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关键词： 单酰基甘油脂肪酶抑制药   胃癌细胞   侵袭   迁移   磷脂肌醇3-激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶信号通路  

摘要： 目的 探究单酰基甘油脂肪酶（MAGL）抑制药对胃癌细胞侵袭、迁移及磷脂酰肌醇3激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶（PI3K/AKT）信号通路的影响。方法 体外培养人胃癌细胞系MKN-45,分为空白组和低、中、高剂量实验组。空白组给予正常DMEM培养基培养，不作任何处理；低、中、高剂量实验组分别用含1,10和20μmol·L-1MAGL抑制药的DMEM培养基进行培养。用噻唑蓝法、划痕实验、Transwell实验分别检测细胞增殖、迁移、侵袭能力，用蛋白质印迹法检测PI3K/AKT信号通路蛋白的表达情况。结果 中、高剂量实验组和空白组的细胞抑制率分别为（9.12±0.48）%,（23.78±0.65）%和0.00%,侵袭细胞数分别为（221.64±28.66）,（118.58±18.75）和（308.21±36.36）个，划痕愈合率分别为（18.36±2.88）%,（11.03±1.72）%和（27.05±4.10）%,PI3K蛋白相对表达水平分别为0.64±0.05,0.48±0.07和1.18±0.08,p-AKT蛋白相对表达水平分别为0.74±0.06,0.45±0.09和0.97±0.07。中、高剂量实验组的上述指标与空白组比较，差异均有统计学意义（均P<0.05）。结论 MAGL抑制药可能通过调控PI3K/AKT信号通路，抑制胃癌MKN-45细胞增殖、侵袭及转移。

关键词： miR-485-5p   MFGE8   膀胱癌  

摘要： 背景和目的:膀胱癌(Bladder cancer,BC)是泌尿系统最常见恶性肿瘤之一,近年来发病率逐渐升高。虽然初诊患者中约75%为非肌层浸润性尿路上皮癌,但因其具有高复发特点,且随着膀胱癌的复发,恶性程度逐渐进展。当前膀胱癌综合治疗取得了一定疗效,但对于浸润性、高级别、分期晚的膀胱癌患者预后仍较差,肿瘤特异性死亡率仍较高。目前认为肿瘤相关基因的研究对于肿瘤的诊治非常重要,大部分肿瘤已经有靶向药物用于临床,但膀胱癌目前仍没有非常合适的靶向药物。故对膀胱癌基因靶点的研究亟待加强。目前在恶性肿瘤的研究中,肿瘤的发生被认为与多种基因的异常表达密切相关,抑癌基因和促癌基因在肿瘤的发展中扮演着重要的角色,对肿瘤相关基因的研究已逐渐成为肿瘤治疗领域的前沿。Micro RNA是一种长约22个核苷酸的短链非编码RNA分子,可与信使RNA的3'非翻译区互补结合,通过靶向调节m RNA的翻译和降解来调控基因表达,发挥着抑癌基因或促癌基因的作用。研究显示,miR-485-5p参与多种肿瘤细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭,与肿瘤的发生发展密切相关,并证实其在肿瘤中低表达,发挥抑癌基因作用。但是,miR-485-5p在卡波西肉瘤患者血清和卡波西肉瘤相关疱疹病毒感染细胞中表达升高,对细胞的增殖、迁移等起促进作用。可见miR-485-5p在不同肿瘤中的表达不同,发挥作用不同。目前,miR-485-5p在膀胱癌中的作用及分子机制不明确。研究表明,MFGE8可以增强巨噬细胞对凋亡细胞的吞噬和清除。MFGE8是否是miR-485-5p的靶基因,是否影响膀胱癌发生、发展,目前暂不明确。本课题研究miR-485-5p对膀胱癌增殖、迁移等生物学行为的影响,证实MFGE8作为miR-485-5p的靶基因之一参与膀胱癌的发生、发展,并阐述其分子机制。方法:1.通过qRT-PCR检测16对膀胱癌及癌旁组织中miR-485-5p的表达水平。2.通过qRT-PCR检测膀胱癌细胞(T24、EJ、J82、5637、UMUC-3)及膀胱上皮永生细胞(SV-HUC-1)中miR-485-5p表达水平,并选取miR-485-5p表达最低的2个膀胱癌细胞系(T24、EJ)进行过表达、选择表达相对较高的2个膀胱癌细胞系(5637、UMUC-3)进行抑制表达以开展后续实验。3.过表达和敲减膀胱癌细胞中miR-485-5p,并检测miR-485-5p表达情况。利用CCK-8实验观察细胞的生长曲线,通过平板克隆实验检测细胞集落形成能力,Transwell迁移实验检测细胞的迁移能力,并通过Western Blot实验检测与细胞凋亡相关蛋白的表达。4.通过miRBase、Target Scan和miRanda数据库筛选miR-485-5p潜在的靶基因:MFGE8。双荧光素酶实验验证miR-485-5p与MFGE8的靶向关系。过表达和敲减膀胱癌细胞miR-485-5p,WB实验检测MFGE8蛋白水平变化。5.T24及EJ转染MFGE8过表达质粒,5637及UMUC-3转染siMFGE8,WB实验检测MFGE8蛋白水平变化。***-485-5p与MFGE8共转染实验:CCK-8实验观察细胞的生长曲线,通过平板克隆实验检测细胞集落形成能力,Transwell细胞迁移实验来观察细胞的迁移能力,并通过WB实验检测与细胞凋亡相关蛋白的表达。结果:1.完成16对膀胱癌与癌旁组织miR-485-5p的qRT-PCR检测,发现miR-485-5p在膀胱癌中较相对应的癌旁组织表达明显降低。***-485-5p在膀胱癌细胞系(5637、UMUC-3、J82、EJ、T24)中表达较正常膀胱上皮细胞系(SV-HUC-1)明显降低。3.T24及EJ膀胱癌细胞转染miR-485-5p mimic,膀胱癌细胞miR-485-5p表达量明显升高,进行功能实验发现膀胱癌细胞增殖、迁移能力减弱;5637及U MUC-3膀胱癌细胞转染miR-485-5p inhibitor,miR-485-5p表达明显下降,进行功能实验发现膀胱癌细胞增殖、迁移能力增强。进行WB实验发现转染miR-485-5p mimic的细胞Bcl2蛋白表达降低,Bax蛋白表达升高;转染miR-485-5p inhi bitor的细胞Bcl2蛋白表达升高,Bax蛋白表达降低。4.双荧光素酶实验验证了miR-485-5p与MFGE8的靶向关系,T24及EJ膀胱癌细胞转染miR-485-5p mimic,WB检测MFGE8蛋白水平降低,5637及UMUC-3膀胱癌细胞转染miR-485-5p inhibitor,WB实验检测MFGE8蛋白水平升高。5.T24及EJ细胞转染MFGE8过表达质粒,Western Blot检测MFGE8蛋白水平升高,5637及UMUC-3转染M

关键词： Musculin   骨髓来源树突状细胞   生物学功能   冲击伤  

摘要： 在近年来的局部战争和恐怖袭击中,爆炸冲击伤始终是最常见的致伤类型之一。冲击伤是冲击波的超压和负压引起的损伤,主要造成含气器官如肺、听器和胃肠道的损害。随着新一代高爆炸力武器的逐步升级和各种爆炸性武器的大量使用,短时间内会产生大量不同伤情的冲击伤伤员,从而给战创伤救治提出了更严峻的挑战。开展冲击伤防治研究,对于减少作战人员伤亡,有效控制并发症发生,提升临床救治效能具有重要的军事医学价值。过度炎症反应和免疫功能紊乱是严重战创伤并发症发生过程中的重要事件,既是引起组织和器官损伤的前提,也是导致严重战创伤患者死亡和不良预后的重要原因。迄今为止,针对免疫细胞开展的免疫治疗和调理仍是临床上治疗严重战创伤并发症的有效手段之一。然而,目前针对其功能调控因素的研究仍很有限,尤其是充当机体免疫反应源头、在固有免疫和适应性免疫中发挥“桥梁”作用的树突状细胞(dendritic cell,DC)。因此,系统挖掘调控机体免疫细胞的关键分子,探讨其在严重战创伤介导免疫紊乱中的分子机制,将有效延缓甚至阻止严重战创伤并发症的发生和转归,为免疫细胞治疗严重创伤并发症的完善和优化提供新策略。 DC广泛分布于上皮组织及除脑以外的实质性脏器的间质,是体内最强的抗原递呈细胞(antigen presenting cell,APC)。作为免疫反应的启动者,DC在免疫激活和免疫耐受免疫诱导中具有独特的地位。研究表明,严重创伤后DC发生失能,直接影响辅助性T细胞(help T cell,Th)分化结局,是引发机体免疫失衡,进而导致严重创伤并发症的重要原因。因此,内源性和外源性干预正逐渐成为DC救治严重创伤的有效手段,这更加凸显了发掘调控DC生物学功能关键因子的重要性和紧迫性。 Musculin是一种高度保守的碱性螺旋-环-螺旋结构的新型转录因子,可与多种蛋白相互作用。最初对Musculin功能的研究多局限在哺乳动物骨骼肌发生、组织发育、分化和再生领域。后续研究发现,Musculin在脾、胸腺和淋巴结等免疫器官和B细胞中也有表达,并参与调控T细胞亚群的分化。本团队前期研究结果也显示,Musculin不但直接介导炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)中的组织损伤和炎症反应,还参与天然淋巴细胞(innate lymphoid cell,ILC)亚群的功能调控。上述研究表明,Musculin对免疫细胞生物学功能的调控正日益受到关注和确认。然而,目前尚未见Musculin调控DC生物学功能的研究报道。 基于BMDC获取方法成熟,得率高,能够替代因严重创伤而遭破坏DC的特点,本研究选择BMDC为目的细胞,以C57BL/6野生型(wildtype,WT,+/+)和Musculin敲除(knockout,KO,-/-)小鼠为实验动物,通过体内、外研究模式,采用实验动物学、病理学、免疫学、分子和细胞生物学等实验技术,阐明Musculin对BMDC生物学功能的调控特点以及在严重冲击伤预后中的作用规律,为发掘改善严重创伤并发症病理进程的关键分子和新策略提供理论基础和新思路。 本研究结果表明,在BMDC体外诱导过程中,Musculin对BMDC增殖分化中的形态和表型没有明显作用,但能够增强共刺激、共抑制和MHC分子的表达,减弱促异源淋巴细胞增殖能力,并抑制BMDC分泌炎性因子的水平,提示Musculin参与了对BMDC生物学功能特别是抗原递呈和炎症反应的调控。同时,以小鼠生存率为标准,选择不同驱动段压强进行小鼠冲击致伤实验,确定小鼠发生严重冲击伤的驱动段压强为5.4兆帕(megapascals,MPa)。以上述选择的驱动段压强制备小鼠严重冲击伤模型,探讨严重冲击伤后Musculin对BMDC生物学特征的影响,并通过尾静脉输注方式将WT和Musculin-/-小鼠BMDC过继转移入严重冲击伤Musculin-/-小鼠体内,观察严重冲击伤后小鼠生存率、重要脏器功能及靶器官肺功能损伤,分析Musculin缺失的BMDC输入能否影响严重冲击伤后机体的免疫学功能及小鼠预后。结果证明,严重冲击伤后,Musculin对BMDC生物学调控作用主要表现在降低其表面分子表达,减弱促异源淋巴细胞增殖和细胞因子分泌能力,并随着时间的推移,这种差异更显著。同时,Musculin能够改善严重冲击伤后小鼠机体预后,主要表现在能够降低小鼠严重冲击伤死亡率,减轻其肺部损伤和炎症水平以及对小鼠心脏、肝脏和肾脏等重要脏器的保护。 本研究揭示了Musculin对BMDC生物学功能的调控作用,进一步拓展和深化了Musculin和免疫细胞关系研究,为后续Musculin调控机体免疫功能和炎症反应的分子机制探索及免疫细胞治疗干预的医学实践奠定基础。同时,建立可复制的小鼠严重冲击伤模型,探讨Musc

关键词： 凝血因子Ⅱ   肝癌   增殖   迁移   侵袭  

摘要： 目的 本研究以肝癌细胞为研究对象，探索凝血因子Ⅱ（简称F2）对肝癌细胞系的增殖、迁移、侵袭以及凋亡等生物学行为的影响，寻找新的肝癌预后标志物，为肝癌治疗提供潜在靶点。方法 利用ICGC数据库验证F2在肝癌中的表达水平及其与预后的关系。通过重组慢病毒载体构建稳定过表达和稳定敲低的肝癌细胞株，后通过CCK-8实验、平板克隆实验、划痕实验、Transwell细胞侵袭实验、流式细胞术、免疫印迹实验检测F2对肝癌细胞的增殖、迁移、侵袭和凋亡能力的影响。最后利用生物学信息方法进行通路富集分析。结果 F2在肝癌组织中表达下调（P<0.001），且与患者总生存时间更短有关（P<0.01）。CCK-8、平板克隆实验结果显示，F2对肝癌细胞的增殖起抑制作用（P<0.05）；划痕实验、Transwell细胞侵袭实验结果显示，F2对肝癌细胞的迁移和侵袭起抑制作用（P<0.05）；流式细胞术和免疫印迹结果显示，F2诱导肝癌细胞凋亡（P<0.05）。F2的潜在相关基因主要参与胆固醇代谢、PPAR信号通路、凝血等过程。结论F2对肝癌细胞的增殖、迁移、侵袭有一定的抑制作用，并诱导肝癌细胞凋亡，其可能在肝癌的发生发展中起抑制作用。

关键词： 子宫内膜癌   YTHDF1   预后   卡铂耐药性   ERBB   DNA损伤   细胞增殖  

摘要： 第一部分YTHDF1在子宫内膜癌中的表达及对预后的意义　　目的：通过生物信息学分析探究潜在影响子宫内膜癌预后的基因，并建立预后模型，为临床子宫内膜癌的治疗提供理论依据。　　方法：通过TCGA（TheCancerGenomeAtlas）公共数据库获取子宫内膜癌转录组和预后相关数据（共包括406例子宫内膜癌和19例正常组织），通过筛选差异表达的基因，以热图及小提琴图表示;单因素回归分析评估差异表达基因与子宫内膜癌预后的相关性;Wilcoxon检验比较差异表达基因与病理组织学分级的相关性;GO和GSEA富集预测其生物学功能，COX模型计算每个样本风险分数，Kaplan-Meier曲线比较预后的差异性。并在48例子宫内膜癌和癌旁组织芯片（上海威奥生物科技有限公司，编号ZL-UteS961）中进一步验证差异表达的关键基因。　　结果：通过比较TCGA公共数据库发现：YTHDC1,YTHDC2,YTHDF1,YTHDF2,YTHDF3,HNRNPC,FMR1,LRPPRC,HNRNPA2B1,IGFBP1,IGFBP2,IGFBP3,RBMX,METTL3,METTL14,METTL16,WTAP,KIAA1429,ZC3H13,RBM15,RBM15B,FTO和ALKBH5基因在子宫内膜癌和正常组织中存在差异表达。单因素回归发现YTHDF1,FTO和RBMX是潜在影响子宫内膜癌预后的重要基因。配对样本比较发现YTHDF1和FTO在子宫内膜癌和正常组织中存在差异表达;YTHDF1和RBMX的表达水平和组织学分级密切相关，因此选择YTHDF1作为后续研究的基因。GO和GSEA富集分析发现YTHDF1在细胞周期（NES=2.42，Plt;0.001）、内吞作用（NES=2.28，Plt;0.001）、泛素介导的蛋白水解（NES=2.51，Plt;0.001）和ERBB信号通路（NES=2.40，Plt;0.001）中富集。共表达分析发现YTHDF1和ERBB2表达相关（R=0.11,p=2.8e-6）。在预后模型中发现YTHDF1高表达的患者预后更差，并且发现该预后模型是子宫内膜癌预后的独立危险因素。在48例子宫内膜癌和癌旁组织芯片也同样发现YTHDF1在子宫内膜癌中高表达。　　结论：通过TCGA公共数据库筛选YTHDF1作为预测子宫内膜癌的预后基因;并建立预后模型，且能够较好的预测子宫内膜癌的预后。　　第二部分抑制YTHDF1对子宫内膜癌细胞周期、增殖、凋亡和卡铂耐药性的作用　　目的：探究抑制YTHDF1对子宫内膜癌细胞周期、增殖、凋亡和卡铂耐药性的作用。　　方法：首先通过siRNA沉默人子宫内膜癌细胞（HEC-1-B和KLE）YTHDF1的表达，比较抑制YTHDF1表达对HEC-1-B和KLE细胞周期、增殖、克隆和凋亡的影响。之后分别比较抑制YTHDF1、卡铂以及两者联合使用对HEC-1-B和KLE细胞的杀伤和DNA损伤的作用。最后通过HEC-1-B细胞YTHDF1低表达稳转细胞株构建荷瘤小鼠模型，比较抑制YTHDF1和卡铂对子宫内膜癌肿瘤生长的影响。　　结果：1.使用siRNA沉默HEC-1-B和KLE细胞YTHDF1显著下调S期细胞比例，上调G0/G1期细胞比例，抑制细胞增殖、克隆，促进凋亡;2.卡铂和抑制YTHDF1均能对HEC-1-B和KLE细胞起到杀伤作用、抑制细胞克隆和增加γ-H2AX斑点的形成，下调RAD51和BRCA1蛋白水平。并且卡铂联合抑制YTHDF1能够进一步促进细胞杀伤、抑制细胞克隆和增加γ-H2AX斑点的形成。3.荷瘤小鼠实验发现：相比HEC-1-B-shNC组，HEC-1-B-shYTHDF1、HEC-1-B-shNC+CBP组和HEC-1-B-shYTHDF1+CBP组小鼠的肿瘤体积明显减小，Ki-67的表达降低，caspase-3的表达升高。　　结论：抑制YTHDF1能够抑制子宫内膜癌细胞周期、增殖、克隆，促进凋亡;同时，抑制YTHDF1后子宫内膜癌细胞对卡铂耐药性明显减弱，有希望为治疗子宫内膜癌提供新的干预策略。　　第三部分YTHDF1通过ERBB通路调控子宫内膜癌细胞周期、增殖和卡铂耐药性　　目的：YTHDF1与子宫内膜癌细胞的细胞增殖、周期和卡铂耐药性密切相关，探讨YTHDF1下游机制能够更好的了解子宫内膜癌进展和耐药的机制。　　方法：通过慢病毒表达载体构建HEC-1-B和KLE低表达YTHDF1稳转细胞系，检测抑制YTHDF1对HEC-1-B和KLE中ERBB信号通路相关蛋白的影响。HER-2抑制剂与卡铂对HEC-1-B和KLE细胞活力的影响。比较HER-2抑制剂对抑制YTHDF1后的HEC-1-B和KLE细胞周期、增殖、卡铂耐药性以及ERBB信号通路的影响。之后比较HER-2激动剂对抑制YTHDF1

关键词： 静电纺丝   多孔钛   PRP   骨缺血坏死   药物缓释系统  

摘要： 背景:骨缺血坏死是由于各种病因使骨组织周围血液供应不足进而导致骨组织坏死从而出现骨组织塌陷或裂痕。临床上常见于股骨头,距骨及手腕舟骨,其中股骨头缺血性坏死在临床中最为常见。各种因素使骨组织周围血运受损或形成微血栓使骨组织周围血运减少进而导致骨坏死。静电纺丝可以将治疗股骨头坏死的药物或某些蛋白掺入纳米级粗细的纤维中,并且可以通过改变纳米纤维的参数和性质来提高药物在体内的稳定性和释放速率。我们将当前热门的静电纺微纳米载药系统作为基础,将其与多孔的钛金属棒相结合,研发出一种可以局部、长效、可控的释放药物的生物型支架。并对支架促进血管再生及其生物性能进行研究。 方法:将PRP(platelet rich plasma)与静电纺丝技术结合形成纳米载药系统再与多孔钛棒支架相结合。测试了纳米载药系统对于促进细胞体外生长、生长因子体外释放曲线的效果。 结果:本研究报告了一种用静电纺丝技术处理PRP并与钛棒支架结合的有效的方法的开发,以用于潜在的组织工程应用。通过将活化的PRP在多孔钛棒支架表面进行静电纺丝,得到适合于负载PRP而且缓慢释放的载体。静电纺丝PRP涂层显著改善了钛支架上的生物特性、增加间充质干细胞附着和增殖。此外,静电纺丝PRP-钛棒支架显示出能够维持例如PDGF(platelet-derived growth factor)、TGF(ransforming growth factor)的释放。本研究的结果证明了静电纺丝PRP-钛支架通过药物缓慢释放促进细胞附着、增殖以及释放生长因子。 结论:本研究运用静电纺丝技术构建了搭载PRP的纳米结构的药物缓释系统并与多孔钛假体相结合,检测了其支架纳米结构及性能、促进体外细胞生长以及体外药物释放曲线等效果。多孔钛棒的微孔结构使其具有更大的载药量,而静电纺丝纤维与多孔结构的结合则可以实现药物的缓释。静电纺丝结合多孔钛可能是一种在较长时间内实现局部缓释PRP的策略。但是此系统在药物的缓释浓度等方面仍然有很大的研究空间,真正用于批量生产以及临床应用仍需要进一步的研究。

关键词： 生物人工肾   脱细胞外基质   肾皮质近曲小管上皮细胞   细胞转运   无血清培养  

摘要： 慢性肾脏病(CKD)会导致肾功能不全并发展为终末期肾病(ESKD)和心血管疾病,是全球第16大早期死亡原因,预计到2040年将上升到第5位。血液透析是治疗CKD的主要方式,但透析只能在一定程度上替代肾脏的功能,长期血液透析使患者的死亡率高达15%-20%,血液透析替代疗法是相关研究领域的重要发展方向。生物人工肾(BAK)将传统的血液过滤器与含有肾近端小管上皮细胞的生物反应器单元串联在一起,上皮细胞的生物转运功能够极大地提高血透患者的生存率,但解决肾小管上皮细胞在生物反应器上的结合及获得相应功能是BAK开发成功的关键。本研究围绕上述关键问题,研究并比较了肾小管上皮细胞在不同类型的脱细胞外基质(d ECM)上的粘附、增殖、分化及细胞转运功能;同时,基于优选的d ECM,研究并比较了不同特性的无血清培养体系;此外,还研究了基于现有透析器中空纤维膜表面修饰的改性技术方法,开发设计了未来可用于BAK细胞负载的细胞循环接种装置,相关研究内容将有助于BAK的研发。具体研究内容如下:论文尝试了冻融循环法、SDS法、EDTA法、Triton X-100法4种脱细胞外基质方法,综合DNA残留量和d ECM余留率,冻融循环法效果最佳。所以采用冻融循环法对HK-2、小鼠上皮样成纤维细胞(L929)和小鼠骨髓间充质干细胞(m BMSCs)进行脱细胞处理,保留了细胞外基质主要的多糖成分和蛋白,维持ECM结构。系统研究了不同细胞来源的脱细胞外基质对HK-2细胞的增殖和功能表达的影响,研究结果显示HK-2细胞在d ECM有更好的增殖能力,培养7天后细胞汇合,细胞铺展面积高于对照组,粘附基因(FAK和Integrin-β1)表达水平升高;HK-2-ECM和m BMSCs-ECM显著上调SGLT2的表达,L929-ECM和m BMSCs-ECM则显著上调Na-K ATPase的表达;对于有机阴离子、葡萄糖和蛋白质的运输,d ECM组的转运功能都强于对照组,且HK-2表达出更好的碱性磷酸酶、γ-谷氨酰转移酶活性。本论文建立了HK-2细胞无血清培养体系,在HK-2的粘附、增殖方面,该无血清培养体系和血清培养相比不存在统计学差异,无血清培养也不会降低HK-2转运功能。同样使用冻融循环法对无血清培养的HK-2细胞进行脱细胞处理,无血清培养时HK-2细胞在d ECM增殖更强,形成单层细胞汇合;SFM1-ECM和SFM2-ECM上调HK-2的FAK、Integrin-β1、SGLT2、Na-K ATPase的表达,粘附和转运功能提高;对于有机阴离子、葡萄糖和蛋白质的运输,d ECM组的转运效率都高于对照组,表达出更好的碱性磷酸酶、γ-谷氨酰转移酶活性,证明无血清时d ECM可以维持HK-2的分化表型。此外,本论文研究了聚醚砜中空纤维膜改性对HK-2细胞的增殖和功能表达的影响,改性膜HF-PDA和HF-PDA-Gel MA增加了亲水性和细胞粘附位点,显著促进细胞的粘附、增殖和转运功能表达。制备了d ECM/Gel MA水凝胶,将该水凝胶替代Gel MA,有望发挥脱细胞外基质对HK-2功能表达的提高作用。这些研究有望为生物人工肾细胞单元的建立做出贡献。

摘要： 随着医学教育的改革和发展，如何培养医学生的基础学科核心素养已成为医学教育需要探讨的问题。医学细胞生物学是医学专业中的重要基础学科之一，其核心素养涉及基础学科知识和实践技能等多个方面。本文以医学细胞生物学为例，针对医学专业背景的学生，如何培养其基础学科的核心素养，提出了以下几点建议：一是，加强基础学科教育，提高医学生的细胞生物学知识和实践技能；二是，注重医学生综合素质的培养，培养学生的创新思维和团队合作能力；三是，加强实践教学，让学生在实践中掌握医学细胞生物学知识和技能。通过以上建议，可以有效提高医学专业学生的基础学科核心素养，为医学教育的发展和进步做出贡献。

关键词： 翼状胬肉   成纤维细胞   SOX4   松果菊苷  

摘要： 目的:探讨性别决定基因-相关蛋白结构域4(sex determining region Y-related(SRY)-type high mobility group(HMG)-box4,SOX4)抑制剂松果菊苷(EA)对翼状胬肉成纤维细胞(HPFs)生物学特性的影响,为治疗翼状胬肉以及防止术后复发提供新的思路。方法:1.通过原代培养获得HPFs及结膜成纤维细胞(NFs),观察细胞生长及形态并用细胞免疫染色法对其进行鉴定。2.通过CCK-8、细胞划痕实验、Transwell侵袭实验检测HPFs及NFs的增殖、迁移及侵袭能力。3.通过RT-pcr、WB检测HPFs及NFs中SOX4 RNA及蛋白的表达情况。4.通过CCK-8实验检测不同浓度及时间的EA对HPFs增殖能力的影响。5.选择适宜浓度的EA处理HPFs,检测EA处理组与未处理组之间SOX4RNA及蛋白表达情况的改变及细胞增殖、迁移及侵袭能力的变化情况。结果:***与NFs在细胞增殖、迁移及侵袭能力上均存在明显差异,且SOX4在HPFs中的表达显著高于NFs。***可以下调HPFs中SOX4的表达,并以剂量、时间依赖性的方式抑制HPFs的增殖、迁移及侵袭能力。