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关键词： 医学细胞生物学   教学改革   创新与实践  

摘要： 医学细胞生物学是一门理论和实践紧密结合的学科,其实验教学环节不仅是培养学生综合素质的重要方面,而且是培养学生动手能力和创新思维的重要环节。在医学细胞生物学实验教学中,探索切实可行的实验教学创新体系,优化教学手段和考核体系,加强师资队伍建设,对于提高学生的动手能力、增强其创新意识和创新能力具有重要意义。

关键词： 高度近视   角膜厚度   角膜内皮细胞  

摘要： 目的：分析增龄性高度近视眼患者角膜内皮细胞生物学特性。方法：将189例197眼年龄365岁的患者按屈光度数分为高度近视眼组和正常对照组，其中高度近视眼组98例103眼，正常对照组91例94眼。应用非接触式自动角膜内皮计测量两组患者角膜内皮细胞的六角形细胞比率（6A）、变异系数（CV）、平均面积（AVE）、平均密度（CD）及中央角膜厚度（CCT），SPSS14．0统计分析软件对两组所测得数据进行统计学分析，两样本均数的比较采用z检验，率的比较采用，检验。结果：高度近视眼患者角膜内皮细胞平均密度减小，但密度〉3000个/mm3。者14眼，对照组为0眼；密度〈2000个／mm^2者11眼，对照组为3眼，2000～3000个／mm^2者78眼，对照组为91眼，内皮细胞平均密度分布两组比较有显著性差异（x^2=19．11，P〈0．05）。同时高度近视眼患者角膜内皮六角形细胞比率降低、细胞变异系数增大，平均面积增大，两组比较均有显著性差异（P〈0．05），中央角膜厚度两组间比较无显著性差异（P〉0．05）。结论：根据角膜内皮的细胞参数和形态学的变化，可以了解内皮的功能储备，预测愈后，借以决定某种手术的设计和取舍。对临床手术医师是一种很有价值的参考指标。

关键词： 微小RNA-206   重组慢病毒载体   乳腺癌   转移  

摘要： 目的 构建微小RNA-206（miR-206）的慢病毒载体转染MCF-7细胞,观察转染效率和细胞生物学特性的改变.方法 针对miR-206有效的靶序列设计合成寡链DNA,经过退火、连接、聚合酶链反应（PCR）筛选、测序鉴定、慢病毒包装、共转染等步骤获得慢病毒LV-hsa-miR-206,将其转染MCF-7细胞,实时定量逆转录聚合酶链反应（RT-qPCR）检测miR-206表达,细胞计数试剂盒（CCK-8）法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期.结果 PCR扩增出插入片段,目的基因的测序结果与GeneBank序列一致.感染慢病毒后,MCF-7的miR-206表达由1.000增加至120.331±1.801;细胞增殖能力显著降低,在转染后第2天由1.420±0.052降低为1.275±0.147,第3天由1.762±0.089降低为1.387±0.093,第4天由2.045±0.235降低为1.269±0.103,凋亡细胞和G2期细胞比例显著增加.结论 成功构建LV-hsa-miR-206慢病毒载体,并在MCF-7细胞中成功表达,miR-206表达水平增加导致细胞的生物学特性发生明显变化.

关键词： 胆囊肿瘤   细胞株   肿瘤转移  

摘要： 目的 建立具有高侵袭转移能力胆囊癌细胞株亚系（GBC-SD-I-2）并观察其生物特性.方法 利用Transwell侵袭小室从人胆囊癌细胞株（GBC-SD）筛选高转移侵袭能力GBC-SD-I-2,光镜下比较细胞形态;克隆形成试验及噻唑蓝法（MTT）检测细胞增殖能力变化;实时定量荧光聚合酶链反应（Real-time PCR）及Western blot检测与上皮-间充质转化（EMT）相关N-钙黏蛋白、β-连环蛋白（β-catenin）的表达变化.结果 成功筛选出高侵袭转移能力细胞亚系.克隆形成试验证明其增殖能力明显增强（克隆形成率：0.711 ±0.021比0.445 ±0.017,P＜0.01）、MTT法显示体外生长能力显著强于母系（P＜0.05）.Real-time PCR检测显示亚系细胞N-钙黏蛋白表达水平明显升高（0.881±0.018比0.102±0.02,P＜0.01）;β-catenin表达明显降低（0.625±0.041比0.275±0.052,P＜0.05）.Western blot检测亚系N-钙黏蛋白表达水平明显升高（0.758±0.012比0.156±0.011,P＜0.01）;β-catenin表达明显降低（0.243±0.014比0.72 ±0.011,P＜0.01）.结论 筛选的胆囊癌细胞亚群GBC-SD-I-2的侵袭转移能力明显增强.

关键词： 干细胞   脐带脐血干细胞   培养基   脐带间充质干细胞   诱导分化  

摘要： 背景:体外培养的脐带间充质干细胞在不同培养体系下生长状态差异显著,因此选取一种更适合的培养基相当必要。目的:对比观察人脐带间充质干细胞在3种培养基中的生长增殖情况,并检测细胞免疫表型以及间充质干细胞的诱导分化能力。方法:在无菌条件下用贴块法收获人脐带间充质干细胞,用T75培养瓶培养传代后,取第3代脐带间充质干细胞分别种入到含体积分数为5%胎牛血清的DMEM/F12培养基、含体积分数为10%胎牛血清的DMEM/F12培养基和Mesen PRO RSTM培养基中,培养第1,3,5,7天进行细胞计数,绘制细胞生长曲线。采用流式细胞仪分析第3代脐带间充质干细胞免疫表型,并检测其成骨及成脂肪诱导分化能力。结果与结论:培养出的第3代人脐带间充质干细胞高表达CD44、CD73、CD90、CD105,不表达CD29、CD31、CD34、HLA-DR。经成脂诱导后,油红O染色可见胞浆中有大量红色小脂滴;成骨诱导后,茜素红染色后镜下可见成骨样细胞团,说明脐带间充质干细胞在体外具有多向分化的潜能。在倒置显微镜下观察可见含体积分数为10%胎牛血清的DMEM/F12培养基中的细胞集落密集,形态均匀,而其他2种培养基中的细胞集落密集程度和形态都不如前者好。在培养传代细胞时,可优先选择含体积分数为10%胎牛血清的DMEM/F12培养基。

关键词： 人脐带间充质干细胞   5-溴脱氧尿嘧啶核苷   增殖   凋亡  

摘要： 目的:探讨5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-bromo-2-deoxyuridine,Brd U)标记人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,h UC-MSCs)的方法及其对细胞存活、增殖以及凋亡的影响。方法:将h UC-MSCs分离培养并进行细胞表面标志物及多向分化潜能鉴定,取第5代细胞以终浓度分别为10、15、20、25μmol/L Brd U进行标记,采用空白Brd U作为对照组,分别培养24、48、72 h及96 h后,台盼蓝排斥实验检测细胞活力;MTT法检测细胞增殖能力;Annexin V-FITC检测细胞存活率及凋亡率,免疫组化法检测各组标记率。结果:台盼蓝排斥实验检测细胞活力都在96%以上,实验组与对照组比较均无统计学意义(不同浓度组间比较P=0.89,各时间点比较P=0.61,时间与不同浓度的交互作用P=0.89)。MTT结果显示Brd U对细胞增殖无抑制(P>0.05)。不同浓度标记组间细胞增殖率及凋亡率的差异(增殖率F=12.02,P<0.001,凋亡率F=6.14,P=0.009)。结论:Brd U标记h UC-MSCs是安全可靠的,Brd U标记h UC-MSCs的最佳剂量和时间为20μmol/L、72 h,适于h UC-MSCs在临床前实验研究的体内示踪。

关键词： 组织构建   组织工程   心脏瓣膜   同种移植   去细胞   去内皮   免疫原性   生物学特性   家兔  

摘要： 背景:目前同种瓣已在临床广泛应用,但移植后远期易发生衰败和钙化。目的:探究同种带瓣主动脉经去内皮和去细胞处理后,生物学特性和免疫原性的变化,寻找更好的同种瓣去细胞处理方法。方法:取家兔带瓣主动脉根部,随机分为新鲜组、去内皮组、去全部细胞组。分别采用苏木精-伊红、Masson、VG染色进行组织形态学观察;生物学特性评价组织厚度、抗张强度、断裂拉伸率、热皱缩温度;通过免疫组织化学染色观察及原子火焰吸收法测定移植物钙含量变化进行免疫原性评价。结果与结论:组织形态学观察发现去内皮和去细胞方案均达到了对应的去细胞目的。与新鲜组相比,去内皮组抗张力性能变化不明显(P>0.05),去细胞组显著下降(P<0.01)。异体移植实验后苏木精-伊红染色观察发现:新鲜组炎性反应最为显著,组织中有大量炎细胞浸润;与新鲜组相比,去内皮组炎性反应明显减轻,炎性细胞数目明显减少,去细胞组炎性反应最轻,仅组织边缘有炎性细胞浸润。免疫组织化学发现:去内皮组和去细胞组CD152表达水平明显高于新鲜组(P<0.05)。钙含量分析发现:去内皮组和去细胞组钙盐含量较新鲜组显著下降(P<0.05)。提示去内皮和去细胞同种带瓣主动脉的免疫原性均显著下降,而去内皮处理能更好地保留同种瓣的抗张性能。

关键词： 国内权威   细胞生物学   自主神经系统   体吸收   肠道健康   消化液分泌   肠道蠕动   血流量   豆类食品   有害菌  

摘要： 很肠胃是人体吸收营养、排出废物的重要器官。美国哥伦比亚大学细胞生物学教授迈克尔·格申曾把肠胃比作人体的＂第二大脑＂。因为它有自主神经系统,可以独立发挥搅拌食物、提取盐分、吸收营养、排泄废物等功能。但是,如此＂全能＂的肠胃实际上很娇气。想要让胃肠少出麻烦,你就要尽量＂讨好＂它。除了注意三餐规律饮食等常识外,国内权威专家还为您给出如下建议。

关键词： 脐带   间充质干细胞   生物学特性  

摘要： 目的探讨脐带(UC)间充质干细胞(MSC)生物学的特性。方法行剖宫产术时采集胎儿UC,采用1g·L-1Ⅱ型胶原酶消化、分离UC-MSC。将第3代UC-MSC随机分为3组:正常对照组、诱导向脂肪细胞分化组和诱导向软骨细胞分化组,分别在光学显微镜下观察UC-MSC形态,流式细胞仪检测UC-MSC表面标志,体外诱导UC-MSC分化为软骨及脂肪细胞。结果第3代UC-MSC经流式细胞仪测定证明,其高表达CD29、CD105、CD166和CD90,不表达CD34、CD45。正常对照组的UC-MSC细胞呈长梭形,排列有明显方向性;诱导向脂肪细胞分化组的UC-MSC细胞呈圆形或近似圆形;诱导向软骨细胞分化组的UC-MSC细胞呈梭形,也有呈圆形或近似圆形。油红O染色证明UC-MSC经诱导分化成脂肪细胞,阿新兰染色UC-MSC经诱导分化成软骨细胞。结论UC-MSC具有多能性,其可作为一种新的MSC来源,并可用于临床干细胞移植。

关键词： 生理性根吸收   牙周膜干细胞   生物学特性   破骨细胞  

摘要： 目的:比较生理性根吸收不同阶段的乳牙牙周膜干细胞(PDLSCs)的生物学特性,检测其对破骨细胞形成和凋亡相关分子的表达情况,为解释生理性根吸收的调控机制提供实验依据。方法:通过分离、培养处于不同生理性根吸收时期的乳牙PDLSCs(未吸收、中度吸收、重度吸收)与恒牙PDLSCs;采用流式细胞术、MTT实验比较各组PDLSCs的免疫表型、细胞增殖能力;采用成骨、成脂诱导与茜素红染色、油红O染色及Real-time PCR检测各期PDLSCs成骨成脂相关基因表达;采用Western blot检测各组PDLSCs的RANKL、OPG与FasL表达。结果:所分离获得各组乳牙PDLSCs表达间充质干细胞标志分子,与恒牙PDLSCs相比具有较强的增殖能力。其中,重度吸收组乳牙PDLSCs与其它组相比成骨能力最强、成脂能力最差。不同根吸收时期的PDLSCs差异表达RANKL、OPG与FasL蛋白。结论:不同根吸收时期乳牙PDLSCs生物学特性存在差异,RANKL、OPG与FasL的差异表达可能对生理性根吸收过程中破骨细胞的形成与凋亡起到调控作用。