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关键词： 分子细胞生物学   植物原生质体   质壁分离   亚细胞定位   植物细胞   瞬时表达体系   全能性   细胞壁再生  

摘要： 植物原生质体以之全能性的优势被广泛运用于分子细胞生物学研究中,包括亚细胞定位检测、融合培育、瞬时表达体系建立、植物病毒粒体形态特征检测中的运用。本文将对植物原生质体在分子细胞生物学研究中的应用以及优势与缺陷进行综述。引言原生质体最早在1880年被提出,植物原生质体是指通过酶解或机械法的作用将植物细胞进行质壁分离后获得的细胞质。植物原生质体具有全套的遗传物质,具有细胞壁再生并能进行人工培养分化发育成完整植株的能力。植物原生质体由于取出了细胞壁,通过采用外源添加物以及外源基因的处理后,能够快速产生反应、代谢以及反馈,被广泛运用于植物分子细胞生物学研究中,能够提高实验效率,并获得有效的体内实验相关数据。

关键词： 课程思政   细胞生物学   专业课程   思政元素挖掘  

摘要： 立德树人是高校教学的关键所在。如何在知识传授过程中进行育人是教师不断努力奋斗的目标。细胞生物学作为生 命科学类的骨干课程，蕴含着丰富的思政元素，有效地挖掘并自然融入教学过程，真正起到润物无声的效果十分必 要。这对学生世界观、人生观、价值观的养成以及科研思维能力、创新能力、批判思维的培养均具有重要意义。

关键词： 创新创业能力   混合式教学模式   细胞生物学   虚拟仿真  

摘要： 建立细胞生物学实验线上线下教学模式,须以创新创业实践能力培养为导向,以慕课、微课、虚拟仿真实验、大学生创新课题和竞赛、教师科研项目、企业项目等教学形式为载体,引入混合式实验教学模式,完善多元化的实验评价体系。这种教学模式对学生创新创业热情的激发和创新创业能力的培养具有积极作用。

关键词： 胰腺癌   长链非编码RNA   上皮-间充质转化   增殖   侵袭   迁移  

摘要： 目的探究Lnc01137对胰腺癌细胞生物学特性的影响。方法收集2021年6月至2021年9月贵州医科大学肝胆外科34例人胰腺癌组织及癌旁组织样本。通过实时定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Lnc01137在胰腺癌细胞系中和胰腺癌组织中的表达水平。在肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库中提取胰腺癌组织与癌旁组织中Lnc01137的表达量,提取胰腺癌患者总生存月数和无病生存月数并进行分析。RT-qPCR检测Lnc01137在细胞核和细胞质中的相对表达,并进行RNA荧光原位杂交(FISH)定位。通过慢病毒转染在胰腺癌细胞中敲低Lnc01137的表达,检测上皮-间充质转化(EMT)相关蛋白的表达。采用通路富集分析(GSEA)在京都基因与基因组百科全书(KEGG)中进行基因富集分析,组间比较采用t检验,组内两两比较采用LSD-t检验。结果Lnc01137在胰腺癌细胞系MIA PaCa-2和PANC-1中表达较高,在胰腺癌组织中的表达明显高于胰腺癌癌旁组织,并在细胞质中呈现高表达状态,另外Lnc01137高表达与患者预后不良相关。功能试验显示敲低Lnc01137显著抑制胰腺癌细胞增殖功能。细胞计数试剂盒(CCK-8)实验显示在吸光度为450 mm,第96小时,siLnc01137-1组与siLnc01137-2组吸光度低于NC组(0.586±0.049、t=11.890,0.281±0.029、t=9.602,P<0.01;0.850±0.125、t=6.811,0.442±0.0.70、t=6.304,P<0.01)差异有统计学意义。划痕实验、Transwell实验显示敲低Lnc01137显著抑制胰腺癌细胞迁移和侵袭功能。蛋白质印迹法(Western blot)实验显示敲低Lnc01137能明显降低胰腺癌细胞EMT相关蛋白的表达。划痕实验显示在48 h时,siLnc01137-1组与siLnc01137-2组的愈合率相比NC组降低(0.696±0.057、t=12.190,0.383±0.064、t=5.987,0.390±0.035、t=11.230,0.207±0.038、t=5.429,P<0.01),差异有统计学意义。Transwell实验中迁移实验结果显示siLnc01137-1组与siLnc01137-2组单位视野穿过细胞数低于NC组[(645.300±21.330)个、t=30.260,(409.700±26.920)个、t=15.220,(580.000±24.790)个、t=23.400,(269.700±14.240)个、t=18.940,P<0.01],差异有统计学意义;侵袭实验显示siLnc01137-1组与siLnc01137-2组单位视野穿过细胞数低于NC组[(193.700±24.890)个、t=7.781,(394.700±18.210)个、t=21.670,(330.000±9.775)个、t=33.760,(151.700±26.060)个、t=5.820,P<0.01],差异有统计学意义。GSEA分析结果显示Lnc01137在JAK-STAT、MAPK、MTOR、P53通路显著富集。错误发现率(FDR)为<0.25和标准化P<0.05的基因集被认为是显著的。结论Lnc01137对胰腺癌细胞生物学性状有显著影响,敲低Lnc01137的表达显著抑制胰腺癌细胞增殖、侵袭、转移的功能和EMT相关蛋白的表达。

关键词： 细胞生物学   智慧教学   混合式教学  

摘要： 细胞生物学作为生物学专业的核心课程,在生命科学知识体系的建构中具有重要作用。本课程组基于细胞生物学课程特点,构建了基于SPOC平台的混合式教学模式,开展了线上线下混合式教学的改革。文章从细胞生物学混合式教学模式的构建,实施和评价等方面对混合式智慧教学模式进行初步的探究。

关键词： BOPPPS   医学细胞生物学   教学改革   雨课堂  

摘要： 目的：本文探讨BOPPPS教学模式在医学细胞生物学中的应用。方法：选取塔里木大学医学院临床医学专业2021级 和2022级各一个班，对照组采取传统教育模式，实验组采取BOPPPS教学模式，实验组以知识点为单元按照引入 bridge-in （B），目标objective （O），前测pre-assessment （P），参与式学习participatory learning （P），后测postassessment （P），和总结summary （S）的步骤进行教学设计，通过阶段性测试成绩比较教学效果。结果：实验组成 绩好于对照组。结论：BOPPPS教学法有助于提高学生学习的参与度和主动性，有助于培养高质量的医学人才。

关键词： 医学   细胞生物学   医学院校   教材  

ISBN: (纸本)9787030734099

摘要： 本书共分为16章，其中包括绪论、细胞的概念和分子基础、医学细胞生物学研究方法、细胞膜、细胞连接与细胞外基质、细胞内膜系统及囊泡转运、线粒体、细胞骨架、细胞核、基因概述、细胞生长增殖与细胞周期、细胞信号转导、细胞分化、细胞衰老与死亡、干细胞、细胞工程。

关键词： 结直肠癌   循环肿瘤细胞   甲基化   miR-486-5p   miR-34c-5p  

摘要： 第一部分结直肠癌循环肿瘤细胞（CTC）分选捕获系统的建立目的:构建针对结直肠癌CTC的多功能高效纳米免疫脂质磁球,用于结直肠癌CTC的分选捕获及数量统计。方法:通过反向蒸发法制备Ep CAM（Ep CAM Magnetic liposome,EP-IML）和EGFR免疫脂质磁球（EGFR Magnetic liposome,EG-IML）,采用粒径电位分析仪、蛋白电泳仪、原子力显微镜、紫外分光光度仪、磁性能分析仪和X射线衍射仪等对构建的免疫脂质磁球系统进行分子结构和性能的表征,初步建立一套针对结直肠癌CTC分选捕获系统。结果:成功制备了EP-IML和EG-IML两种免疫脂质磁球;粒径分别为227.8±5.6 nm和200.8±7.2 nm,电位分别为30.3±2.7 m V和32.5±3.7 m V,免疫磁球在水溶液中分散均匀稳定（分布分散且不团聚）。此系统磁球表面抗体纯度较高,饱和磁化强度分别为26.7和49.2 Am2/Kg,具备Fe3O4磁性颗粒的结晶性能。结直肠癌细胞毒性实验结果显示该磁球系统细胞毒性较低,生物相容性好,能达到临床使用要求。结论:完成结直肠癌CTC的多功能高效纳米免疫脂质磁球的制备,并完成对其功能特性的表征,可用于结直肠癌CTC的分选捕获及数量鉴定。第二部分结直肠癌CTC分选捕获系统的精准和稳定性研究目的:开展循环肿瘤細胞高效磁分选捕获系统相关结直肠癌辅助诊断功能验证;并进行功能优化。方法:对建立的结直肠癌CTC分选捕获系统;选取部分有代表性的病例作为重点考察,分析捕获系统与临床病理的一致性。此外,进行此系统与Cell Search检测系统的比对,进一步证明检测体系的可行性和稳定性。结果:对建立的结直肠癌CTC分选捕获系统所用试剂用量和反应条件等作出优化和完善调试后,成功构建针对结直肠癌循环肿瘤细胞捕获系统:高精度、高稳定性的分选、捕获、鉴定系统。细胞实验显示EP-IML和EG-IML对结直肠癌细胞均有较高的捕获能力,捕获率可达90%以上。临床实验证实:EP-IML和EG-IML能有效地捕获结直肠癌患者外周血中的CTC,染色效果清晰可辨。与Cell Search检测系统进行比对,发现此检测体系有较强的精确度和更高的稳定性。结论:通过对建立的结直肠癌CTC分选捕获系统各项参数进行逐步优化,一系列综合验证后,此结直肠癌CTC分选捕获系统具有精确度高,稳定性好的特点。第三部分微小RNA mi R-486-5p/mi R-34c-5p在CRC单细胞和组织中的表达目的:临床入组结直肠癌样本,开展对外周血CTC及对应组织样本mi R-486-5p/mi R-34c-5p表达水平及甲基化水平的检测。方法:通过EP-IML和EG-IML磁分选获得的细胞分别提取DNA和RNA,通过荧光定量PCR及q MSP分别进行mi R-486-5p/mi R-34c-5p的表达水平及甲基化水平的检测。选取入组检测结直肠癌CTC患者的配对组织样本,提取DNA和RNA进行反转录后通过荧光定量PCR及q MSP分别进行mi R-486-5p/mi R-34c-5p的表达水平及甲基化水平的检测。检测与之对应的循环肿瘤细胞mi R-486-5p/mi R-34c-5p表达水平及甲基化水平的一致性,建立结直肠癌来源的组织层面与血液层面的一致性分析及引起动态差异的因素。结果:基于CTC分离获得的核酸样本,荧光定量PCR结果显示:来源于结直肠癌患者的mi R-486-5p/mi R-34c-5p的表达水平低于正常人群（P<0.05）;q MSP结果显示:来源于结直肠癌患者的mi R-486-5p/mi R-34c-5p的甲基化水平明显增高（P<0.05）。此外,与CTC对应的组织样本中mi R-486-5p/mi R-34c-5p表达水平及甲基化水平的检测结果显示,与CTC获得的mi R-486-5p/mi R-34c-5p表达水平及甲基化水平一致。结论:通过对来源于临床入组的结直肠癌样本中mi R-486-5p/mi R-34c-5p表达水平及甲基化水平的检测,来源于CTC与来源于组织样本的mi R-486-5p/mi R-34c-5p表达水平及甲基化水平变化趋势一致。第四部分微小RNA mi R-486-5p/mi R-34c-5p过表达及去甲基化对CRC细胞功能的影响目的:分别在mi R-486-5p/mi R-34c-5p过表达及去甲基化状态下对结直肠癌细胞增殖,侵袭,迁移以及凋亡的影响。方法:设置:对照组（NC组）,采用5-Aza进行去甲基化处理,构建mi R-486-5p/mi R-34c-5p的去甲基化组（5-Aza组）,通过慢病毒构建mi R-486-5p/mi R-34c-5p过表达组（mimics组）。在SW480和LOVO结直

关键词： 结直肠癌   miR-22-3p   细胞增殖   细胞迁移   细胞侵袭  

摘要： 目的构建miR-22-3p抑制表达的SW620细胞模型,检测对结直肠癌SW620细胞增殖、迁移、侵袭的影响,探究miR-22-3p在结肠癌中的潜在生物学作用,并利用miR-22-3p靶基因构建结肠癌患者预后模型。 方法从TCGA数据库中下载数据分析miR-22-3p在结肠癌组织和正常组织中的差异表达情况;根据miR-22-3p表达的中位数将原发性结肠癌组织样本分为高低两个表达组并进行Kaplan-Meier生存分析从而证实miR-22-3p的生存预后价值;寻找miR-22-3p作用的靶基因并进行功能富集分析;用单因素cox回归、lasso回归、多因素cox回归从靶基因中筛出合适的预测因子构建结肠癌预后模型;运用Lip 2000将miR-22-3p inhibitor转入SW620细胞中构建抑制表达模型,运用q RT-PCR实验检测miR-22-3p的表达量,验证抑制表达细胞模型是否构建成功;CCK-8法检测抑制miR-22-3p表达后,细胞增殖能力的变化。划痕实验检测抑制miR-22-3p表达后,细胞迁移运动能力的变化。Transwell侵袭实验检测抑制miR-22-3p表达后,细胞侵袭能力的变化。 结果1通过对TCGA数据库中下载结肠癌miR-22-3p转录组数据分析,发现miR-22-3p在结肠癌组织中的表达显著高于正常组织（P<0.05）,并且miR-22-3p的表达量与结肠癌T分期有关（P<0.05）。2通过对miR-22-3p进行生存分析发现高表达组的总生存期明显低于低表达组的总生存期,并具有统计学意义（P<0.05）。3筛选出共同的靶基因535个,在细胞组分富集结果中,主要富集在“转录抑制复合物”,“突触后密度”,“PML体”,“不对称突触”,“神经元间突触”等细胞组分;在分子功能富集结果中,主要富集在“DNA结合转录因子结合”、“肽N-乙酰转移酶活性”、“组蛋白乙酰转移酶活性”、“N-乙酰转移酶活性”等分子功能;在KEGG通路富集结果中,主要富集在“MAPK信号通路”、“癌症中蛋白聚糖”、“调节干细胞多能性的信号通路”、“乳腺癌”、“Fox O信号通路”等通路中。4成功利用miR-22-3p靶基因构建结肠癌预后模型:风险得分=(-0.619311395256288×Exp（PRKAR2A）)+(0.249622373540642×Exp（LTB4R）)+(0.58648170943636×Exp（RNF215）)+(0.170301630542932×Exp（IGF2BP1）)+(0.55676004331761×Exp（GLDN）)+(0.630090304280584×Exp（TCF23）)。并且训练组和测试组的ROC曲线下面积均大于0.7,证明了模型的有效性。5实时荧光定量PCR实验测定miR-22-3p的表达量,转染组相较于对照组和空白对照组相比,miR-22-3p的表达量明显减少,差异具有统计学意义,抑制表达miR-22-3p的细胞模型构建成功。6抑制表达miR-22-3p组实验中,转染miR-22-3p inhibitor的转染组SW620细胞的增殖、迁移、侵袭能力较对照组和空白对照组明显减弱。 结论1生信结果揭示miR-22-3p在结肠癌组织和细胞中表达增高,表达量与结肠癌T分期相关,并且miR-22-3p高表达的患者生存期明显降低,成功利用miR-22-3p的靶基因构建结肠癌预后模型。2实验验证表明抑制miR-22-3p的表达抑制了结直肠癌SW620细胞的迁移、侵袭和增殖能力。 图16幅;表4个;参121篇。