋白高表达(染色评分>3分)患者分布差异均无统计学意义(均P>0.05)。CCK-8法检测显示,SAPCD2过表达组KYSE-150细胞培养96 h吸光度值高于过表达对照组,SAPCD2敲减组培养72、96 h吸光度值均低于敲减对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。平板克隆形成实验显示,SAPCD2过表达组KYSE-150细胞培养14 d集落数多于过表达对照组[(800±30)个比(458±47)个],SAPCD2敲减组少于敲减对照组[(52±7)个比(81±2)个],差异均有统计学意义(均P<0.05)。细胞划痕实验显示,SAPCD2过表达组KYSE-150细胞培养24 h后划痕宽度较过表达对照组窄[(51±9)μm比(89±7)μm],而SAPCD2敲减组较敲减对照组宽[(120±22)μm比(37±10)μm],差异均有统计学意义(均P<0.01)。Transwell细胞迁移实验显示,SAPCD2过表达组KYSE-150细胞迁移数多于过表达对照组[(202±18)个比(50±14)个],SAPCD2敲减组少于敲减对照组[(227±27)个比(483±16)个],差异均有统计学意义(均P<0.01)。qPCR法检测显示,SAPCD2过表达组KYSE-150细胞MMP9、PCNA和Vimentin的mRNA相对表达量均高于过表达对照组,而SAPCD2敲减组三者均低于敲减对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。蛋白质印迹法检测显示,SAPCD2过表达组KYSE-150细胞PCNA和Vimentin蛋白相对表达量均高于过表达对照组,上皮型钙黏蛋白(E-cad)和裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(CASP3)蛋白相对表达量均低于过表达对照组,而SAPCD2敲减组则均相反,差异均有统计学意义(均P<0.05);SAPCD2过表达组磷酸化AKT(p-AKT)蛋白相对表达量高于过表达对照组,而SAPCD2敲减组低于敲减对照组,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论ESCC组织中SAPCD2在转录水平和蛋白水平均高表达。SAPCD2体外可促进ESCC细胞增殖和迁移,可能与AKT信号通路相关。

关键词： Smac   IAPs   半胱氨酸蛋白酶   细胞凋亡  

摘要： 第二个线粒体释放的半胱天冬蛋白酶激活剂(second mitochondria-derived activator of caspase,Smac)是一种从线粒体释放的促凋亡蛋白,定位于线粒体膜间隙中。研究发现Smac的线粒体定位信号肽被切除后,Smac会从线粒体释放进入胞浆,能够竞争性结合凋亡抑制蛋白(inhibitors of apoptosis proteins,IAPs)或者促进IAPs的泛素化降解,抑制IAPs的表达,解除IAPs对细胞凋亡酶(caspase)的抑制作用,从而诱导细胞凋亡级联反应的发生。该文总结并综述了Smac的生物学特性、Smac调控IAPs促进细胞凋亡发生的途径、Smac调控IAPs促进肿瘤细胞、T细胞及肌细胞凋亡研究进展的相关报道,并对Smac调控IAPs促进肿瘤细胞、T细胞和肌细胞凋亡的未来研究方向进行展望,可为肿瘤的靶向治疗和肌肉的嫩化理论提供新的见解。

关键词： 细胞生物学   混合式教学模式   课程思政  

摘要： “立德树人”是教育的核心目标,课程思政是落实“立德树人”的基本途径之一,对教育学生树立正确“三观”、坚定“四个自信”具有其他教育方式不可替代的优势。细胞生物学是生命科学的基础、核心、枢纽和前沿学科,课程含有丰富的“组织纪律性”、“合作性”、“奉献性”、“努力进取精神”和“家国情怀”等相关思政知识点。思政融入点多、引导功能强是该课程最大的特点,但知识点多难串联且抽象、线下课时少、教师思政知识点挖掘和融入教学能力不同这三个因素对课程思政目标达成度影响明显。教学实践显示,混合式教学模式通过“优势互补、弥补不足”克服了影响该课程思政教学目标达成的“三因素”,是提升思政质量的重要途径之一。该文从思政元素挖掘融入、思政实施过程、教学反馈等方面探索实践了课程思政的深化发展,以期使专业知识传授与“立德树人”相辅相成,并为提高课程思政教学质量提供参考。

关键词： 猪   circTEX9   肌内前体脂肪细胞   细胞增殖和分化   竞争性内源RNA  

摘要： 【目的】对猪circTEX9的生物学特性进行鉴定，并探讨猪circTEX9对猪肌内脂肪沉积的调控作用。【方法】以前期测序数据筛选到的circTEX9为研究对象，采用Sanger测序和亚细胞定位等方法，对其环状结构、稳定性和亚细胞定位等生物学特性进行全面鉴定和分析；同时过表达circTEX9探究其对猪肌内前体脂肪细胞增殖与分化的调控作用，并结合生物学信息方法预测其调控的下游靶基因及其参与的信号通路。【结果】猪circTEX9是由TEX9基因的7～10外显子构成的环状RNA分子，具有RNase R抗性，主要定位于细胞质中。circTEX9的二级结构稳定，且包含2个开放阅读框和2个内部核糖体进入位点，有翻译潜能。circTEX9显著抑制增殖标志基因（细胞周期蛋白依赖性激酶1基因、增殖细胞核抗原基因、细胞周期蛋白D1基因和细胞周期蛋白E1基因）的表达水平，且显著降低细胞活力，促进分化标志基因（过氧化物酶体增殖物激活受体γ基因、脂肪酸结合蛋白4基因、脂肪酸合酶基因和甾醇调节元件结合蛋白1基因）的表达水平。基于上述结果和生物信息学分析，预测circTEX9通过竞争性内源RNA（competing endogenous RNAs，ceRNA）网络吸附ssc-miR-204、ssc-miR-23a和ssc-miR-23b进而调控下游靶基因。这些靶基因通过参与单磷酸腺苷激活的蛋白激酶信号通路、钙信号通路和丝裂原活化蛋白激酶信号通路等发挥生物学功能，对猪肌内前体脂肪细胞产生影响。【结论】circTEX9在猪体内稳定性较高，具有抑制肌内前体脂肪细胞的增殖并促进脂质沉积的作用，可通过ceRNA网络发挥其生物学功能。

关键词： K   3.1   无细胞表达系统   表面活性肽   蛋白脂质体  

摘要： 目的 本研究旨在利用大肠杆菌无细胞表达系统实现有活性人源电压门控性钾离子通道KV3.1的高效表达，为KV3.1的药物筛选、结构和功能解析研究提供新的合成途径。方法 采用大肠杆菌无细胞表达系统，在表面活性肽辅助下进行KV3.1的可溶性表达，反应时间为10 h。利用圆二色光谱分析KV3.1的二级结构。通过应用可反应膜电位变化的荧光染料Oxonol VI作为指示剂研究了重组蛋白脂质体KV3.1-A6K的钾离子通道活性。结果 在大肠杆菌无细胞表达系统中，成功表达了可溶性KV3.1，且纯化后KV3.1的产量达到1.2 mg/mL。圆二色光谱分析显示KV3.1具有典型的α-螺旋二级结构。膜电位荧光染料法检测结果表明，利用表面活性肽A6K构建的重组蛋白脂质体KV3.1-A6K具有钾离子通过性。结论 本研究成功利用大肠杆菌无细胞表达系统实现了有活性人源KV3.1的高效表达。该方法不仅成功提高了KV3.1的表达产量，而且还具有活性，为KV3.1的药物筛选、结构和功能的解析研究提供了新的高效合成途径。

关键词： 千金子二萜醇   肾癌   不均一核糖核蛋白K   增殖   凋亡  

摘要： 探讨千金子二萜醇（lathyrol，Lat）通过调控不均一核糖核蛋白K（heterogeneous nuclear ribonucleoprotein K，hnRNP K）对肾癌Renca细胞增殖及凋亡的潜在作用机制。取对数期肾癌Renca细胞分为模型组（model，Mod）、Lat组和顺铂（cisplatin，DDP）组，并采用CCK-8法检测各组细胞在不同浓度药物下的增殖能力，通过筛选最佳浓度用于后续实验，进一步构建细胞和小鼠移植瘤模型，分组设置与细胞实验一致。利用Western blot检测各组肾癌Renca细胞及小鼠移植瘤中hnRNP K、Ki-67、B淋巴细胞瘤-2样蛋白（B-cell lymphoma-2，BCL-2）、BCL-2关联X蛋白（BCL-2-associated X protein，BAX）的表达；HE染色法观察移植瘤组织的形态学变化；免疫组化法检测移植瘤组织中增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen，PCNA）、半胱天冬酶-3（cysteinyl aspartate specific proteinase-3，Caspase-3）和Caspase-9的表达。利用TUNEL法检测移植瘤组织中细胞凋亡率。结果显示，与Mod相比，Lat与DDP显著下调了肾癌Renca细胞及小鼠移植瘤组织中hnRNP K、Ki-67、PCNA和BCL-2的表达（P < 0.05），上调了BAX、Caspase-3和Caspase-9的表达（P < 0.05）。Lat组移植瘤中的肿瘤细胞增殖受到抑制，出现核固缩、核碎裂等凋亡特征，并且TUNEL阳性细胞比例显著增加（P < 0.001）。研究表明，Lat可能通过抑制hnRNP K的表达抑制肾癌Renca细胞的增殖并促进凋亡。

关键词： 水产养殖专业   细胞生物学   课程思政   教学改革   复合型人才  

摘要： 细胞生物学在水产养殖专业中具有极其重要的地位,它不仅是理解水产动物生命活动的基础,也是推动水产养殖技术创新和发展的重要动力.文章聚焦于水产养殖专业的细胞生物学课程在高等教育体系中的课程思政教学改革实践,通过深入挖掘该门课程中的思政元素,创新教学方法,实现专业知识传授与价值引导的有机统一,为培育具备深厚专业素养、高尚道德情操及强烈社会责任感的复合型人才提供理论支撑与实践路径.